正壓通氣聯(lián)合白三烯受體拮抗劑對(duì)6歲以下阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患兒免疫功能的影響

王燕楠 徐艷霞

鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院（河南省兒童醫(yī)院，鄭州兒童醫(yī)院）耳鼻喉科（鄭州450000）

兒童阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合癥（OSAHS）是指睡眠過(guò)程中頻繁發(fā)生部分或全部上氣道阻塞打擾兒童正常通氣和睡眠結(jié)構(gòu)而引起的一系列病理生理變化［1?2］。口、鼻流停止6 s以上分為中樞性、阻塞性和混合性睡眠呼吸暫停綜合征三類(lèi)，其中以阻塞性最常見(jiàn)，約占90%。該病的主要表現(xiàn)為活動(dòng)增多，同時(shí)伴有記憶力下降、語(yǔ)言缺陷、食欲降低、學(xué)習(xí)困難、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩［3］。經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)異常行為困難，比如不正常的含羞、發(fā)育遲緩、攻擊行為和反叛。OSAHS 兒童早晨覺(jué)醒時(shí)的癥狀包括張口、口干、迷茫、晨起頭疼和易激惹［4?5］。學(xué)齡兒童則表現(xiàn)為上課注意力不集中、學(xué)習(xí)成績(jī)下降，8%～62%的患兒有白天過(guò)度嗜睡癥狀［6］。夜間最顯著的癥狀就是打鼾，并且大多數(shù)鼾聲響亮。本文使用正壓通氣聯(lián)合白三烯受體拮抗劑對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療，旨在探究二者聯(lián)合對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒NK 細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞亞群水平的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象選取2019年1月至2020年1月于我院接受治療的6 歲以下OSAHS 患兒90 例，按照隨機(jī)數(shù)字法分為白三烯組和聯(lián)合治療組，各45 例。其中白三烯組包括男27 例，女18 例，年齡1 ～5 歲，平均（3.1±1.5）歲；聯(lián)合治療組包括男24 例，女21 例，年齡2 ～6 歲，平均（4.2±1.4）歲。所有患兒一般情況比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)中對(duì)兒童OSAHS 的診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）顱面部發(fā)育畸形者；（2）依從性差者；（3）對(duì)本研究藥品過(guò)敏者；（4）年齡＞6 歲。所有患兒及家屬對(duì)本研究均知情，并簽署知情通知書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法兩組患兒均給予吸氧、加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)支持等常規(guī)治療。白三烯組給予患兒白三烯受體拮抗劑進(jìn)行治療，于每晚睡前口服4 mg 白三烯受體拮抗劑；聯(lián)合治療組在白三烯組的基礎(chǔ)上給予患兒正壓通氣進(jìn)行治療，將無(wú)創(chuàng)正壓通氣呼吸機(jī)的呼吸頻率調(diào)整至20 次/min，將通氣的壓力維持在8 ～22 cmH2O，將氧濃度設(shè)置為50%左右。隨后將呼吸面罩與患兒面部緊密貼合，開(kāi)始通氣，每次通氣時(shí)間為3 h，每天3 次。兩組患兒均治療3 個(gè)月。所有患兒在研究中未發(fā)生其他原因?qū)е罗D(zhuǎn)院或者放棄治療，所有患兒在研究中均按照醫(yī)生規(guī)定進(jìn)行治療，治療過(guò)程與醫(yī)囑一致。

1.2.2 T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)待測(cè)空腹靜脈血5 mL/人傳代到5 孔板中，放在溫度37 ℃、濃度為5%的二氧化碳飽和濕度環(huán)境下培養(yǎng)1、2 和3 d，然后再加入濃度為0.25%的胰蛋白酶進(jìn)行消化，然后用離心機(jī)2 000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心5 min 收取細(xì)胞，收取細(xì)胞后使用PBS 緩沖液洗滌3 min，再重復(fù)洗滌兩次，洗滌完成后將以2 000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心機(jī)分離后收集細(xì)胞后加入1 mL PI 染液，一定要在避光的常溫下放置1 h 后，然后再用特異熒光標(biāo)記，在鞘液包裹下流動(dòng)中期間會(huì)發(fā)射出光子，按照流式細(xì)胞儀嚴(yán)格檢測(cè)，在計(jì)數(shù)管內(nèi)檢測(cè)T 細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平。

