寧夏固原地區肉母牛三種疫病免疫抗體監測分析

鄧占釗，楊春蓮，謝文青，趙永紅，擺世林，梁小軍

（1.寧夏農林科學院 動物科學研究所，銀川 750002；2.彭陽縣畜牧技術推廣服務中心，寧夏 彭陽 756599；3.固原市畜牧技術推廣服務中心，寧夏 固原 756000；4.海原縣畜牧產業發展服務中心，寧夏 海原 755299；5.海原縣國有林場和草原建設服務中心，寧夏 海原 755299；6.寧夏向豐農牧業開發有限公司，寧夏 西吉 756200）

口蹄疫是由口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）引起的，發生于偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，世界動物衛生組織將口蹄疫列為動物A類烈性傳染病［1］。口蹄疫病毒分為O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3、亞洲Ⅰ型7種血清型［2］，感染后病畜出現發熱、跛行、皮膚出現泡狀斑疹等癥狀，犢牛感染嚴重時可能會出現心臟麻痹并迅速死亡的情況［3］，我國農業部（現為農業農村部）規定牛羊口蹄疫的免疫效果達到70%為合格［2］。

布魯氏桿菌病（Brucellosis）又稱“波浪熱”“地中海弛張熱”，是由布魯氏桿菌引起的人畜共患的自然疫源性傳染病，是我國《傳染病防治法》規定的需要報告的二類傳染病［4］。感染后引起人的波浪熱、妊娠動物流產以及公畜生殖功能障礙等病癥［5］，布魯氏桿菌病的傳播對世界范圍內的生命健康與社會安定造成重大威脅。

牛傳染性鼻氣管炎（infectious bovine rhinotracheitis，IBR）又稱“壞死性鼻炎”“紅鼻病”［6］，是由Ⅰ型牛皰疹病毒（BHV-1）引起的牛呼吸道接觸性傳染病［7］，是我國《傳染病防治法》規定的需要報告的二類傳染病。感染后病畜的臨床表現主要以上呼吸道癥狀和流產為主要特點［6］，該病在世界范圍內流行，對母牛產奶量、公牛繁殖力及役用牛的使役力均有較大影響。

目前，我國對動物疫病的防治采取“預防為主、防重于治”的原則，在臨床上疫苗免疫為預防疫病的首要措施［8］。為了解2018—2020年寧夏回族自治區（O型、A型）口蹄疫、布魯氏桿菌、牛傳染性鼻氣管炎免疫情況，試驗采用ELISA檢測方法對固原市兩地區的肉母牛6 140份血清樣本進行免疫抗體監測，以期為規模化養殖場及時調整免疫程序和制訂疫病防控措施提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

2018—2020年，從寧夏回族自治區固原市西吉縣馬溝村（A地區）、楊坪村（B地區）兩地區共采集基礎母牛血清樣本6 140份，A、B兩地肉牛基礎母牛品種均為西門塔爾。采用真空抗凝采血管通過基礎母牛尾靜脈采集血液。A地區2018年采集血樣900份，2019年1 140份，2020年1 500份；B地區2018年采集血樣700份，2019年900份，2020年1 000份。

1.2 血液的處理

血樣采用離心機在3 000 r／min離心15 min分離血清，所有血清于-80℃保存。

1.3 主要試劑儀器與試劑

移液器（Eppendorf plus）、Eppendorf Centrifuge（5418）離心機，Eppendorf公司產品；MULTISJKAN酶標儀（MK3），Thermo公司產品。所有試驗儀器均來源于寧夏農林科學院動物科學研究所動物疫病實驗室。

O型口蹄疫抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（E310306）、A型口蹄疫抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（E310307），購自深圳芬德生物技術有限公司；布魯氏桿菌ELISA檢測試劑盒（P04130-10）、牛傳染性鼻氣管炎ELISA檢測試劑盒（99-41459），購自美國愛德士（IDEXX）生物科技股份有限公司。

1.4 檢測項目和方法

在寧夏農林科學院動物科學研究所動物疫病實驗室開展病原抗體ELISA檢測。嚴格按照O型口蹄疫抗體阻斷ELISA檢測試劑盒、A型口蹄疫抗體阻斷ELISA檢測試劑盒、布魯氏菌抗體檢測試劑盒、牛傳染性鼻氣管炎ELISA檢測試劑盒的說明書進行血清樣本抗體檢測。試驗數據采用北京愛德士元亨生物科技有限公司提供的數據分析軟件（xChek）計算平均值，并結合說明書中的陰性和陽性結果判定標準進行樣品陰陽性判斷。

2 結果

2.1 A地區

抗體檢測結果見表1。

表1 2018—2020年固原市A地區疫病抗體檢測結果

由表1可以看出：2018—2020年間，O型口蹄疫、A型口蹄疫、布魯氏桿菌病、牛傳染性鼻氣管炎的總體陽性率分別為92.75%、93.64%、97.78%；其中O型口蹄疫抗體陽性率分別為95.00%、94.91%、99.27%；A型口蹄疫抗體陽性率分別為92.44%、91.23%、94.13%，布魯氏桿菌抗體陽性率分別為93.78%、98.77%、100%，牛傳染性鼻氣管炎抗體陽性率為89.78%、89.65%、97.73%。

2.2 B地區

抗體檢測結果見表2。

由表2可以看出：O型口蹄疫、A型口蹄疫、布魯氏桿菌病、牛傳染性鼻氣管炎的總體陽性率分別為93.96%、95.19%、96.33%，其中O型口蹄疫抗體陽性率分別為95.29%、98.89%、98.90%，A型口蹄疫抗體陽性率分別為92.57%、92.44%、96.00%，布魯氏桿菌抗體陽性率分別為97.14%、99.22%、99.00%，牛傳染性鼻氣管炎抗體陽性率為90.86%、90.22%、91.40%。

表2 2018—2020年固原市B地區疫病抗體檢測結果

3 討論與建議

2018—2020年免疫抗體檢測結果顯示，固原市兩地區肉牛O型口蹄疫、A型口蹄疫、布魯氏桿菌病、牛傳染性鼻氣管炎的整體抗體陽性率均在92%以上，呈逐年增長的趨勢。說明這兩地區的基層動物防疫工作職責落實到位，制定的肉牛免疫程序正確有效。A、B地區整體抗體陽性率有一定的差異，分析原因可能有以下幾點：一是肉牛個體間存在差異；二是防疫人員技術水平不一，不同類型抗體疫苗及疫苗注射方式也會影響疫苗免疫效果［9］；三是各地采集方式和保存血清條件不一致，不同運輸條件和時長都會對血清抗體有不同程度的影響［10］。

寧夏回族自治區家畜養殖規模逐年擴大，為鞏固當前動物疫病防控工作成效，建議在今后的防疫工作中注意以下幾點：一是加強基層獸醫隊伍建設，定期對基層技術人員進行培訓，提高基層技術人員的理論知識和實際操作能力；二是養殖場需建立更加全面合理的免疫程序機制，提高動物對重大疫病的抵抗力；三是持續做好重大疫病的抗體監測工作，定期抽檢，發現問題及時補免，確保免疫到位；四是在進行動物免疫時，免疫劑量、免疫部位及免疫注射部位等要求一定要按照規范的免疫程序進行；五是規范樣品的采集及運輸條件，避免因運輸條件不當影響血清抗體效價。