結直腸癌患者AFP和CEA表達與其臨床病理特征的相關性研究

趙 艷 王萬里 李 賓

結直腸癌為臨床上非常常見的消化道惡性腫瘤，且發(fā)病人數(shù)逐年增加。當前胃腸腫瘤外科治療水平取得了長足進步，但結直腸癌5年生存率仍無顯著提高[1]。究其原因主要是因為手術以及化療后腫瘤復發(fā)和轉移導致了結直腸癌的治療失敗，特別是約50%中晚期進展期結直腸癌患者根治術后死于轉移和(或)復發(fā)[2-3]。因此要提高結直腸癌患者的預后和生存期，在研究促進結直腸癌病理進展的因素和機制方面顯得極其重要。著分子生物學研究的不斷發(fā)展，腫瘤標志物已廣泛應用于腫瘤診斷、病情監(jiān)測或預后判斷[4-5]。甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)是目前診斷肝癌最重要的腫瘤標記物，能夠排除良性肝病及懷孕等因素的影響，已被廣泛用于肝癌的診斷，但是在結直腸癌中的診斷效應還不明確[6-7]。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)具有靈敏度高、特異性好、半衰期短等優(yōu)點，可協(xié)助腫瘤的分期和預后的判斷[8-9]。本文采用免疫組化技術，檢測了120例結直腸癌患者的病灶組織和癌旁正常結直腸黏膜組織中AFP和CEA的表達情況，并結合該患者主要的臨床病理特征參數(shù)，分析并探討結直腸癌患者AFP和CEA表達與臨床病理特征的相關性，揭示兩者在結直腸癌中表達的相關性。為臨床上進一步了解結直腸癌發(fā)生發(fā)展的生物學行為提供依據(jù)。現(xiàn)總結報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2017年2月至2020年4月選擇在本院進行診治的結直腸癌患者120例作為研究對象，納入標準：均經(jīng)手術后病理診斷證實為結直腸癌；具有完整的臨床資料；患者簽署了知情同意書；醫(yī)院倫理委員會批準了此次研究；年齡20～75歲。排除標準：危重或患有嚴重心臟疾病的患者；臨床資料缺乏者；妊娠與哺乳期婦女；合并其他部位腫瘤者。

1.2 AFP和CEA的免疫組化分析

取所有患者的病灶組織標本(病灶組)與正常結直腸黏膜組織標本(距腫瘤邊緣≥5 cm，正常組)，經(jīng)4%甲醛固定，于濃度梯度酒精中脫水，二甲苯中浸潤觀察組織塊至透明為止。用石蠟Ⅰ(<60 ℃，1 h)浸潤、石蠟Ⅱ(60 ℃，2 h)包埋后制成石蠟組織塊，用石蠟切片機5 μm 厚度進行連續(xù)切片，常規(guī)制片、封片。

采用免疫組化對標本分別進行AFP和CEA蛋白表達的檢測，抗AFP抗體和抗CEA抗體滴度分別為1∶200和1∶400。隨機計數(shù)5 個高倍鏡視野(×400)，統(tǒng)計陽性細胞數(shù)目和顯色度。陽性強度采用半定量法，按陽性細胞占癌細胞的百分數(shù)評分，結果觀察采用盲法。

1.3 病理資料調查

調查所有患者的臨床病理資料，包括性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤最大直徑、組織分化程度、臨床分期、浸潤深度、淋巴結轉移等。

1.4 統(tǒng)計方法

統(tǒng)計學處理應用SPSS 22.00統(tǒng)計軟件處理，計量資料用均數(shù)±標準差表示，計數(shù)數(shù)據(jù)以百分比表示，對比方法為t檢驗與卡方χ2分析，相關性分析采用Spearman 等級相關性分析法，均采用雙側檢驗，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 AFP和CEA表達陽性率對比

病灶組AFP和CEA表達陽性率分別為71.7%和78.3%，顯著高于正常組的6.7%和10.8%(P<0.05)，見表1。

表1 兩組AFP和CEA表達陽性對比(例，%)

2.2 臨床病理特征

在120例患者中，年齡≥54歲76例，<54歲44例；男性80例，女性40例；發(fā)病位置：結腸48例，直腸72例；腫瘤最大直徑≥4 cm 56例，<4 cm 64例；組織學分化：高、中分化70例，低分化50例；浸潤深度：漿膜層以下66例，漿膜或以外54例；淋巴結轉移：陽性68例，陰性52例；遠處轉移：陽性26例，陰性94例。

