新型冠狀病毒肺炎患者新型冠狀病毒抗體持續陽性時間的影響因素

李侗曾 梁連春

首都醫科大學附屬北京佑安醫院呼吸與感染疾病科（北京100069）

新型冠狀病毒肺炎（COVID?19）是由新型冠狀病毒（SARS?CoV?2）引起的急性呼吸道疾病［1］。該病屬于新發傳染病，目前的研究結果對于其診斷、治療以及預防等方面有一定的了解，SARS?CoV?2疫苗的研發也已上市；已有眾多研究［2-6］表明SARS?CoV?2抗體（IgG/IgM），可以用于協助診斷SARS?CoV?2感染，但鑒于抗體檢測試劑應用于臨床的時間有限，目前尚缺乏對于恢復期COVID?19患者SARS?CoV?2抗體的長期觀察性研究報道。隨著感染后SARS?CoV?2隨訪時間的延長，可以觀察到SARS?CoV?2抗體由陰性轉陽性，再由陽性逐漸轉為陰性，其協助診斷SARS?CoV?2感染的價值可能受到發病時間長短限制，對回顧性的疫情流行病學調查、疫苗效果的評價有重要影響［7］。本研究以北京佑安醫院收治的COVID?19患者為研究對象，分析隨訪至發病6個月以后患者抗體持續陽性情況及患者抗體持續陽性的影響因素，為COVID?19的臨床診療、流行病學調查及疫苗應用提供一定的參考依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象本研究為回顧性研究，選取2020年1月21日至10月25日于北京佑安醫院就診的COVID?19患者為研究對象，納入在隨訪期間SARS?CoV?2抗體檢測結果且隨訪時間超過6個月的COVID?19患者43例。隨訪起點是患者發病時間，隨訪終點為患者最后1次檢測SARS?CoV?2抗體時間。COVID?19的診斷標準和臨床分型依據國家衛生健康委員會辦公廳頒布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第八版）》。本研究符合首都醫科大學附屬北京佑安醫院醫學倫理委員會倫理規范的要求。

1.2 資料收集收集患者的人口學資料（年齡、性別）、流行病學接觸史、發病日期、基礎疾病、血常規（白細胞計數、淋巴細胞絕對值、血紅蛋白）、肝腎功能、CRP、是否有發熱情況等資料。收集患者住院及出院后隨訪期間所有的SARS?CoV?2抗體檢測結果。

1.3 SARS?CoV?2抗體檢測采用唐山英諾特生物技術有限公司生產的SARS?CoV?2抗體檢測試劑盒（膠體金法）。

1.4 分組本研究根據患者發病后的SARS?CoV?2抗體檢測結果，將發病后6個月內連續兩次檢測IgM、IgG抗體均轉為陰性的患者定義為轉陰組，抗體持續陽性時間超過了6個月的患者定義為持續陽性組［8］。

1.5 統計學方法采用SPSS 22.0軟件進行統計分析，正態分布的計量資料以均值±標準差表示，非正態分布的計量資料以M（P25，P75）表示，計數資料以例（%）表示。計量資料比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗或Fisher′s精確概率法檢驗。比較抗體持續陽性患者與轉陰組患者之間臨床指標差異，并將單因素分析中差異有統計學意義的變量納入多因素logistic回歸分析，采用逐步向前的回歸方法篩選變量。P<0.05認為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患者臨床資料隨訪超過6個月的COVID?19患者共有43例，其中男23例（53.5%），臨床分型為普通型37例（86.0%），中位隨訪時間為182 d。轉陰組10例（23.3%），持續陽性組33例。持續陽性組患者的年齡、發熱的比例顯著高于轉陰組患者，而淋巴細胞計數顯著低于轉陰組患者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 SARS?CoV?2抗體持續陽性時間的影響因素將表1中年齡、發熱、淋巴細胞計數納入多因素分析，結果顯示發熱、淋巴細胞計數低是患者SARS?CoV?2抗體持續陽性的獨立危險因素，見表2。

表1 SARS?CoV?2抗體持續陽性6個月患者與轉陰患者之間臨床特點比較Tab.1 Comparison of clinical characteristics between SARS?CoV?2 antibody positive patients and negative patients for 6 months M（P25，P75）

