腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性測定

毛佳 王宏寶 曹凱歌 施保國 高玉霞 趙桂東 吳險平

(1 江蘇徐淮地區淮陰農業科學研究所 江蘇淮安 223001;2 淮安市農業科技實業總公司 江蘇淮安 223001;3 淮安市植保植檢站 江蘇淮安 223001;4 淮安市淮安區農業技術推廣中心 江蘇淮安 223200)

腐爛莖線蟲 （Ditylenchus destructor） 是一種遷移性植物內寄生線蟲，主要危害植物地下部，尤其是塊莖和球莖等，是農業生產上重要的植物寄生線蟲。腐爛莖線蟲寄主范圍廣泛， 多達90～120 種［1］，也是中國和許多其他國家和地區的檢疫性線蟲。近年來，國內腐爛莖線蟲嚴重危害甘薯，一般發病田塊減產20%～50%，重病田塊甚至出現絕產［2］。甘薯腐爛莖線蟲的防治方法很多，有農業防治、生物防治、物理防治和化學防治等。在實際生產中，化學防治一直是使用最廣泛的措施。防治腐爛莖線蟲的藥劑多為高毒或殘效期較長的農藥，基于甘薯對農藥殘留的特殊要求，此類農藥在生產上受到很大的限制［3］。腐爛莖線蟲是一種遷移性內寄生線蟲，遷移速度快、繁殖率高，一旦侵入秧苗就很難除治，對植株造成嚴重的危害［4］。目前廣泛使用的化學藥劑主要有克百威、苯線磷、甲基異柳磷、滅線磷、涕滅威等，但這些防治藥劑以高毒為主，對人畜不安全，并且易對環境造成污染［5-7］。為大力推進《農藥減量控害行動實施方案》，避免農產品中的農藥殘留超標，提高農產品品質，保障農業生態環境安全［8-11］，解決以往防治甘薯腐爛莖線蟲病多使用高毒高殘留農藥的問題，國內有關學者做了多方面的探索研究。如，漆永紅等［12］研究了1.8%阿維菌素乳油、20%辛硫磷乳油、25%毒死蜱乳油和20%丁硫克百威乳油對甘薯秧苗的保護作用，發現180 μg/mL 1.8%阿維菌素乳油和2 000 μg/mL 丁硫克百威乳油對甘薯秧苗的保護效果優于其他藥劑處理。毛紅彥等［13］研究表明，30%辛硫磷微囊懸浮劑、5%辛硫磷顆粒劑、30%三唑磷微囊懸浮劑和10%噻唑磷顆粒劑對甘薯腐爛莖線蟲有很好的防治效果。由于生物農藥、植物源殺線蟲劑在環境中易降解，對人類安全，具有良好的環境相容性，因此越來越受到人們的重視。本實驗選用目前市場上常見的化學農藥、生物農藥、植物源材料等6種藥劑，探討腐爛莖線蟲對其的敏感性，以期為線蟲防控提供技術參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥劑

40%辛硫磷乳油（連云港立本作物科技有限公司），1.8%阿維菌素乳油（連云港立本作物科技有限公司），50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑（南京南農科技發展有限公司），25%噻蟲嗪水分散粒劑（江蘇寶靈化工股份有限公司），1 000 億芽孢/克枯草芽孢桿菌可濕性粉劑（德強生物股份有限公司），檳榔粉（提取比例15∶1，質量比）（寶雞市方晟生物開發有限公司）。

1.1.2 腐爛莖線蟲

由本實驗室在甘薯塊莖上接種培養所得，包括成蟲和不同蟲態的幼蟲。

1.2 方法

1.2.1 試驗設計

各種藥劑分別配制100 和150 倍液2 份母液，同時配置約200 條/mL 的線蟲懸浮液備用。用移液槍吸取0.5 mL 線蟲懸浮液置入5 mL 離心管后，各濃度處理線蟲液統一設定為2 mL，根據總容量分別計算對應 400、600、800、1 200、1 600、2 400 倍液所需要的母液量和用水量。配置處理液時，先將計算好的用水量加入離心管的線蟲懸浮液中，接著加入不同稀釋倍數所需的母液量；將配置好的不同倍數處理液搖勻后置于試管架上，在25°C黑暗培養箱中分別處理24、48、144 h，鏡檢觀察線蟲死亡率。鏡檢時分別將處理液倒入凹面皿中并置于體視顯微鏡下統計存活狀態，線蟲存活狀態通過針刺法測定，即線蟲僵直不動為死蟲，彎曲蠕動狀態為活蟲［14］。試驗通過計算不同外源物對線蟲的校正死亡率（擊倒率）來測定各外源物對線蟲的敏感性。空白對照設為清水組，每個處理重復3次，每個處理的線蟲數量約為100條。

