孟令江,上官同強,于秀玲,滕海達



摘要:目的:根據北沙參制定標準測定不同種質北沙參8-甲氧基異歐前胡內酯和香豆素總含量的研究。方法:檢測不同種質類型北沙參產量相關性狀,利用高效液相色譜法測定北沙參中香豆素成分含量和總含量。結果:不同種質的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異,以8種香豆素類成分的總含量作為指標,優選出的主根中側根少的種質和白條參種質所含8種香豆素類成分的總含量最高。結論:不同種質的北沙參香豆素類成分含量存在差異。
關鍵詞:北沙參;香豆素;總含量
北沙參是傘形科植物珊瑚菜(Glehnia? littoralis? FrSchmidt? ex Miq)的干燥根,具有養陰清肺,祛痰止咳、益胃生津等功效,為臨床上常用的中藥材,常用于治療勞嗽痰血,熱病津傷,咽干口渴、胃陰不足等病癥[1-2]。北沙參在我國已有500多年種植歷史,其中以萊陽種植量大、產量多、質量好而聞名。根據栽培品種,不同品種之間的北沙參在性狀、質量、功效方面是否存在差異目前尚未有定論,有待進一步研究。因此本實驗收集不同種質北沙參,以常見和重要的8-甲氧基異歐前胡內酯含量以及香豆素含量作為評價指標,利用高效液相色譜法等標準方法對其含量進行檢測,為客觀評價不同種質北沙參內在質量等提供依據。
1材料與方法
1.1 儀器與原料
KQ-500E型超聲波清洗器、AE240十萬分之一電子天平、戴安U-3000高效液相色譜儀、恒溫烘箱等。甲醇、乙腈、補骨脂素、歐前胡素、異歐前胡素對照品HPLC≥98%等。從山東萊陽胡城、河北安國東桄、赤峰牛營子三個北沙參人工種植基地進行種質資源收集,共收集北沙參鮮藥材12批。洗去泥沙后,置于恒溫烘箱55℃烘干備用。
1.2 測定指標及方法
1.2.1 色譜條件:色譜柱:Inertsil ODS-3(250×4.6 mm,5μm);流動相為乙腈-水,檢測波長:310 nm;進樣量10?l。
1.2.2 相關溶液配制:對照品溶液配制:精密稱取異茴芹內酯、花椒毒素、佛手柑內酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內酯、異歐前胡素對照品,分別配制成濃度為對照品溶液備用。
1.2.3 供試品溶液配制:分別取不同種質的北沙參進行碾碎(過40目)后精密稱定各取1g,置具塞錐形瓶中,加甲醇20ml,超聲處理30 min,用0.45μm微孔濾膜濾過,作為供試品溶液備用。
1.3 方法學驗證
精密吸取混合對照品溶液0.5、1、2、4、5、8 ml至10 ml容量瓶中,加甲醇稀釋并定容至刻度,搖勻。分別精密吸取10μL,依次注入高效液相色譜儀,測定峰面積,以對照品濃度(mg/mL)為橫坐標、峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。并分別進行精密度試驗、穩定性試驗、重復性試驗。最終得回歸方程:異茴芹內酯Y=10.343+14.343x,r=0.9992,花椒毒素Y=2.707x-1.5077,r=0.9991,佛手柑內酯Y=4.9731x-2.6935,r=0.9998,氧化前胡素=5.9731x-3.6935,r=0.9993、異歐前胡素=1.9731x-0.6935,r=0.9998。珊瑚菜素=0.9822x-0.8232,r=0.9991,8-甲氧基異歐前胡內酯=1.3928x-0.7271,r=0.9992,異歐前胡素=2.9833x-1.9823,r=0.9991。
2結果
2.1 不同種質類型產量相關性狀測定
12批北沙參鮮藥材分別是大紅袍(DH)、白條參(BT)、紅條參(HT)、山東地方種(SHD)、高含量組(HC)、高產量組(HY)、安國地方種(ANG)、根型優組即主根粗側根少(RG)、赤峰地方種(CHF)、主根粗側根多(CD)、主根中側根少(ZS)、主根細側根少(XS)。具體產量相關性狀見表1。
2.2 不同種質北沙參含量評價
北沙參含量測定結果顯示不同種質北沙參所含香豆素類成分含量存在顯著差異,其中,異茴芹內酯、花椒毒素、佛手柑內酯、氧化前胡素、異歐前胡素、珊瑚菜素、8-甲氧基異歐前胡內酯、異歐前胡素等成分含量存在顯著差異(P<0.01),不同種質北沙參所含8種香豆素類成分含量也有較大差異,其中優選出的主根細側根少的種質和白條參種質,所含8種香豆素類成分的總含量最高;主根中等側根少的種質和赤峰本地種質,所含8種香豆素類成分的總含量最低,結果見表2。
3討論
結果顯示,不同種質的北沙參8種香豆素類成分含量存在顯著差異,這與國內研究北沙參的其他文獻結果相似,可以作為北沙參種質評價和良種選育的一個重要指標。以8種香豆素類成分的總含量作為指標,優選出的主根中側根少的種質和白條參種質所含8種香豆素類成分的總含量最高,可以作為優良種質。此外,不同成分也可能具有不同的藥理活性和臨床療效,在藥理活性明確的情況下,也可以根據對成分的要求來定向選育不同的北沙參品種。
參考文獻
[1]邱曉月,景永帥,鄭玉光,等.北沙參多糖對免疫系統調節作用研究進展[J].中國藥理學與毒理學雜志,2021,35(10):794.
[2]李雪瑩,武永剛.中藥材北沙參及其偽品鑒定方法的研究進展[J].農技服務,2021,38(3):88-89+92.