武漢地區獻血者TPPA確證陽性人群特征分析*

陳邦銳 趙磊 許婷婷 劉濤 張紅 樂淼

梅毒是由梅毒螺旋體（treponema pallidum，TP）感染引起的一種慢性傳染性疾病，傳播途徑主要包括性接觸、血液傳播、垂直傳播。近年來，梅毒在我國的發病率迅速攀升，2010年上升至26.86/10萬，居全國乙類傳染病的第3位。武漢地區梅毒感染人群呈上升趨勢，防治形勢嚴峻[1]。而作為一家采供血機構，為了保證血液安全，一直遵守國家行業法律法規，不斷提高血液檢測能力。行業內針對無償獻血者的梅毒感染情況分析，多采用ELISA檢測數據，鑒于目前的ELISA試劑，多有假陽性灰區值樣本，所以其梅毒陽性獻血者并不能反應真實的感染情況，對于單側試劑陽性或灰區值沒有剔除，沒有進一步對ELISA陽性樣本做梅毒螺旋體明膠凝集實驗（TPPA）確證分析。TPPA采用的是純化的致病性梅毒螺旋體 （Nichols株）抗原成分包被在人工載體明膠粒子上，對梅毒特異性抗體檢測具有高度特異性和敏感性，是目前公認的梅毒確證試驗。因此，為了解武漢地區自愿無償獻血人群的梅毒流行病學特征，加強臨床用血安全控制，為制定梅毒經血液傳播預防控制策略提供依據，本研究分析了212例武漢地區自愿無償獻血者血液梅毒TPPA確證陽性樣本，分析其人群結構特征，現報告如下。

材料與方法

1 樣本 武漢地區2018年1月～6月無償獻血樣本78 997份經TP-ELISA雙試劑檢測，331例為TPELISA初篩陽性，再用TPPA方法進行確證實驗，共有212例確證為TPPA陽性。

2 試劑 梅毒酶聯免疫雙抗原夾心法試劑（上海科華），試劑批號201708251；梅毒酶聯免疫雙抗原夾心法試劑（廣州麗珠），試劑批號2017091608；梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗TPPA（日本富士株式會社），試劑批號VN81025；快速血漿反應素實驗RPR（上海科華），試劑批號20181005；梅毒膠體金試紙條（廈門新創），試劑批號2018113351；所用試劑均在有效期內使用，且經中國食品藥品檢定研究院批檢合格。

3 儀器 FAME全自動酶免分析儀（瑞士HAMILTON）；STAR加樣儀（瑞士 HAMILTON）；洗板機（TECAN）；酶標儀（SUNRISE）；離心機（SORVAL）；混旋儀。

4 方法 對所采集的血液標本采用2家試劑同時進行抗-TP檢測（ELISA），經檢測均為陽性標本再采用該試劑進行雙孔復試，任一試劑復試結果陽性則均判為陽性。TP-ELISA陽性樣本再用梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗進行確證，最后針對TPPA確證為陽性的樣本補充快速血漿反應素實驗RPR、梅毒膠體金試紙條實驗，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

5 統計學處理 應用SPSS20.0進行數據處理，采用卡方檢驗，計數資料以率（%）表示，P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

武漢地區無償獻血樣本78 997份經TP-ELISA雙試劑檢測，331例為TP-ELISA初篩陽性，再用TPPA方法進行確證實驗，共有212例確證為TPPA陽性，獻血人群梅毒確證陽性率為0.27%（212/78 997），見表1。TPPA確證為陽性的樣本補充其他聯合檢測項目見表2，結果有快速血漿反應素（RPR）檢出40例，梅毒膠體金試紙條檢出193例；根據獻血者信息進行分析，按照性別、年齡、婚姻狀況、學歷、職業分類，女性獻血者確證陽性率0.34%高于男性獻血者0.23%，差異有統計學意義（χ2=8.24，P＜0.05）；已婚獻血者確證陽性率0.39%高于未婚獻血者0.17%，差異有統計學意義（χ2=36.13，P＜0.05）；不同年齡段的獻血者確證陽性率，以36～45歲年齡段陽性率最高，為0.66%，而18～25歲年齡段陽性率最低，為0.08%，不同年齡段間差異有統計學意義（χ2=149.80，P＜0.05）；在不同文化程度上，中專學歷獻血者梅毒確證陽性率最高0.76%，本科學歷最低，陽性率為0.10%，不同文化程度的獻血者之間確證陽性率差異有統計學意義（χ2=141.04，P＜0.05）；在職業分類上，農民和工人獻血者確證陽性率最高為0.66%，學生人群陽性率最低0.05%，不同職業間差異有統計學意義（χ2=177.10，P＜0.05），具體見表3。