死亡率＝死亡線蟲數/總線蟲數×100%

校正死亡率（擊倒率）＝（處理組的死亡率－對照組的死亡率）/（100－對照組的死亡率）×100%

1.2.2 數據統計分析

采用Excel 2019 和DPS7.05 軟件進行數據統計和差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 處理24 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性

不同外源物處理24 h 后，腐爛莖線蟲的敏感性測定結果見表1。在6 個供試材料中，氯溴異氰尿酸處理和枯草芽孢桿菌處理對線蟲擊倒率均較高，其中氯溴異氰尿酸在400～2 400 倍液下對線蟲的敏感性較強，擊倒率達86.69%以上；而枯草芽孢桿菌在400～800 倍液下，對線蟲擊倒率也達到93.69%以上。辛硫磷、阿維菌素和噻蟲嗪不同濃度處理24 h后對線蟲敏感性較差。

表1 處理24 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性

2.2 48 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性

隨著處理時間的延長，在48 h 后腐爛莖線蟲對各處理液的敏感性測定結果見表2。氯溴異氰尿酸在不同濃度處理下對線蟲藥效表現良好，枯草芽孢桿菌對線蟲也表現出較好的敏感性；而檳榔粉部分濃度處理下的擊倒率低于處理24 h 的擊倒率，表現為部分線蟲有復蘇現象，這可能與供試藥劑藥效及線蟲耐受性有關。其中，枯草芽孢桿菌、噻蟲嗪和阿維菌素部分濃度處理下的擊倒率與處理24 h相比，對線蟲的防效均有所提高。

表2 處理48 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性

2.3 144 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性

隨著處理時間的延長，在144 h 后腐爛莖線蟲對各處理液的敏感性測定結果見表3。氯溴異氰尿酸在6 個不同濃度處理下對線蟲擊倒率達96.70%；阿維菌素800 倍液處理144 h 擊倒率在61.36%；辛硫磷對線蟲的擊倒率較低，檳榔粉在400～600 倍液下對線蟲擊倒率達到82.70%以上，噻蟲嗪在400～600 倍液下對線蟲擊倒率高達96.70%，此3 種藥劑1 200、1 600、2 400倍液下藥效較差；枯草芽孢桿菌在400～800 倍液下對線蟲的擊倒率在76.36%～96.70%，但在其它幾個濃度下，線蟲的敏感性下降。

3 討論與結論

腐爛莖線蟲在田間主要為害當歸、甘薯和馬鈴薯等作物地下部組織，其為害較為隱蔽。線蟲體壁外存在角質層，通透性差，抗逆性強，且神經系統不發達，殺線劑又多為神經毒劑，使得線蟲病害的化學防治難。往往是一些毒性較高的藥劑才能起到理想的效果。從實驗結果來看，腐爛莖線蟲對辛硫磷的敏感性并不高，不同濃度處理不同時間對線蟲擊倒率均不強，室內測定藥效并不理想，這與漆永紅等［12］報道結果較為一致。50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑在2 400 倍液處理24、48 和144 h 時，各處理均無線蟲復蘇現象，表現出穩定的防控效果，值得在生產上推廣應用。而噻蟲嗪作為一類低毒內吸殺蟲劑，在400～600 倍液下對線蟲表現出較好的防效，隨著稀釋倍數增加，對線蟲敏感性降低。枯草芽孢桿菌在試驗中對線蟲擊倒率較高，表現出較好的防控效果，但在個別處理中存在線蟲復蘇現象，這種線蟲的假死現象在趙立榮等［14］研究中也有報道；但鑒于該藥劑有較好的擊倒率，在生產上建議將其作為防控線蟲的藥劑輪換使用。試驗中也發現，檳榔粉作為一類植物源材料，在400～600 倍液下表現出較好的擊倒效果，可作為固體藥劑的填充材料用于線蟲防控。室內生物測定結果對殺線蟲劑的實際應用只有一個定性的指導作用，其作用在于篩選出具有使用前景的殺線蟲劑［14］。本試驗僅對6 種藥劑（外源物）的直接觸殺作用做了初步篩選，而其他不同藥劑之間的混配是否具有增效作用還有待進一步的研究。

表3 處理144 h后腐爛莖線蟲對不同外源物的敏感性