1.2.3 NK 細(xì)胞檢測(cè)抽取兩組患兒治療前后清晨空腹靜脈血3 mL，以離心半徑為5 cm、以轉(zhuǎn)速3 000 r/min 離心處理10 min，分離上層血清，-80 ℃保存，待用。使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定兩組患兒白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白計(jì)數(shù)，將待測(cè)標(biāo)本放入試管中，應(yīng)用熒光標(biāo)記法加入單克隆熒光體標(biāo)記，在振蕩器中震蕩均勻，然后放置在25 ～30 ℃的避光環(huán)境中過(guò)夜保存，最后使用全自動(dòng)血液細(xì)胞儀檢測(cè)，檢測(cè)NK 細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.2.4 SaO2 檢測(cè)提取離心后的患兒橈動(dòng)脈血液，放入自動(dòng)血?dú)夥治鰞x中進(jìn)行檢測(cè)，執(zhí)行者操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照儀器操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.5 AHI、LAT、LHT檢測(cè)兩組患兒均使用睡眠呼吸檢測(cè)儀對(duì)AHI、LAT、LHT 檢測(cè)，使用睡眠呼吸儀時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，以免出現(xiàn)誤差。1.2.6 IgA、IgG、IgM 檢測(cè)取3 個(gè)試管標(biāo)記為空白管、測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管，隨后均加入300 μL 緩沖液，加入緩沖液在空白管、測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管中分別加入20 μL 標(biāo)準(zhǔn)液、20 μL 血清、20 μL 蒸餾水。對(duì)3 個(gè)試管進(jìn)行均勻晃動(dòng)后放置常溫環(huán)境下5 ～10 min，隨后使用分光光度計(jì)對(duì)其進(jìn)行比色，在500 nm 波長(zhǎng)處以空白管調(diào)零下，記錄吸光度，最后對(duì)其IgA、IgG、IgM 水平進(jìn)行計(jì)算。

1.2.7 治療有效率比較顯效：臨床癥狀消失，患兒睡眠質(zhì)量恢復(fù)正常；有效：臨床癥狀明顯改善，睡眠質(zhì)量未完全恢復(fù)；無(wú)效：臨床癥狀未得到改善甚至加重。有效+顯效=總有效率。

1.2.8 OSA 嚴(yán)重程度使用OSA?18 問(wèn)卷對(duì)患兒病情嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)價(jià)：?jiǎn)柧砉卜譃? 個(gè)問(wèn)題，每個(gè)問(wèn)題分為絕對(duì)沒(méi)有記為1 分，幾乎沒(méi)有記為2 分，很少有記為3 分，有時(shí)有記為4 分，常有記為5 分，多半有記為6 分，絕對(duì)有記為7 分。調(diào)查總分最高為126 分，分?jǐn)?shù)越高說(shuō)明OSA 嚴(yán)重程度越高。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 21.0 軟件分析。計(jì)量資料使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行描述，組間兩兩比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較如表1 所示，兩組患兒治療前CD3+、CD4+、CD8+水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后與白三烯組相比，聯(lián)合治療組患兒CD3+、CD4+、CD8+水平較低（P＜0.05）。

2.2 兩組患兒治療前后NK、SaO2比較如表2 所示，兩組患兒治療前NK、SaO2水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，與白三烯組相比，聯(lián)合治療組NK 較高，SaO2較低（P＜0.05）。

2.3 兩組患兒治療前后LAT、LHT、AHI 比較如表3 所示，兩組患兒治療前LAT、LHT、AHI 比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患兒治療后LAT、LHT、AHI 下降，且與白三烯組相比，聯(lián)合治療組LAT、LHT、AHI 值較低（P＜0.05）。

表1 兩組患兒治療前后T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較Tab.1 Comparison of T lymphocyte subsets between the two groups before and after treatment ±s

表1 兩組患兒治療前后T 淋巴細(xì)胞亞群水平比較Tab.1 Comparison of T lymphocyte subsets between the two groups before and after treatment ±s

組別白三烯組聯(lián)合治療組t 值P 值CD3+治療前67.21±5.07 67.78±5.10 0.531 0.596治療后65.17±5.09 57.19±5.10 7.429 0.001 CD4+治療前35.10±2.14 36.78±2.08 3.776 0.052治療后28.19±3.17 20.18±4.12 10.340 0.001 CD8+治療前33.74±5.80 32.89±5.18 0.733 0.465治療后29.31±5.13 21.56±2.47 9.131 0.001

