正相高效液相色譜測定萬壽菊中玉米黃質和葉黃素方法研究

王紅梅 張琳

摘要 [目的]建立正相高效液相色譜（NP-HPLC）同時測定萬壽菊中玉米黃質和葉黃素含量的方法。[方法]色譜柱Inertsil SIL-100A（4.6 mm×250 mm，3 μm），流動相為正己烷∶乙酸乙酯=70∶30（V∶V），檢測波長446 nm，柱溫30 ℃。[結果]玉米黃質在5～50 μg/mL呈線性關系（r=0.997），加標回收率為97.5%（n=5），檢出限為0.055 μg/mL;葉黃素在10～100 μg/mL呈線性關系（r=0.999），加標回收率為97.3%（n=5），檢出限為0.085 μg/mL。[結論]建立的正相HPLC方法快速、穩定，能夠為檢測萬壽菊中葉黃素和玉米黃質含量提供有效方法。

關鍵詞 正相高效液相色譜;葉黃素;玉米黃質;萬壽菊

中圖分類號 R284.2文獻標識碼 A文章編號 0517-6611（2021）02-0186-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.02.050

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Determination of Zeaxanthin and Lutein in Marigold by Normal Phase HPLC

WANG Hongmei1，ZHANG Lin2

（1.Tianjin Rianlon Corporation，Tianjin 300384;2.School of Chinese Materia Medica，Tianjing Univerisity of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 301617）

Abstract [Objective] To establish a method for the simultaneous determination of lutein and zeaxanthin in marigold by normal phase high performance liquid chromatography （NPHPLC）. [Method]The column， Inertsil SIL100A （4.6 mm × 250 mm， 3 μm）， mobile phase， nHexane∶ethyl acetate = 70∶30 （V∶V）， detection wavelength 446 nm， column oven temperature 30 ℃. [Result]Zeaxanthin showed a linear relationship between 5-50 μg/mL （r = 0.997）， the recovery rate was 97.5% （n=5）， the detection limit was 0.055 μg/mL， lutein showed a linear relationship between 10-100 μg/mL （r = 0.999）， the recovery rate was 97.3% （n= 5）， the detection limit was 0.085 μg/mL. [Conclusion] The established HPLC method is rapid and stable， and can provide an effective method for the determination of lutein and zeaxanthin in marigold.

Key words NPHPLC;Lutein;Zeaxanthin;Marigold

葉黃素（lutein）和玉米黃質（zeaxanthin）為天然的植物色素，多存在于植物果實、蔬菜、花卉及藻類植物中，屬于較為基本的天然色素，具有提高人和動物免疫力以及抗氧化的作用。葉黃素能夠預防眼睛的視網膜黃斑，延緩失明癥和視力退化等眼部的疾病。近年來研究表明，葉黃素具有調節動物免疫力、加強巨噬細胞活性、遏制腫瘤等功能[1-4]。玉米黃質也具有抗氧化性，分子中含多個共軛雙鍵，可阻斷自由基的鏈式傳遞。在生物體中，雖然玉米黃質不能轉化成為維生素A，不具其活性，但也是人體可直接利用的強抗氧化劑。同時玉米黃質的化學結構中帶有羥基，增強了其抗氧化能力。人體中，葉黃素和玉米黃質主要分布在肝臟、腎臟、胰臟、卵巢、眼、脾臟等組織器官中，并且人體和動物均不能自身合成2種物質，只能通過攝取食物或相關制劑獲得。葉黃素和玉米黃質的食物來源主要有黃玉米、橙汁、桃子和雞蛋黃等[5-8]。

萬壽菊的花中含有豐富的玉米黃質和葉黃素。從20世紀70年代起，美國從萬壽菊中規模化提取葉黃素，用作雞飼料添加劑。在化妝品、醫藥、水產品等行業中，玉米黃質和葉黃素有應用。天然色素具有廣泛的應用前景，其相關產品市場需求將會不斷增大，對萬壽菊中葉黃素和玉米黃質的提取工藝和檢測方法的準確性也會有更高的要求[9-16]。

高效液相色譜法（HPLC）是有效測定玉米黃質和葉黃素含量的首選方法[17-19]。黃小春等[20]利用高效液相色譜法測定雞蛋黃中的葉黃素。由于玉米黃質與葉黃素互為同分異構體，化學結構極為相似，屬異戊二烯類化合物，因此在載碳量較低的C18柱上實現其基線分離較為困難。惠伯棣等[21]在YMC C30柱上實現玉米黃質和葉黃素基線分離，測得玉米黃質和葉黃素含量分別為54.2和12.8 mg/kg。上述文獻表明，由于兩者結構相似，在C18柱上僅限于單獨檢測葉黃素或玉米黃質，當兩者均存在時難以實現基線分離;在C30柱上雖然能夠實現基線分離，但C30柱價格較高，通用性不強，不利于推廣和普及。因此，在正相硅膠色譜柱（NP-HPLC）上建立同時快速測定相關農產品的葉黃素和玉米黃質含量具有重要意義。

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