鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表達水平及臨床意義

戴惠婷

莆田學院附屬醫院耳鼻咽喉科 福建莆田 351100

鼻咽癌是指發生于鼻咽腔頂部和側壁的惡性腫瘤，近年來我國鼻咽癌的發病率一直居于較高的水平。放療是鼻咽癌的主要治療方法，早中期的患者僅經放療治療后即可治愈，但有部分患者在治療后會出現復發甚至轉移的情況，預后較差[1]。有研究發現脯氨酸羥化酶2（proline hydroxylase2，PHD2）和血小板生長因子-BB（Recombinant Human Platelet Derived Growth Factor-BB，PDGF-BB）在腫瘤細胞的增殖，擴散中起了重要作用，其異常表達影響多種癌癥預后的危險因素[2]；但關于鼻咽癌患者生物分子表達的相關研究較少，基于此本研究就鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表達水平及臨床意義展開探討，旨在為臨床治療提供參考，現將研究報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018 年11 月～2020 年3 月我院腫瘤科收治的鼻咽癌的患者共58例，其中男42例，女性16例，年齡26～63 歲，平均年齡（40.26±4.23）歲。根據鼻咽癌TNM 分期分為：T1～T2 期20例；T3～T4期 38例。根據有無淋巴結轉移分為：轉移36例，無轉移22例。

納入標準：（1）所有患者均符合中國臨床腫瘤學會發布的《頭頸部腫瘤診治指南（2018 版）》中鼻咽癌的相關診斷標準并經病例活檢確診[3]；（2）患者臨床資料完整且自愿簽署知情同意囑。

排除標準：（1）合并其他重要器官嚴重疾病；（2）合并其他惡性腫瘤。

1.2 方法

1.2.1 試劑

兔抗人PHD2 多克隆抗體購自美國賽默飛世爾公司；山羊抗人PDGF-BB 多克隆抗體購自Creative Biomart 公司；SP 系列免疫組化通用型工作液試劑盒、DAB 顯色劑均購自北京欣興唐生物科技有限公司。

1.2.2 檢測方法

所有標本手術切除后立即用10%甲醛溶液固定，組織切片后脫蠟、水化。然后根據S-P 免疫組化染色法對PHD2、PDGF-BB 進行檢測，具體操作嚴格按照試劑盒上的說明進行。每批切片染色均以PB S代替一抗作陰性對照，PHD2、PDGF-BB 用已知陽性表達的組織切片作陽性對照。一抗稀釋比例均為1：100。

1.3 判定標準[4]

根據陽性細胞百分比、染色強度判定。0 分：無陽性細胞；1 分：陽性細胞低于10%，2 分：陽性細胞在11%～15%的范圍內，3 分：陽性細胞超過50%。染色強度判定：0 分：未見染色，1 分：淡黃色，弱陽性；2 分：棕黃色，中等陽性；3 分：棕褐色，高陽性。總積分：上述2 項評分的和。低表達水平為3 分及以下，高表達水平為4 分及以上。

1.4 統計學方法

本研究數據均采用SPSS18.0 軟件進行統計分析，計量資料通過平均數±標準差描述，采用t 檢驗；計數資料通過率或構成比描述，并采用χ2檢驗；相關性采用Pearson 相關分析；以P ＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織和癌旁組織的表達水平 見表1

表1 PHD2、PDGF-BB 在鼻咽癌組織和癌旁組織的表達水平[n(%)]

2.2 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織的表達水平與患者臨床特征的關系 見表2～3

表2 PHD2 在鼻咽癌組織的表達水平與患者臨床特征的關系[n(%)]

表3 PDGF-BB 在鼻咽癌組織的表達水平與患者臨床特征的關系[n(%)]

2.3 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌組織的表達水平與患者病理特征的相關性分析

經Pearson 進行相關性分析發現，鼻咽癌患者PHD2 水平與T 分期呈負相關（r=-0.623，P ＜0.05），與淋巴結轉移呈負相關（r=-0.837，P ＜0.05）；PDGF-BB 水平與患者T 分期呈正相關（r=0.582，P＜0.05），與淋巴結轉移呈正相關（r=0.736，P ＜0.05）。

3 討論

鼻咽癌患者在疾病早期可無任何癥狀，隨著疾病的發展，可出現頸部腫塊，聽力下降、耳鳴、耳部疼痛，耳部感染并反復發作，頭痛等癥狀；多數患者是在頸部出現腫塊去醫院檢查時才懷疑鼻咽癌；目前認為，鼻咽癌的發生主要與EB病毒感染和環境等因素相關，此外，大量吸煙、食用腌制食品、空氣污染等不健康的生活方式也可誘發該病的發生[5]。

近年來，對于癌癥發病分子機制的研究越來越多，已有多數學者經研究證實實質性腫瘤微環境的主要特點是缺氧，缺氧的環境能使腫瘤細胞向惡性發展；脯氨酸羥化酶 2（PHD2）是促進缺氧誘導因子（hypoxiainducible factor，HIF）降解關鍵步驟的限速酶，其在人體的各種組織的均有表達，PHD2 以氧為輔助機制發揮作用，因此在缺氧的條件下該酶會被抑制；因此認為PHD2 介導腫瘤缺氧的微環境的形成，亦有研究發現PHD2 可能促進腫瘤細胞的增殖與轉移，與腫瘤患者的預后具有一定的相關性[6，7]；在本研究中，通過檢測鼻咽癌患者癌組織與癌旁組織發現PHD2 在鼻咽癌組織中表達水平低，且明顯低于癌旁組織（P ＜0.05），通過進一步分析PHD2 癌組織表達水平與患者病理特征患者的關系發現TNM 分期為T3～T4 期，有淋巴轉移的患者PHD2 的表達水平明顯低于T1～T2 期，無轉移的患者（P<0.05），經相關性分析發現其與T 分期和淋巴結轉移呈負相關，與上述研究相似；血小板生長因子-BB（PDGF-BB）是血小板生長因子（PDGF）的一種二聚體結構，有相關研究發現，該因子能夠刺激腫瘤血管形成，且與腫瘤TNM分期、淋巴結轉移等密切相關[8]；研究結果顯示TNM分期為T3～T4 期，有淋巴轉移的患者PDGF-BB 表達水平明顯高于T1～T2 期，無轉移的患者，與T 分期。淋巴轉移呈正相關，與國外諸多學者研究結果一致；臨床數據顯示，鼻咽癌晚期淋巴轉移的患者療效預后差，這提示PHD2、PDGF-BB 表達水平對鼻咽癌患者預后有一定的影響。

綜上所述，鼻咽癌患者PHD2 在癌組織中主要為低表達、PDGF-BB 高表達，上述指標與T 分期及淋巴結轉移等病理特征有相關性，可作為臨床評估患者病情情況以指導治療的參考指標。