表2 兩組患兒治療前后NK、SaO2比較Tab.2 Comparison of NK and SaO2 between the two groups before and after treatment ±s，%

表2 兩組患兒治療前后NK、SaO2比較Tab.2 Comparison of NK and SaO2 between the two groups before and after treatment ±s，%

組別白三烯組聯(lián)合治療組t 值P 值NK治療前10.59±5.18 11.29±5.21 0.639 0.524治療后12.47±5.19 15.09±2.41 3.071 0.002 SaO2治療前75.81±4.13 76.89±4.25 1.223 0.224治療后73.62±4.81 67.59±4.18 6.348 0.001

2.4 兩組患兒治療前后IgA、IgG、IgM水平比較如表4 所示，兩組患兒治療前IgA、IgG、IgM 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；兩組患兒治療后IgA、IgG、IgM 水平下降，且與白三烯組相比，聯(lián)合治療組患兒IgA、IgG、IgM水平較低（P＜0.05）。

2.5 兩組患兒治療有效率比較聯(lián)合治療組患兒的治療總有效率為95.56%（43/45），高于白三烯組77.78%（35/45），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.6 不良反應(yīng)發(fā)生率比較聯(lián)合治療組患兒的不良反應(yīng)發(fā)生率為13.33%，略高于白三烯組6.67%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 兩組患兒治療前后LAT、LHT、AHI 比較Tab.3 Comparison of LAT，LHT and AHI between the two groups before and after treatment±s

表3 兩組患兒治療前后LAT、LHT、AHI 比較Tab.3 Comparison of LAT，LHT and AHI between the two groups before and after treatment±s

LATLHT（s）AHI（次）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后24.85±9.1622.17±7.5925.75±10.6124.31±9.5137.86±5.5220.91±5.31 25.84±9.1116.33±4.1926.14±10.5820.19±7.2137.59±5.2415.61±5.11組別白三烯組聯(lián)合治療組t 值P 值0.514 0.608 4.519 0.001 0.175 0.861 2.316 0.022 0.238 0.812 4.824 0.001

表4 兩組患兒治療前后IgA、IgG、IgM 水平比較Tab.4 Comparison of IgA，IgG and IgM levels between the two groups before and after treatment ±s，mg/L

表4 兩組患兒治療前后IgA、IgG、IgM 水平比較Tab.4 Comparison of IgA，IgG and IgM levels between the two groups before and after treatment ±s，mg/L

組別白三烯組聯(lián)合治療組t 值P 值IgA治療前2.42±0.55 2.48±0.51 0.536 0.592治療后2.38±0.41 1.51±0.30 11.490 0.001 IgG治療前11.05±2.56 11.26±2.18 0.419 0.676治療后10.96±2.21 8.56±1.48 6.053 0.001 IgM治療前1.29±0.41 1.26±0.43 0.338 0.735治療后1.25±0.31 1.10±0.28 2.409 0.001

3 討論

扁桃體肥大是兒童OSAHS 最常見(jiàn)的病因，目前治療方法多為腺狀體、扁桃體切除術(shù)，但術(shù)后容易引發(fā)多種并發(fā)癥或復(fù)發(fā)情況的出現(xiàn)，而且有些患兒手術(shù)后仍然有睡眠呼吸紊亂癥狀的存在［8-9］。因此手術(shù)治療給一些家長(zhǎng)和患兒留下了恐懼感。白三烯是由花生四烯酸經(jīng)過(guò)5?脂氧合酶途徑代謝產(chǎn)生的一組炎性介質(zhì)［10］。且白三烯受體拮抗劑還是一種非激素類(lèi)抗炎藥物，其抗炎作用比激素的作用小。其優(yōu)點(diǎn)為口服藥物，使用方面的副作用也相對(duì)較小［11］。其主要作用于輕度的哮喘和并過(guò)敏性鼻炎患兒。正壓通氣是指通過(guò)鼻面罩將呼吸機(jī)與患者進(jìn)行相連，由呼吸機(jī)提供正壓支持而完成通氣輔助的人工通方式［12］。

