可溶性E-鈣黏連蛋白對良惡性乳房腫塊的鑒別診斷價值

閭志堅 甘從存 王康翰

乳房腫塊是最常見的乳腺疾病，其診斷、鑒別診斷和處理在乳腺外科診療中具有極其重要的臨床意義。乳腺癌作為女性最常見的惡性腫瘤之一，近年來，其發病率及病死率不斷上升，已嚴重影響婦女的身心健康及生命安全，因此，乳腺癌的早期診療至關重要。上皮型鈣黏連蛋白(E-cadherin,EC)是上皮細胞中重要的細胞黏附因子，參與了多種腫瘤的發生、發展過程，通過胰酶作用，EC可以形成1個分子量約為80 kDa的血清可溶性E-鈣黏連蛋白(soluble E-cadherin,sEC)，該片段作為EC的降解形式，在健康人的外周血中可以檢測出來，且在腫瘤患者中常為高表達，并與多種腫瘤的預后息息相關。外周血sEC水平升高多見于卵巢惡性腫瘤和胃惡性腫瘤，但關于乳腺癌患者外周血sEC的有關研究仍較少。本研究檢測了120例患有乳房腫塊的女性患者外周血中sEC水平，旨在探討sEC在乳房良惡性患者間的表達差異及其臨床意義，以期為乳腺癌患者的診斷與治療提供新的思路。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2017年3月至2020年9月在滁州市第一人民醫院接受診療的120例女性乳房腫塊患者作為研究對象，回顧性分析患者的臨床資料。根據《腫瘤病理規范化診斷標準2018版》，確診為乳腺癌的62例患者作為觀察組，確診為良性乳房腫塊的58例患者作為對照組。

1.2 納入與排除標準 納入標準：①經病理學檢查明確診斷者；②首次發病，尚未接受手術、放療或化學治療者；③臨床分期為Ⅰ～Ⅲ期者。排除標準：①存在手術禁忌者；②合并其他組織起源的惡性腫瘤者；③惡性腫瘤復發轉移者；④處于妊娠期或哺乳期者；⑤有嚴重基礎疾病或免疫系統疾病者。

1.3 檢測方法

1.3.1 血清樣本收集與處理 采集兩組患者外周血各3～5 mL，血樣采集后，放入4℃冰箱靜置20 min，然后5 000 r/min離心20 min，分離血清，置于-80℃冰箱儲存。檢測前冰上融化，12 000 r/min離心20 min，去除雜質，檢測糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)和糖類抗原15-3(carbohydrate antigen 15-3，CA15-3)的表達水平。

1.3.2 血清sEC的檢測 采用酶聯免疫吸附測定法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測血清sEC的水平，ELISA定量試劑盒購于美國R&D公司。主要操作步驟如下：①分別向反應板中加入50 μL標準品和稀釋后的血清，室溫孵育2 h，洗板；②分別向反應板中加入200 μL辣根過氧化物酶標記的重組人EC，室溫孵育2 h，洗板；③分別向反應板中加入200 μL四甲基聯苯胺底物顯色液，避光室溫孵育30 min；④分別向反應板中加入50 μL反應終止液；⑤在反應終止后的30 min內，檢測樣品在450 nm處的吸光度，并繪制標準曲線，根據吸光度計算其濃度。

1.4 觀察指標 觀察比較兩組患者血清中sEC、CA125和CA15-3的表達水平，分析3者對乳腺癌的診斷價值，比較乳腺癌患者中sEC的表達水平與臨床病理特征的相關性。

2 結果

2.1 兩組患者臨床資料比較 觀察組患者外周血中sEC、CA125和CA15-3的表達水平均高于對照組，差異有統計學意義(

P

<0.05)。見表1。

表1 兩組患者臨床資料比較

2.2 血液學指標對乳腺癌的診斷價值 以《腫瘤病理規范化診斷標準2018版》為金標準，以sEC、CA125和CA15-3為檢驗變量，以病理診斷結果為狀態變量，制作ROC曲線。結果顯示，sEC、CA125和CA15-3對應診斷的最佳截斷值分別為2 154.50 ng/mL、41.50 U/mL和37.50 U/mL，曲線下面積(area under the cure, AUC)分別為0.850(95%CI：0.785～0.915)、0.756(95%CI：0.668～0.844)和0.858(95%CI：0.793～0.922)，靈敏度分別為96.8%、51.6%和87.1%，特異度分別為55.2%、96.6%和67.2%。見表2。

