細胞間黏附分子-1在三陰性乳腺癌組織中的表達及意義

劉鵬飛 湖南中醫藥高等專科學校附屬第一醫院乳腺科,湖南省株洲市 412000

三陰性乳腺癌(TNBC)是乳腺癌常見的分子分型之一，是指雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)以及人表皮生長因子2(HER-2)均呈陰性表達的乳腺癌，具有惡性程度高、易復發轉移及預后差等臨床特點，對女性健康構成嚴重威脅[1]。細胞間黏附分子-1(ICAM-1)是黏附分子免疫球蛋家族的重要成員之一，介導著黏附反應過程，在促進炎癥粘連、機體免疫調節及腫瘤惡化轉移中有著重要作用。研究表明，ICAM-1通過結合特異性受體，能夠增強炎癥細胞以及腫瘤細胞等與內細胞之間的黏附，激活內皮細胞，使其更易穿透到內皮。而內皮細胞的黏附分子通過介導細胞之間或細胞與基質間的結合，形成信號轉導、活化，進而參與細胞的增殖與分化、炎性反應、免疫應答及腫瘤生長、轉移等多種生理病理過程[2]。目前，已有較多研究報道了ICAM-1在肝癌、肺癌、胃癌中表達[3-5]，但關于其在TNBC中報道的研究尚少。為此，本研究旨在探討ICAM-1在TNBC中的表達，并分析其與患者臨床病理特征及預后的關系，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2017年1月—2019年12月我院TNBC手術標本60例，包括癌組織60例及癌旁組織60例。患者均首次發病，術前均未行放化療治療，均為女性，年齡23～81(56.12±11.65)歲；TNM分期：Ⅰ期9例，Ⅱ期29例，Ⅲ期17例，Ⅳ期5例；病理類型：浸潤性導管癌36例，浸潤性小葉癌6例，基底細胞癌9例，其他9例；腫塊直徑：≤2cm者26例，>2cm者34例。18例患者術后出現復發轉移，其中局部復發4例，骨轉移6例，肝轉移6例，肺轉移2例。所有標本固定(10%甲醛溶液)后，均行常規石蠟包埋處理，制成厚度為5μm的病理切片。

1.2 免疫組化法檢測ICAM-1在TNBC中的表達 常規標本制片。取載玻片，采用防脫片劑處理后，置于58～60℃烤箱內進行烘烤，30～60min。切片脫蠟至水：二甲苯60℃環境下處理5min，共3次。予以100%酒精-95%酒精-75%酒精依次處理，各3min。采用3%H2O2，室溫條件，滅活內源性酶，5～10min。采用pH值為6.0的枸櫞酸鹽緩沖液(0.01mol/L)進行抗原熱修復處理。然后以5%BSA進行封閉，ICAM-1單抗(英國Abcam)，1∶50稀釋，4℃環境下放置過夜。加入生物素化山羊抗兔IgG，37℃環境下放置20min。加入試劑SABC，37℃條件下放置20min。DAB顯色處理，加蒸餾水1ml，混勻后加至切片。最后采用蘇木素復染，以堿性PBS返藍，用中性樹脂進行封片。

1.3 結果判讀 所有免疫組化切片均由兩名高年資病理醫師進行評估。參照文獻中標準進行判讀，根據陽性細胞比例與著色深度進行綜合評分，在每個切片中隨機選取5個視野，各視野分別計100個細胞，然后按細胞數≤25%、25%～50%、>50%分別計1分、2分、3分；ICAM-1蛋白屬于細胞膜蛋白，著色部位為細胞膜及細胞質，按無著色、淺黃色、深黃色或棕褐色分別計0分、1分、2分。最終得分為兩項評分之積，綜合評分為0分或1分，判定為陰性表達，綜合評分為2分、3分、4分或6分，則判定為陽性表達。

1.4 觀察指標 (1)比較TNBC癌組織及癌旁組織ICAM-1表達情況；(2)比較不同臨床病理特征的TNBC患者ICAM-1表達情況差異；(3)比較ICAM-1陽性表達與陰性表達TNBC患者的生存預后。

1.5 統計學方法 應用SPSS22.0軟件處理數據。計數資料比較行χ2或Fisher精確概率檢驗；用Kaplan-Meier對TNBC患者進行生存曲線分析；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TNBC癌組織及癌旁組織ICAM-1表達情況對比 TNBC癌組織ICAM-1陽性表達率(75.00%，45/60)明顯高于癌旁組織(10.00%，6/60)，差異有統計學意義(χ2=51.867，P<0.001)。

2.2 ICAM-1表達與TNBC臨床病理參數的關系 ICAM-1表達與TNBC淋巴結轉移(P=0.035)、組織學分級(P=0.002)、TNM分期(P=0.030)顯著相關，而與年齡(P=1.000)、腫瘤直徑(P=0.764)、病理類型(P=0.397)、脈管癌栓(P=1.000)等無關。見表1。

表1 ICAM-1表達與TNBC臨床病理參數的關系[n(%)]

2.3 ICAM-1表達與TNBC患者生存預后的關系 Kaplan-Meier生存曲線分析顯示，ICAM-1陽性表達者生存期明顯低于ICAM-1陰性表達者(χ2=5.745，P=0.015)。見圖1。

3 討論

TNBC是一種特殊類型的乳腺癌，易復發且轉移早。由于該類型乳腺癌的ER、PR、HER-2均呈陰性表達，內分泌治療與靶向治療均難以發揮效果，而臨床又缺乏規范的化療方案，使得其被視為較頑固的腫瘤，故尋找其治療靶點成為一大難題。

圖1 ICAM-1陽性表達與陰性表達的TNBC患者生存曲線

ICAM-1是黏附分子免疫球蛋家族的重要成員之一，在促進炎癥粘連、機體免疫調節及腫瘤惡化轉移中有著重要作用。其通過結合特異性受體，能夠增強炎癥細胞以及腫瘤細胞等與內細胞之間的黏附，激活內皮細胞，使其更易穿透到內皮。而內皮細胞的黏附分子通過介導細胞之間或細胞與基質間的結合，形成信號轉導、活化，進而參與細胞的增殖與分化、炎性反應、免疫應答及腫瘤生長繁殖、轉移等多種生理病理過程[6]。ICAM-1在正常組織中表達水平較低，但在肺、腎、胃組織中有著較高表達。新近研究發現，ICAM-1在多種前列腺癌[7]、卵巢癌[8]等多種惡性腫瘤組織中呈高表達，與惡性腫瘤具有相關性。Hayes等[9]學者對300例正常組織、癌組織進行了免疫組化研究，發現ICAM-1表達與惡性腫瘤相關，在腫瘤轉移中發揮著重要作用。已有較多研究報道了ICAM-1與肺癌[10]、肝癌[11]等臨床病理參數的關系。但關于ICAM-1與乳腺癌尤其是TNBC關系的報道尚少。因此，本研究采用免疫組化法對TNBC癌組織與癌旁組織的ICAM-1表達情況進行檢測，結果顯示，ICAM-1在癌組織中的表達明顯高于癌旁組織，且與淋巴結轉移、組織學分級、TNM分期相關，提示ICAM-1或許可作為反映TNBC惡性程度的指標。此外，本研究還顯示，ICAM-1陽性表達者生存期明顯低于ICAM-1陰性表達者，提示ICAM-1表達與TNBC患者預后相關，ICAM-1陽性表達者預后較差。

綜上所述，ICAM-1與TNBC的侵襲、轉移相關，可作為判斷腫瘤惡性程度的指標，其高表達可提示預后不良。ICAM-1有望成為治療TNBC的潛在靶點。