2.3 AFP和CEA表達與臨床病理特的相關性

在120例患者中，不同組織學分化、浸潤深度、淋巴結轉移患者的AFP和CEA表達陽性率對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 AFP和CEA表達與結直腸癌臨床病理特征的關系/例

2.4 AFP和CEA表達的相關性

AFP表達陽性的86例患者中，CEA表達陽性者78例，表達陰性8例。在34例 AFP表達陰性的標本中，CEA 表達陽性16例，表達陰性18 例。見表3。Spearman 等級相關性分析顯示：AFP和CEA表達存在相關性(γ=0.477，P=0.013)。

表3 AFP、CEA在結直腸癌中表達的相關性/例

3 討論

結直腸癌在發(fā)病初期病情較隱匿，臨床確診時多已發(fā)展至中晚期，且常伴有淋巴結轉移或遠處轉移，導致死亡率比較高。早期發(fā)現(xiàn)和診斷結直腸癌，對患者的治療方式的選擇改善預后具有重要意義[10]。AFP是白蛋白家族成員之一，分子量約為68 kDa，共有590個氨基酸[11]。已有研究顯示AFP蛋白的過表達屬于病理狀態(tài)且與腫瘤細胞的生長、浸潤、轉移密切有關，并對患者預后的評估起到重要的作用[12]。不過AFP的敏感性和特異性較差，并存在一定的假陽性情況。腫瘤標志物是腫瘤組織和細胞由于癌基因異常表達所產(chǎn)生的抗原和活性物質，包括抗原、抗癌基因、激素、受體等[13]。CEA屬于腫瘤細胞表面結構抗原，是具有人類胚胎抗原特異性決定簇的酸性糖蛋白。其作為1種非特異性腫瘤標志物，當細胞發(fā)生癌變時，腫瘤細胞的基因調控受損，大量的CEA可釋放進入血液，導致血清CEA增多[14]。并且CEA可通過1種粘附分子發(fā)揮作用，能干擾細胞正常的粘附力，從而導致細胞移動性增強，促進惡性腫瘤的增殖與轉移[15]。有研究顯示凡內胚層起源的惡性腫瘤組織中均有CEA的產(chǎn)生，故CEA廣泛存在于肺癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌等多種惡性腫瘤患者的血清中[16-18]。本研究顯示病灶組的AFP和CEA表達陽性率為71.7%和78.3%，顯著高于正常組的6.7%和10.8%(P<0.05)，表明結直腸癌患者多伴隨有AFP和CEA的高表達。

當前結直腸癌發(fā)病率以每年3%～4%的速度上升，并有繼續(xù)增長與年輕化的趨勢，如何有效的評估結直腸癌的病情與治療療效已被廣泛關注[19]。AFP的表達與肝癌密切相關，AFP水平在肝癌患者中較良性肝占位患者顯著增高，其受腫瘤病灶數(shù)、腫瘤大小等特性影響，在區(qū)分肝臟炎癥及妊娠等方面也具有顯著優(yōu)勢[20]。既往研究也表明，血清AFP含量隨著肝癌的生長成線性升高，對于肝癌具有很高的診斷特異性，AFP表達陽性預測肝癌發(fā)生的正確率在90%以上[21-22]。CEA在結直腸癌中過表達與細胞發(fā)生惡變及腫瘤進展關系密切，在病理狀態(tài)下表達激活時，能夠參與惡性腫瘤的浸潤與轉移[23-24]。本研究顯示不同組織學分化、浸潤深度、淋巴結轉移的結直腸癌患者的AFP和CEA表達陽性率陽性率對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Spearman 等級相關性分析顯示AFP和CEA表達存在相關性(γ=0.477，P=0.013)，進一步證實AFP過表達可能通過激活CEA的表達促進腫瘤的進展，兩者在結直腸癌發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著正向協(xié)同的調控作用。本研究也存在一定的不足，調查的樣本數(shù)量比較少，且沒有進行健康人的調查分析，將在后續(xù)研究中進行深入探討。

綜上所述，AFP和CEA在結直腸癌組織中均呈高表達狀態(tài)，與結直腸癌浸潤、轉移有關的臨床病理特征密切相關，兩者在結直腸癌中的編導存在正相關性。