表2 sEC、CA125和CA15-3指標對乳腺癌的診斷價值

2.3 不同sEC水平乳腺癌患者的臨床病理特征比較 根據ROC曲線結果，sEC的最佳截斷值為2 154.50 ng/mL，將乳腺癌患者分為高水平組(>2 154.50 ng/mL)42例和低水平組(≤2 154.50 ng/mL)20例。結果顯示，兩組患者淋巴結轉移構成進行比較，差異有統計學意義(

P

<0.05)，兩組患者的年齡、腫瘤大小、分期和Her-2表達等進行比較，差異無統計學意義(

P

>0.05)。見表3。

表3 不同sEC水平乳腺癌患者的臨床病理特征比較[例(%)]

3 討論

乳腺彩超、鉬靶和磁共振檢查作為目前乳腺癌的常規輔助檢查，雖然很大程度上提高了乳腺癌的檢出率，但在早期診斷中仍然存在一定的局限性。如何進一步提高乳腺癌患者的早期診斷效率，從而改善患者的預后，一直是臨床工作的研究熱點。血清學指標具有簡便、創傷性小、可重復性較高及可隨訪率高等優點，高可信度血清學指標已發揮出篩查作用，如CA125和CA15-3在乳腺癌的輔助診斷中具有重要地位，但臨床上仍有部分乳腺癌患者呈現出低表達狀態。因此，尋找新型腫瘤標志物意義重大。

EC是一種跨膜糖蛋白，廣泛分布于上皮組織，是維持細胞間黏附作用的重要媒介，在乳腺癌等上皮性腫瘤組織中表達下調，改變細胞間的黏附性，促使腫瘤細胞發生轉移、浸潤，此外，還有調節組織形態變化和維持上皮細胞的正常極性和完整性等功能。本研究結果顯示，觀察組患者外周血中sEC、CA125和CA15-3的表達水平均高于對照組，提示sEC具有腫瘤分子標志物屬性。EC的表達受到基因突變、啟動子甲基化以及相關蛋白酶等多種因素的調控，其在腫瘤組織中表達降低，可使細胞間的黏附力下降，腫瘤細胞容易出現分散，繼而導致腫瘤組織出現浸潤生長、轉移。研究發現，EC可通過限制活性氧介導的細胞凋亡促進腫瘤進展，而在轉錄上，EC的表達降低可能與轉化生長因子-β等介導的細胞凋亡信號通路相關基因的上調有關，在腫瘤組織中可能存在相關上調的基因，導致EC的表達下降。但目前EC的具體調控機制仍未闡明，需進一步研究。

本研究結果顯示，sEC診斷早期乳腺癌的靈敏度為96.8 %，特異度為55.2%，AUC為0.850。CA15-3作為目前公認的乳腺癌相關腫瘤標志物，與患者臨床分期及腫瘤組織狀態息息相關，其表達水平隨著乳腺癌患者病情加重而升高。研究發現，sEC與患者的臨床分期和淋巴結轉移等密切相關。本研究結果顯示，乳腺癌患者sEC表達水平與患者的年齡、腫瘤大小、分期和Her-2表達情況均無關(

P

>0.05)，僅與患者有無淋巴結轉移有關(

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<0.05)。可能與樣本量及樣本來源有關，有待行多中心、大樣本檢測予以進一步驗證。

綜上所述，本研究結果證實了sEC在乳腺癌患者中表達水平升高，與淋巴結轉移情況密切相關，且相比于傳統血液指標CA125和CA15-3，sEC在乳腺癌早期診斷中也具有一定的診斷價值，這對提高乳腺癌早期診斷效率意義重大，值得進一步研究。