新生仔豬丁型冠狀病毒腹瀉病例診斷報告

陳慧婷，徐翠，黎家祥，花象柏

（南昌德爾塔生物技術有限公司，江西南昌330013)

豬丁型冠狀病毒又稱δ（德爾塔）冠狀病毒（PDCoV),該病毒于2012年由香港大學Woo等從169份豬糞樣品中檢出，檢出率約為10.1%,美國于2014年檢出[1]。2015年，從江西暴發的新生仔豬腹瀉中，也檢出了PDCoV[2]。2021年2月，從江西省南昌市新建區西山鎮某養豬戶所送的新生仔豬腹瀉病料檢測出PDCoV為陽性，豬流行性腹瀉病毒（PEDV)呈陰性，從而確定該養豬戶新生仔豬腹瀉由PDCoV引起，現診療情況報告如下。

1 發病情況

該養豬戶飼養母豬100頭左右，其中生產母豬60余頭。從2020年7月份開始，持續出現新生仔豬腹瀉，先后30窩仔豬發病。新生仔豬腹瀉多從產后3～4日齡開始，7d以內仔豬發生腹瀉的多以死亡為轉歸，耐過7d不死的則可存活下來，每窩殘存仔豬數0～4頭不等。當時未作實驗室檢測，認為由PEDV引起，先后給母豬免疫過豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯滅活苗和豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉和豬輪狀病毒三聯活疫苗各2次，新生仔豬腹瀉發病沒有減少。

2 臨床癥狀

新生仔豬于3～4日齡突然發病，先嘔吐，后水樣腹瀉，發病豬經過3～4d脫水死亡。前期體溫不升高，后期有些下降。

3 剖檢變化

剖檢2頭死亡仔豬，胃內有大量新鮮乳白色凝固乳汁，腸壁變薄，腸內有多量淡黃色米湯樣內容物，其余臟器無肉眼可見變化。

4 實驗室檢測

4.1 檢測樣品采集

2頭剖檢仔豬均取下列病料。一是內臟病料，包括扁桃體、肺、脾、肝、腎、和肺門、肝門、腹股溝和腸系膜等部位的淋巴結等組織少許，用作發病誘因檢測；由于剖檢病例看不到豬瘟和豬偽狂犬病的病變，故只作豬藍耳病病毒（PRRSV）的檢測。二是結扎5～10cm的小腸一段，用作新生豬最常見的兩個發病原因PEDV和PDCoV的檢測。

4.2 實驗試劑

RNA提取試劑盒來自TAKARA公司，反轉錄試劑盒及其他試劑來自天根生化科技（北京）有限公司。

4.3 實驗方法

按試劑盒說明書操作，先從采集的樣品提取RNA，再以RNA為模板，反轉錄擴增cDNA，然后以cDNA為模板，進行PCR擴增，最后用PCR產物進行核酸電泳，觀察實驗結果。

4.4 實驗結果

內臟病料相關病原PRRSV和腸道病料相關病原PEDV及PDCoV的檢測結果見表1：

表1 內臟病料檢測結果

5 討論

我國自2010年暴發新生仔豬腹瀉以來，給養豬業造成了巨大的經濟損失。關于引起新生仔豬腹瀉的病原研究，已確定主要病原為PEDV,其次為PDCoV。但是，由PEDV和PDCoV這兩種病原引起的新生仔豬腹瀉，在流行病學、臨床癥狀和剖檢病變等方面都極為相似，無法在臨床上對兩者進行鑒別。本次發病的新生仔豬腹瀉，一直當作PED來處理，發現不奏效后，才送病料至實驗室進行檢測。對所送兩個病例的檢測結果表明，PEDV均為陰性，PDCoV均為陽性；在發病誘因上，PRRSV的檢測結果也為陰性；故可確定本次新生仔豬腹瀉，由單一PDCoV病原引起。

美國于2014年暴發新生仔豬腹瀉，在腹瀉樣品中PDCoV的檢出率達30%[2]。賀冬生等報道[3]，華南某豬場有母豬2 000頭，3～7日齡新生豬發生腹瀉，發病率90%,死淘率90%以上，經實驗室檢測豬傳染性胃腸炎病毒、PEDV和豬輪狀病毒等均為陰性，PDCoV為陽性，從而確定該豬場的新生仔豬腹瀉由PDCoV引起。D.Song等報道[2]，在中國江西暴發的新生仔豬腹瀉中檢出PDCoV,從2012年11月到2015年3月，所收集的新生仔豬腹瀉樣品中，PDCoV的單一感染率為33.71%。逄鳳嬌等報道[4]，華東地區豬場2014～2015年收集的43份腹瀉樣品檢測，PDCoV陽性率為18.60%。陳建飛等分離出國內首株丁型冠狀病毒[5]。由此看來，PDCoV確成為引起新生仔豬腹瀉的重要病原之一。鑒于目前尚無控制PDCoV的疫苗，故開發防控PDCoV所致新生仔豬腹瀉的疫苗迫在眉睫。