3 討論

SARS?CoV?2屬于β屬的冠狀病毒，與其他冠狀病毒有一定的同源性。以往研究表明，嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒（SARS?CoV）IgM抗體出現時間早于IgG，抗體在發病后4個月達到高峰，并持續時間至少2年［9］。中東呼吸綜合征（MERS?CoV）抗體在發病后至少持續34個月［10］。在本研究中，經過對恢復期患者的長期隨訪，發現患者發病后6個月SARS?CoV?2 IgM全部轉陰，23.3%的恢復期COVID?19患者IgG轉陰；本研究最長隨訪到發病后231 d，該患者的IgG仍為陽性。這一結果與其他研究一致［11-12］，但與上述兩種冠狀病毒抗體相比，SARS?CoV?2抗體持續時間明顯較短，這對COVID?19疫情的回顧性診斷或流行病學調查有一定的參考價值。

表2 影響SARS?CoV?2抗體持續陽性（6個月）的logistic回歸分析Tab.2 Logistic regression analysis of SARS?CoV?2 antibody persistence（6 months）

謝朝梅等［4］發現COVID?19患者的核酸轉陰時間與IgM、IgG轉陽時間有關，IgM、IgG轉陽時間越快，核酸轉陰時間也越快，考慮SARS?CoV?2抗體有可能對感染SARS?CoV?2有一定的保護作用，SARS?CoV?2抗體檢出時間有助于對新冠疫苗保護時間的預估分析。在本研究中，COVID?19患者的抗體在發病后6個月23.3%轉為陰性，因此對于感染SARS?CoV?2以后發生再次感染的風險隨著距離首次感染時間延長逐漸增加。近期香港大學報道了1例二次感染SARS?CoV?2的案例，該患者在首次感染后的4個月再次感染SARS?CoV?2，但該患者兩次感染的病毒株基因排序有多個不同之處，由此可知，即使SARS?CoV?2抗體有保護作用，其持續時間較短，且缺乏交叉保護作用，是否存在抗體依賴性感染增強作用尚需進一步研究。另外，一項來自美國的研究報道了一例患者在48 d內感染了兩種不同基因型的SARS?CoV?2，并且第二次感染更為嚴重，這就表明感染過SARS?CoV?2并不能對患者有完全的保護作用，對于所有患者都應采取同樣的防護措施［13］。

本研究進一步分析了可能影響COVID?19患者SARS?CoV?2抗體持續時間的因素，多因素回歸分析結果發現淋巴細胞計數較低、發熱的患者在發病后6個月抗體持續陽性率較高，在未轉陰患者中危重癥的比例也較高。有研究發現SARS?CoV?2 S1蛋白特異性IgG水平與年齡、乳酸脫氫酶（LDH）水平呈正相關，與淋巴細胞百分率呈負相關，與本研究結果一致［14］。另外，也有眾多研究表明淋巴細胞計數下降是COVID?19重癥化的預警指標［14-17］，由此推測，抗體持續陽性的時間可能與病情嚴重程度呈正相關。一項來自法國的隨訪時間為6個月的前瞻性研究結果顯示大約一半的輕癥患者抗體檢測陰性［8］，另外一項對無癥狀感染者的研究顯示，40%的COVID?19無癥狀感染者的在診斷后的3～6個月內的IgG變為陰性，而與輕癥患者相比，重癥患者產生的抗體滴度顯著升高，且在至少持續5～7個月［18-19］，該研究再次證實了抗體持續時間與患者病情相關，對于無癥狀感染者，免疫應答較弱，抗體水平快速下降，對回顧性免疫性調查造成一定影響［20］。

隨著對SARS?CoV?2病毒的研究不斷加深，核酸以及抗體檢測試劑的普及，COVID?19診斷、治療及預防措施也不斷提高。本研究結果提示淋巴細胞計數偏低、臨床有發熱癥狀的COVID?19患者的抗體陽性持續時間更長，本研究可以為COVID?19疫情的追蹤調查、疫苗的研發等提供參考依據。