2型糖尿病患者并發缺血性腦卒中危險因素及與載脂蛋白E基因型相關性分析

李麗容，盧治蘭，鄧向海，單林玲

(1.安康市中醫醫院檢驗科，陜西 安康 725000；2.安康市中醫醫院影像中心，陜西 安康 725000)

缺血性腦卒中是2型糖尿病(Type 2 diabetes，T2DM)人群常見嚴重大血管病變之一，致死致殘率較高，嚴重威脅生命安全；同時，T2DM亦被證實是缺血性腦卒中獨立危險因素，人群罹患風險為健康人群的2～5倍[1]。國外研究[2]證實，T2DM患者大血管病變發生與脂代謝異常密切相關，而載脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)是脂代謝中關鍵調控指標。ApoE由299個氨基酸構成，具有穩定脂蛋白結構、運轉脂類物質、調節脂類代謝及保護大腦功能等多種作用[3]。目前研究[4]證實ApoE基因rs7412(C/T)和rs429358(C/T)單核苷酸多態性共同決定共顯性等位基因(ε2、ε3及ε4)，同時形成3個純合子和3個雜合子，其中ε3/ε3基因型占比最高，一般在70%以上，又稱為野生型。研究[5]顯示，檢測ApoE基因型能夠實現T2DM患者繼發大血管病變的早期預測及干預。但對于ApoE基因型是否會對缺血性腦卒中的發生產生影響，尚無明確定論。本研究探討T2DM患者并發缺血性腦卒中的危險因素及與ApoE基因型相關性，現報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本研究納入我院2016年1月至2020年9月收治的T2DM患者共490例為研究對象，根據是否并發缺血性腦卒中分為A組(未并發缺血性腦卒中)與B組(并發缺血性腦卒中)。T2DM和缺血性腦卒中均符合世界衛生組織診斷標準[6]，年齡≥18歲，同時排除存在重要臟器功能異常、惡性腫瘤、精神系統疾病、妊娠及妊娠糖尿病者。本研究設計符合《赫爾辛基宣言》要求，且患者及家屬知情同意。

1.2 研究方法 查閱病例收集患者性別、年齡、身高與體重[計算體重指數(BMI)]、T2DM病程、吸煙史、原發性高血壓、收縮壓、舒張壓、血清實驗室指標[甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、空腹血糖、糖化血紅蛋白(HbA1c)]及ApoE基因檢測指標。實驗室指標檢測：入選患者均抽取清晨空腹靜脈血4～5 ml。HbA1c采用東曹HLC-723G8型HbA1c全自動分析儀檢測，其他指標均采用貝克曼ISE AU5800型全自動生化分析儀檢測。ApoE基因檢測：收集患者肘靜脈血，提取血液基因組DNA，采用實時熒光定量PCR法檢測ApoE基因型，通過熒光曲線判讀基因型。陰性對照品無Ct值或Ct值>29，陽性對照品Ct值<25。

2 結 果

2.1 兩組患者一般資料比較 見表1。B組收縮壓和舒張壓高于A組，合并原發性高血壓比例低于A組(均P<0.05)。兩組其他指標比較均無統計學差異(均P>0.05)。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 兩組患者實驗室指標比較 見表2。B組LDL-C水平低于A組(P<0.05)。兩組其他指標比較均無統計學差異(均P>0.05)。

表2 兩組患者實驗室指標比較

2.3 兩組患者ApoE基因型頻率及等位基因頻率比較 見表3。χ2檢驗證實研究納入人群ApoE基因分布符合H-W遺傳平衡定律及連鎖平衡，可代表整個群體。B組ε2/ε3、ε3/ε4基因型頻率顯著高于A組，ε3/ε3基因型頻率顯著低于A組(χ2=8.26、10.71、6.98，均P<0.05)。B組ε4基因頻率顯著高于A組，ε3基因頻率顯著低于A組(χ2=11.65、10.71，均P<0.05)。

表3 兩組患者ApoE基因型頻率及等位基因頻率比較(%)

