如何檢測(cè)新型冠狀病毒?

杜云鶴

2020年新冠肺炎就如同一場(chǎng)沒(méi)有硝煙的戰(zhàn)爭(zhēng)在全球蔓延，對(duì)全人類的生活造成了極大影響。假期小劉去青島旅游，但是在旅游結(jié)束后卻聽(tīng)到當(dāng)?shù)赜行鹿诜窝滓咔槌霈F(xiàn)，于是小劉很快就做好防護(hù)，到當(dāng)?shù)氐尼t(yī)院進(jìn)行檢測(cè)，但是聽(tīng)說(shuō)新冠病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)有病毒核酸和血清抗體兩種檢測(cè)方法，到底是要檢測(cè)哪一個(gè)？還是都要檢測(cè)呢？有什么區(qū)別和聯(lián)系嗎？對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，就讓我們一起來(lái)認(rèn)識(shí)一下新冠病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法吧！

1新型冠狀病毒核酸檢測(cè)

在已知生命體中，核酸是十分重要的組成部分，核酸的工作是對(duì)遺傳信息的攜帶，脫氧核糖核酸（DNA）與核糖核酸（RNA）是兩個(gè)主要類型。RNA是新型冠狀病毒攜帶的核酸物質(zhì)，類似于病毒的“指紋”，而且分子排列比較獨(dú)特。用特用的技術(shù)可以對(duì)新冠進(jìn)行核酸檢測(cè)，然后可以在RNA的尋找下，確定病毒是否存在。實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法因?yàn)槌鼋Y(jié)果較快（4～6 h），是目前常用的新冠病毒核酸檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)過(guò)程主要分為三步：

1.1 提取病毒的 RNA

病毒RNA的提取，較為常見(jiàn)的方式就是咽拭子、鼻拭子等，通過(guò)對(duì)標(biāo)本的采集，然后將核酸提取試劑加進(jìn)去，對(duì)病毒的外殼進(jìn)行破壞，殼內(nèi)的RNA核酸得以釋放。

1.2 把病毒 RNA“反轉(zhuǎn)錄”成 cDNA

這個(gè)步驟其實(shí)也不復(fù)雜，在反轉(zhuǎn)錄技術(shù)（RT）的應(yīng)用下，可以實(shí)現(xiàn)單鏈 RNA的配對(duì)，然后就可以組成雙鏈 DNA——cDNA。這是由于病毒 RNA的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，極易碎掉，所以為了讓其更加穩(wěn)定，能為后期的檢測(cè)提供支持，就要轉(zhuǎn)化結(jié)構(gòu)。

1.3 進(jìn)行病毒 cDNA 的擴(kuò)增與檢測(cè)

cDNA可以在 PCR 技術(shù)的應(yīng)用下進(jìn)行大量的復(fù)制。所以 cDNA 的雙鏈與衣服的拉鏈類似，拉開(kāi)拉鏈的過(guò)程其實(shí)就是PCR 的過(guò)程， cDNA分為兩個(gè)拉鏈，雙鏈需要經(jīng)過(guò)配對(duì)才能使用。兩條拉鏈不斷復(fù)制的過(guò)程，其實(shí)就是新冠病毒 cDNA增長(zhǎng)的過(guò)程，試劑盒中熒光探針在cDNA擴(kuò)增期間，也開(kāi)始工作，這時(shí)熒光信號(hào)被釋放，cDNA的每次增長(zhǎng)，就會(huì)讓信號(hào)增強(qiáng)，熒光信號(hào)的增加Ct值也就可以通過(guò)PCR檢測(cè)儀記錄，然后就可以通過(guò)Ct值的分析，得出對(duì)應(yīng)的結(jié)果。

核酸檢測(cè)在實(shí)際應(yīng)用中，其實(shí)是對(duì)病原體的指紋進(jìn)行檢測(cè)，具有較高的精準(zhǔn)性，核酸也是病毒入侵后最先產(chǎn)生的，所以在診斷期間，核酸檢測(cè)發(fā)揮著積極作用。但是就檢測(cè)來(lái)看，不可避免誤差。如果檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果為陰性，這時(shí)也難以排除受檢者是否患有新冠，需要對(duì)假陰性的因素進(jìn)行排除如當(dāng)樣本質(zhì)量不好時(shí)，樣本沒(méi)有提取到病毒感染部位，或者樣本中沒(méi)有病毒等，也會(huì)出現(xiàn)假陰性的可能。還有受到檢測(cè)技術(shù)、運(yùn)輸?shù)雀鞣N因素的影響，也會(huì)出現(xiàn)假陰性的情況。

2新型冠狀病毒血清抗體檢測(cè)

人體在受到病毒入侵后，機(jī)體就會(huì)進(jìn)行自我調(diào)節(jié)，對(duì)病原體進(jìn)行抵抗，然后產(chǎn)生特異性抗體。在新冠病毒的檢測(cè)上，可以通過(guò)血液樣本的檢測(cè)，來(lái)對(duì)患者是否有新冠病毒的特異性抗體進(jìn)行判斷，這樣就有為新冠的確證提供了依據(jù)。

新冠病毒血清特異性抗體檢測(cè)主要有IgM、Igg兩種，IgM是近期感染的標(biāo)志，在確診后的4 d以內(nèi)就可以檢出IgM抗體，而且峰值在15 d左右達(dá)到頂峰;Igg抗體檢出則需要7 d，而且隨著時(shí)間延長(zhǎng)檢出率持續(xù)上升。在新冠病毒的助診斷中，血清Igg和IgM抗體是比較有效的診斷方法，Igg和IgM聯(lián)合檢測(cè)可提高診斷敏感性，同時(shí)也可以檢測(cè)感染者體內(nèi)特異性抗體的變化情況、人群的易感狀況等，有助于疾病的防治和疫苗研發(fā)。常用的檢測(cè)方法有膠體金、磁微粒化學(xué)發(fā)光、ELISA，操作起來(lái)較核酸檢測(cè)簡(jiǎn)便、快捷、成本低等優(yōu)勢(shì)。

就血清學(xué)檢測(cè)來(lái)看，在實(shí)際應(yīng)用中依然存在有一定不足，就算抗體出現(xiàn)的再早，要想到達(dá)一定對(duì)檢測(cè)水平，也需要一段時(shí)間，所以在初期的檢測(cè)期間，結(jié)果極有可能是假陰性。而且檢測(cè)用的標(biāo)準(zhǔn)抗原相互作用的抗體可能會(huì)存在于血液中，也就是說(shuō)會(huì)發(fā)生交叉反應(yīng)，從而在假陽(yáng)性的誤導(dǎo)下，讓醫(yī)務(wù)人員出現(xiàn)誤診。

3小結(jié)

通過(guò)以上了解，我們知道兩種檢測(cè)方法各有利弊，應(yīng)客觀對(duì)待其不同，合理應(yīng)用，兩種方法的聯(lián)合使用，則可以更有效發(fā)現(xiàn)病毒，讓病毒無(wú)處遁形。同時(shí)在選擇上，我們更應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)氐姆酪吖ぷ饕箝_(kāi)展檢測(cè)，像小劉這種剛剛從疫區(qū)回來(lái)人員，為防止再傳播及提高檢測(cè)準(zhǔn)確性，還應(yīng)集中隔離使用多種方法多次檢測(cè)。總之，疫情防控期間大家要積極配合醫(yī)務(wù)人員的建議與指導(dǎo)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)感染病例，維護(hù)自身和全社會(huì)的公共衛(wèi)生安全。