硝苯地平緩釋片II釋放度檢測(cè)方法研究

河南省洛陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所（471023）劉景宜

硝苯地平緩釋片Ⅱ是最目前最常用的降壓藥之一。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-058)-2004Z。釋放度采用《中國(guó)藥典》2015年版四部溶出度第一法及紫外可見分光光度法在333nm處檢測(cè)。在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)，樣品在（333±2）nm處沒有最大吸收，最大吸收一般偏移到了340nm，不符合《中國(guó)藥典》2015年版四部紫外可見分光光度法的規(guī)定（波長(zhǎng)允許偏移±2nm）[1][2][3]。本實(shí)驗(yàn)另外采用紫外可見分光光度法在238nm測(cè)定吸光度，計(jì)算釋放度和高效液相色譜法在238nm測(cè)定峰面積，計(jì)算釋放度這兩種方法，和原標(biāo)準(zhǔn)方法作對(duì)比，為完善該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)[4]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 UV-2700紫外可見分光光度計(jì)（日本島津公司）；FADT-801自動(dòng)取樣溶出系統(tǒng)（上海富科思分析儀器有限公司）；MSA225S-1CE-DU電子天平（德國(guó)賽多利斯）；Dionex Ultimate3000高效液相色譜儀（美國(guó)戴安公司）。

1.2 試藥 硝苯地平對(duì)照品（批號(hào)：100338-201806規(guī)格：100mg/支，中國(guó)藥品生物制品檢定所，含量：99.9%）；甲醇（色譜純，Dikma公司）；異丙醇（天津科密歐）；氫氧化鈉（天津科密歐）；磷酸二氫鉀（天津科密歐）；磷酸氫二鉀（天津科密歐）；水為純化水，其他試劑為分析純。硝苯地平緩釋片Ⅱ樣品為河南省2020年硝苯地平類專項(xiàng)抽檢樣品，總計(jì)為8個(gè)廠家，21個(gè)批號(hào)的樣品。

2 方法

2.1 紫外可見分光光度法 按照藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-058)-2004Z上的方法，取供試品溶液（1）、（2）、（3），照紫外-可見分光光度法，在333nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。實(shí)驗(yàn)對(duì)8個(gè)廠家，21個(gè)批號(hào)的樣品全部進(jìn)行了檢驗(yàn)，結(jié)果21個(gè)樣品的供試品溶液（1）、（2）、（3）的最大吸收全部發(fā)生偏移，不在（333±2）nm，全部在338～340nm（見附圖）。由此可見，樣品最大吸收偏移過大，不是一個(gè)廠家產(chǎn)品的質(zhì)量問題，而是標(biāo)準(zhǔn)方法制定有問題，需要選擇更合適的方法檢測(cè)[5][6]。

附圖 供試品溶液最大吸收339nm

2.2 紫外可見分光光度法 取供試品溶液（1）、（2）、（3），按照紫外-可見分光光度法，在238nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

2.3 高效液相色譜法 色譜條件：色譜柱：Thermo ODS-2HYPERSIL(4.6×150mm,5μm)；檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)238nm；流動(dòng)相：甲醇-水（60∶40）；流速：0.8ml/min；柱溫：30.0℃。

2.4 釋放度所用的溶出介質(zhì) （1小時(shí)）：酸性溶液（取異丙醇200ml，加0.1mol/L鹽酸溶液至1000ml）；（3小時(shí)）：緩沖液1[取異丙醇200ml，加磷酸鹽緩沖液（pH5.8）至1000ml]；（6小時(shí)）：緩沖液2[取2mol/L氫氧化鈉溶液10ml，調(diào)節(jié)溶液2的pH值至7.2]。

2.5 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取硝苯地平對(duì)照品12.90mg置25ml量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液貯備液。分別精密量取對(duì)照品溶液貯備液2ml，分別置100ml量瓶中，并分別加酸性溶液和緩沖液1，作為對(duì)照品溶液1和對(duì)照品溶液2。

2.6 供試品溶液的制備 在1、3、6小時(shí)取樣后，使用津騰尼龍0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液（1）、（2）、（3）。

2.7 測(cè)定

2.7.1 紫外可見分光光度法 取供試品溶液1和對(duì)照品溶液1，供試品溶液2、3和對(duì)照品溶液2，按照紫外-可見分光光度法，分別在238nm、333nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(A)，計(jì)算每片在1、3、6小時(shí)的釋放量。

2.7.2 高效液相色譜法 取供試品溶液1和對(duì)照品溶液1，供試品溶液2、3和對(duì)照品溶液2，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，計(jì)算每片在1、3、6小時(shí)的釋放量。

3 結(jié)果

3.1 釋放度結(jié)果 通過三種測(cè)定方法得到的釋放度，結(jié)果相差不大，具體數(shù)據(jù)見附表1。由表中數(shù)據(jù)可見，3種方法在1、3、6小時(shí)的最大差值分別為1.9%、1.7%、1.3%，均在2%的誤差范圍內(nèi)，都屬于允許的誤差，因此3種方法都是可以作為檢測(cè)方法使用的[7]。在這3種方法中，紫外333nm檢測(cè)和液相238nm檢測(cè)得到結(jié)果更為接近。

附表1 釋放度結(jié)果

3.2 對(duì)照品比較 在試驗(yàn)中配置了對(duì)照品溶液1和對(duì)照品溶液2，兩種對(duì)照品的濃度是一樣的，只是溶解用的溶劑不一樣。在實(shí)際工作中，兩種對(duì)照品測(cè)定的結(jié)果是否一樣，可以通過試驗(yàn)來(lái)比較一下。具體數(shù)據(jù)見附表2。由表中數(shù)據(jù)可見，對(duì)照品溶液1和對(duì)照品溶液2在紫外238nm和333nm的RSD值較大，在測(cè)定時(shí)不適合用對(duì)照品溶液1代替對(duì)照品溶液2；對(duì)照品溶液1和對(duì)照品溶液2在液相238nm的RSD為0.4%，相差很小，可以在測(cè)定時(shí)用對(duì)照品溶液1代替對(duì)照品溶液2[8]。

附表2 對(duì)照品數(shù)據(jù)

3.3 加樣回收率試驗(yàn) 分別精密量取1小時(shí)的樣品3、4、5各10ml，精密加入10ml對(duì)照品溶液1，混勻，作為加樣回收溶液。再分別精密量取6小時(shí)的樣品3、4、5各10ml，精密加入10ml對(duì)照品溶液2，混勻，作為加樣回收溶液。然后按照3種方法測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見附表3。

附表3 加樣回收結(jié)果

4 討論

紫外238nm檢測(cè)、紫外333nm檢測(cè)和液相238nm檢測(cè)這三種方法在比較分析后，均可以滿足試驗(yàn)的基本要求，但在綜合分析后，液相238nm檢測(cè)這個(gè)方法準(zhǔn)確度更高，操作更加簡(jiǎn)便，是三種方法中最好的。