CD3+T 細(xì)胞的共受體為一種蛋白質(zhì)復(fù)合物，由四個(gè)不同的鏈組成。CD4+是人體免疫系統(tǒng)中的一種重要免疫細(xì)胞。CD8+是一種白細(xì)胞分化抗原，為部分T 細(xì)胞表面所具有的一種糖蛋白，又稱(chēng)為T(mén)CR 的共受體［13-14］。大量臨床研究表明，T 淋巴細(xì)胞亞群與OSAHS 病癥有著密切的關(guān)聯(lián)，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，能夠有效的觀(guān)測(cè)出OSAHS 病癥的發(fā)生與發(fā)展。代紅英等［15］在研究中指出，OSAHS 患兒體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞亞群異常上升，對(duì)其進(jìn)行有效的治療后，患兒的T 淋巴細(xì)胞亞群顯著下降，說(shuō)明對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)能夠較為準(zhǔn)確的觀(guān)測(cè)OSAHS的發(fā)展情況。本文中使用白三烯受體拮抗劑聯(lián)合正壓通氣對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療發(fā)現(xiàn)，患兒體內(nèi)的CD3+、CD8+、CD4+水平下降，與上述一致，說(shuō)明二者聯(lián)合治療能夠?qū)純后w內(nèi)T 淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行調(diào)節(jié)。

NK 為自然殺傷細(xì)胞，是機(jī)體內(nèi)一種重要的免疫細(xì)胞，其在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生［16-17］。NK 細(xì)胞有著部分T 細(xì)胞分化抗原的存在，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，NK 細(xì)胞是直接從骨髓中產(chǎn)生而來(lái)。大量臨床研究表明，NK 細(xì)胞與OSAHS 病癥密切相關(guān)，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)SAHS 病癥得發(fā)生發(fā)展進(jìn)行較為準(zhǔn)確的判斷。陳翊民等［18］在研究中指出，OSAHS 患兒體內(nèi)NK 細(xì)胞所占百分比明顯下降，對(duì)其進(jìn)行有效的治療，能夠?qū)K 細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié)達(dá)到治療的效果。SaO2是血液中被氧化結(jié)合的氧合血紅蛋白的容量占可結(jié)合的血紅蛋白容量，即為血液中血樣的濃度［19-20］。SaO2是呼吸循環(huán)中的重要生理參數(shù)，所以其與OSAHS 病癥有著密切的聯(lián)系。李龍巧等［21］在研究中指出，OSAHS 患兒體內(nèi)SaO2異常上升，對(duì)其進(jìn)行有效的治療，SaO2下降，說(shuō)明對(duì)SaO2進(jìn)行檢測(cè)能夠觀(guān)測(cè)出OSAHS 病癥的發(fā)生發(fā)展。本文研究中顯示，使用正壓通氣聯(lián)合白三烯受體拮抗劑對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療，患兒體內(nèi)NK 細(xì)胞上升、SaO2下降，說(shuō)明二者聯(lián)合能夠通過(guò)調(diào)節(jié)患兒體內(nèi)NK 細(xì)胞進(jìn)行有效的治療，對(duì)SaO2進(jìn)行檢測(cè)能夠?qū)Σ“Y進(jìn)行有效的觀(guān)測(cè)。

IgA 為免疫球蛋白A，IgG 為免疫球蛋白G，IgM為免疫球蛋白M，其都屬于免疫球蛋白。免疫球蛋白是免疫活性分子中的一類(lèi)，免疫活性分子包括了多種的因子和分子。其抗體主要存在于血清內(nèi)，其他體液和外分泌液有少量的抗體存在［22-23］。大量臨床研究表明，OSAHS 病癥的發(fā)生發(fā)展與免疫球蛋白有著密切的關(guān)聯(lián)，IgA、IgG、IgM 是臨床較為常用的免疫球蛋白因子，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)C(jī)體的免疫功能進(jìn)行較為準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。蘭炎根等［24］在研究中指出，OSAHS 患兒體內(nèi)免疫球蛋白異上升，對(duì)其進(jìn)行有效的治療，能夠改善患兒體內(nèi)免疫球蛋白。本文研究中使用正壓通氣聯(lián)合白三烯受體拮抗劑對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療，患兒體內(nèi)免疫球蛋白下降，與上述一致，說(shuō)明二者聯(lián)合對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療，能夠通過(guò)改善患兒的免疫功能對(duì)其進(jìn)行有效的治療，效果顯著。

綜上所述，使用正壓通氣聯(lián)合白三烯受體拮抗劑對(duì)6 歲以下OSAHS 患兒進(jìn)行治療能夠改善其免疫功能，調(diào)節(jié)T 淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白因子水平，效果顯著。