2.4 T2DM患者并發缺血性腦卒中危險因素Logistic回歸分析 見表4。Logistic回歸模型自變量賦值：T2DM病程和收縮壓為連續變量，根據原始數據分析；合并原發性高血壓=1，未合并=0；ε3/ε3作為參考對照，ε2/ε3和ε3/ε4基因型出現=1，未出現=0。結果顯示，合并原發性高血壓、高收縮壓、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型均是T2DM患者并發缺血性腦卒中的獨立危險因素(均P<0.05)。

表4 T2DM患者并發缺血性腦卒中危險因素Logistic回歸分析

3 討 論

本次研究結果顯示，B組ε2/ε3、ε3/ε4基因型頻率及ε4基因頻率顯著高于A組，ε3/ε3基因型頻率和ε3基因頻率顯著低于A組。Logistic回歸模型多因素分析結果顯示， ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型是T2DM患者并發缺血性腦卒中的獨立危險因素，進一步證實ApoE基因型為ε2/ε3和ε3/ε4的T2DM患者更易發生缺血性腦卒中。國外研究[7-8]證實，經多元回歸分析校正年齡、BMI、血壓、血脂及吸煙情況后，ApoE基因型為ε3/ε3的人群不易發生缺血性腦卒中。另有研究[9-10]認為，ApoE基因型為ε2/ε4和ε3/ε4的缺血性腦卒中患者中可見VLDL-C與TG水平顯著升高。一項Meta分析研究[11]顯示，ApoE ε4等位基因存在可導致缺血性/出血性腦卒中發生風險升高。此外，ApoE ε4等位基因還被證實可促進頸動脈內膜中層增厚，并進一步提高缺血性腦卒中發生風險[12-13]。上述研究結果均支持本次研究結論，據此筆者推測ApoE基因型ε2/ε3和ε3/ε4、ApoE ε4等位基因可對體內脂類代謝特別是腦部脂類代謝產生影響，導致腦部動脈粥樣硬化病情發生及發展，從而引起T2DM患者并發缺血性腦卒中風險升高。

本次研究結果中，兩組合并原發性高血壓比例、收縮壓、舒張壓及LDL-C水平比較差異均有統計學意義，提示并發缺血性腦卒中患者血壓水平均顯著升高，同時LDL-C水平更低。繼續采用Logistic回歸模型分析證實，合并原發性高血壓病和高收縮壓與T2DM患者缺血性腦卒中發生獨立相關，但低LDL-C水平并未證實存在保護效應，與以往報道結果不符[14-16]，筆者認為這可能與納入樣本量相對較少、單中心及人種差異有關。同時，有報道[17-18]提示，基因型為ε3/ε4和ε4/ε4的患者體內LDL-C水平較低，導致內皮依賴性血管舒張受到抑制，從而造成血壓升高，故LDL-C與T2DM患者缺血性腦卒中發生之間的關系仍有待后續研究進一步確證。

本研究采用χ2檢驗證實納入人群ApoE基因分布符合H-W遺傳平衡定律及連鎖平衡，可代表整個群體；同時，基因型和等位基因分析結果提示，缺血性腦卒中患者ε2/ε3和ε3/ε4基因型頻率及ε4基因頻率均更高。以上數據進一步提示，T2DM患者并發缺血性腦卒中與ApoE基因型間存在密切聯系。有研究[19-20]證實，ApoE ε4等位基因可刺激血管收縮，提高血壓水平，導致淀粉樣蛋白Aβ在腦內大量沉積，最終誘發阿爾茲海默癥。亞洲人群中ApoE ε4等位基因和基因型ε3/ε 4、ε4/ε4亦與原發性高血壓發生有關[21]。結合本次及上述研究結果，筆者認為ApoE ε2和ε4等位基因可能在原發性高血壓發生、發展過程中發揮著重要作用，并誘發多種心腦血管疾病。

綜上所述，合并原發性高血壓、高收縮壓、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型及T2DM患者更易并發缺血性腦卒中。早期評估ApoE基因型并給予針對性干預有助于降低缺血性腦卒中發生風險。但本研究屬于單中心回顧性分析，無法完全排除混雜因素影響，仍有待后續更大樣本量及多中心研究確證。