表1 無償獻血者梅毒初篩及確證結果

表2 TPPA確證為陽性的樣本多項目分析（212例）

表3 無償獻血者TPPA確證陽性人群特征分類

討 論

武漢地區無償獻血者總體梅毒抗體陽性率，與國內其他地區相比，陽性率處于中游水平。值得注意的是，近幾年來的年度陽性率呈遞增趨勢，血站因梅毒陽性導致的血液報廢率，在所有四項免疫學檢測項目中僅次于HBsAg陽性的報廢率。因此在本地區積極開展獻血宣傳，進一步加強獻血前的征詢，盡量從源頭上排除梅毒感染高危人群，是今后血液采集工作的努力方向之一，以期能進一步降低因梅毒陽性造成的血液報廢。而在以往同行業文獻報道中，采用數據多為ELISA檢測陽性數據，這其中就包括了大量單側陽性和灰區結果，據報道其中包含有一定比例的假陽性，筆者從另一角度，直接選取ELISA陽性樣本，再做TPPA確證，將其中確證為陽性的樣本進行分析，從表1可以看出，無償獻血者在本地區的感染率為0.27%，低于南京地區的0.35%[2]、廣州地區的0.37%[3]，可能與筆者采用的數據為確證后的陽性數據有關。從表2可以看出，RPR陽性占總體梅毒確證陽性的18.87%（40/212），TPPA確證和RPR同時陽性表明該獻血者處于現癥感染，說明存在較多的現癥感染獻血者，有必要做好相關的咨詢告之工作，建議其采取進一步的檢測治療，從而有效減少其在家庭內部和社會上的傳播，同時現癥感染者參與無償獻血，不排除其帶有自我體檢的目的，因此給采血前的征詢工作也帶來挑戰與壓力。另外在表2中，金標試紙條陽性占TPPA確證陽性的91.04%（193/212），說明能有效在獻血前剔除大部分梅毒抗體陽性獻血者，金標法具有檢測時間快、假陽性少的優點，適合批量快速篩查，但其靈敏度較低，會導致少量漏檢，筆者總結漏檢的原因還有以下幾點：①手工加樣，有差異，因加量不足而導致弱陽性漏檢；②另外強陽性標本因為帶現象而出現假陰性；③金標試紙條在存放使用、室外操作環境條件方面難以得到保證，造成金標試紙條靈敏度有所下降；④批量篩查時因反應時間不夠，過早判讀結果導致弱陽性漏檢；⑤加樣時如果過早的加入緩沖液，導致層析速度過快，沒有充分反應就越過了檢測線而漏檢。以上問題我們在以后的工作中會予以注意，嚴格操作要求，提高操作水平，提升檢測能力。

在表3中，我們從性別、年齡、婚姻、文化程度、職業多角度分析，獻血者梅毒陽性率在不同年齡、學歷、職業間存在差異，這與國內許多地方的報道結果一致。初中和中專學歷獻血者，其梅毒陽性率越高，說明低學歷人群對梅毒了解少，健康衛生知識缺乏，這個與廣州、開封、襄陽等地一致[3-5]，說明這是個共性問題；年齡上陽性率呈上升趨勢，以36～45歲人群居多，這類人群不屬于獻血主力人群，反而梅毒確證陽性數最高，可能由于梅毒屬于可治愈的性傳播疾病，多數人在患病后有意或無意中接受了青霉素治療而痊愈，死亡病例不多，導致梅毒抗體陽性人群隨年齡增長而累積。從職業上比較，農民和工人的陽性率最高，與蘭州、茂名[6，7]等地相似，可能與農民和工人的個人衛生以及健康安全防范意識不強，且參與獻血的農民和工人多為外地人，常年離家在外，不排除尋求生理慰藉而感染的可能，這類人員實際上很多是無固定職業人員，在今后的工作中應加強對這部分人員的獻血宣傳，以免造成不必要的資源浪費。全國無償獻血者梅毒感染總體情況是上個世紀女性獻血者陽性率明顯高于男性，到21世紀后男性獻血者梅毒感染率明顯上升。本文中的結果是女性獻血者梅毒比例高于男性，有差異性，這與石家莊地區一致[8]，而與嘉興地區相反[9]；而婚姻狀況中，已婚獻血人群多于未婚，這也是與年齡有關，隨著年齡的增長，已婚比例自然增高，同時梅毒確證陽性中已婚人群比例的增高，也為整個社會梅毒的預防提出新要求，夫妻間傳播，繼而導致垂直傳播。

綜上所述，武漢地區無償獻血者梅毒感染情況分析，基本上與全國其他地區一致，比如在年齡、婚姻、文化程度、職業上的特征是吻合的，除了性別因素，在同行業的調查中，各地區間也不一致，可能與每個地區的獻血者性別比例差異有關。

近年來隨著武漢無償獻血事業的快速發展，獻血人群覆蓋面廣，流動人口也在不斷增加，部分人群對獻血知識的認知仍有所欠缺，這給血液安全帶來了挑戰。如何提供安全、可靠的血液資源來滿足日益增長的臨床用血需求一直是采供血機構面臨的一項艱巨的任務。為了盡可能的提高血液的合格率，降低寶貴的血液資源的浪費，我們認為至少應該做到以下幾點：①通過多種媒體形式，特別當前社會流行的自媒體，提高獻血人群對無償獻血知識的認知度，了解相關疾病防控知識。②對獻血前咨詢提出更高要求，嚴格把好無償獻血招募質量關，力求獻血者能真實面對獻血登記表上所列的相關問題，加強完善保密性棄血等相關工作，讓高危人群能自覺放棄。③加大宣傳力度，特別是針對18～35歲之間的青壯年學生群體，更要加強宣傳，盡可能的發展為自愿定期的無償獻血固定人群。④采血前開展快速檢測以降低檢測不合格率，我們應該盡快的把TP金標法快速檢測提上日程，這個從表2中已經可以有效看出，試紙條在TPPA確證為陽性的樣本中檢出率高達91.04%，說明如果采用獻血前快速篩查法將有效降低梅毒血液報廢率。⑤繼續擴大固定無償獻血者隊伍，加強固定獻血者隊伍建設，從低危人群中采集血液。

利益沖突所有作者均申明不存在利益沖突