血清降鈣素原、C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素-6水平在小兒骨關(guān)節(jié)感染中的水平變化及臨床意義

楊佳麗，翟慢慢，李志浩

骨關(guān)節(jié)感染是一種臨床常見的骨關(guān)節(jié)病變，目前多以影像學(xué)檢查作為主要診斷手段，但由于其依據(jù)致病菌的不同可分為細(xì)菌性、結(jié)核性以及梅毒性感染三種，影像學(xué)對于其類型的分辨能力較差，因而探尋一種簡單、高效的診斷方式已經(jīng)引起了醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注[1]。白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)是一種細(xì)胞因子，可刺激生成抗體，并參與炎癥反應(yīng)[2]。降鈣素原(procalcitonin,PCT)是一種蛋白質(zhì)，體現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)活躍程度[3]。C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)屬于急性時相蛋白，在重癥感染的病情發(fā)展中起重要作用。據(jù)仇志學(xué)等[4]研究發(fā)現(xiàn)，血清PCT、CRP和IL-6等感染指標(biāo)能夠有助于臨床鑒別為骨關(guān)節(jié)感染。基于此，本研究旨在通過分析骨關(guān)節(jié)感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平變化，為臨床診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2015年12月至2017年12月鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院收治住院的骨關(guān)節(jié)感染患兒90例為觀察組，其中男48例，女42例；年齡1～10歲，平均(4.97±0.46)歲；化膿性關(guān)節(jié)炎30例，急性骨髓炎44例，慢性骨髓炎16例；輕度71例，重度19例。同期選取健康體檢兒童90例為對照組，其中男52例，女38例；年齡1～11歲，平均(5.05±0.49)歲。兩組患兒在性別、年齡方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照《醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)》中骨關(guān)節(jié)感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) (1)符合骨關(guān)節(jié)感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡1～11歲；(3)患兒家屬知情同意。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)已進(jìn)行抗生素治療者；(2)腎臟衰竭者；(3)先天性心臟病者；(4)尿路感染者；(5)精神疾病者；(6)合并惡性腫瘤者：(7)中性粒細(xì)胞減少癥者；(8)鐮狀細(xì)胞病者；(9)早產(chǎn)兒；(10)中心靜脈置管患者；(11)混合感染患者；(12)合并其他部位感染。

1.5 方法 所有人員均于清晨空腹抽取靜脈血，一次性抽取3 mL，在3 000 r/min下離心10 min后分離血清并在-30 ℃環(huán)境中保存，用以檢測血清PCT、CRP、IL-6。

1.5.1 血清PCT檢測 采用羅氏全自動免疫檢測儀進(jìn)行PCT檢測，選擇雙單克隆抗體檢測法，包括降鈣素抗體及抗鈣素抗體，將試劑加入血液標(biāo)本后，兩種抗體將分別與血清中降鈣素及抗鈣素抗原相結(jié)合，從而防止交叉反應(yīng)；同時兩種抗體一種有光標(biāo)記，另一種則沒有，抗體與PCT反應(yīng)將形成復(fù)合物，檢測最低值為0.1 μg/L。

1.5.2 血清CRP檢測 采用羅氏全自動生化分析儀進(jìn)行CRP檢測，選擇免疫比濁法，按照操作規(guī)范執(zhí)行，并選擇10 mg/L為陽性閾值點(diǎn)。

1.5.3 血清IL-6檢測 采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法檢測，按照操作規(guī)范執(zhí)行。

1.6 觀察指標(biāo) (1)兩組血清PCT、CRP、IL-6水平；(2)不同類型骨關(guān)節(jié)感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平；(3)急性感染期及恢復(fù)期患兒血清PCT、CRP、IL-6水平；(4)不同病情程度患兒血清PCT、CRP、IL-6水平。

1.7 病情分期判定標(biāo)準(zhǔn) (1)急性感染期：白細(xì)胞總數(shù)顯著升高、中性粒細(xì)胞增加，影像學(xué)檢查可見明顯關(guān)節(jié)病變，多有發(fā)熱癥狀；(2)恢復(fù)期：血常規(guī)檢查在正常范圍，影像學(xué)檢查病變緩解。

1.8 病情程度判定標(biāo)準(zhǔn) (1)輕度感染：X線檢查可見軟組織腫脹、骨外膜增生(骨質(zhì)硬化，外形增粗，密度增高)、層次不清、骨小梁模糊不清等，不超出關(guān)節(jié)；(2)重度感染：X線檢查可見不規(guī)則軟組織、死骨片、骨干廣泛破壞等。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清PCT、CRP、IL-6水平比較 觀察組血清PCT、CRP、IL-6水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清PCT、CRP、IL-6水平比較

2.2 不同類型骨關(guān)節(jié)感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較 化膿性關(guān)節(jié)炎患兒血清PCT、CRP、IL-6水平均高于急性骨髓炎及慢性骨髓炎患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同類型骨關(guān)節(jié)感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較

2.3 急性感染期及恢復(fù)期患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較 骨關(guān)節(jié)感染患兒急性感染期血清PCT、CRP、IL-6水平均高于恢復(fù)期，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

表3 急性感染期及恢復(fù)期患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較

2.4 不同病情程度患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較 重度感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平均高于輕度感染患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 不同病情程度患兒血清PCT、CRP、IL-6水平比較

3 討論

兒童發(fā)生化膿性關(guān)節(jié)炎及骨髓炎的病因與患兒免疫力、年齡及社會經(jīng)濟(jì)水平相關(guān)，故病原體耐藥性及種類存在一定的差異。金黃色葡萄球菌是導(dǎo)致兒童骨骼、肌肉感染的常見病原體，4歲以下兒童骨骼感染中占比約為60%[6]。目前，國際上對骨關(guān)節(jié)感染尚未有統(tǒng)一診斷標(biāo)準(zhǔn)，通常根據(jù)患兒臨床表現(xiàn)、影像學(xué)結(jié)果、微生物學(xué)分析進(jìn)行判斷。化膿性關(guān)節(jié)炎患兒臨床主要表現(xiàn)為局部腫脹、疼痛、負(fù)重能力降低、活動范圍限制等[7]，而骨髓炎患兒主要表現(xiàn)出疼痛、發(fā)熱、活動受限等[8]。

PCT是一種降鈣素前體肽，在人體內(nèi)穩(wěn)定性較好，由甲狀腺細(xì)胞分泌產(chǎn)生PCT前體，后逐漸分解出PCT、降鈣素，血液中水平較低[9-10]。患兒感染細(xì)菌后數(shù)小時內(nèi)將釋放大量白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等，刺激PCT基因表達(dá)。PCT具有蛋白酶抗性，故在發(fā)生感染2 h內(nèi)就可檢測到水平顯著上升，治療后可緩慢恢復(fù)至正常水平[11]。CRP是一種由肝臟分泌的在出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)時產(chǎn)生的急性時相蛋白，屬于非特異性抗炎因子，在炎癥反應(yīng)早期起作用，可幫助開啟免疫反應(yīng)，并促進(jìn)白細(xì)胞的抗炎作用[12]。CRP在健康兒童體內(nèi)處于較低水平[13]，當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激或感染引發(fā)炎癥反應(yīng)后，將在12 h內(nèi)緩慢上升，治療后將逐漸恢復(fù)正常[14]。IL-6是一種多功能糖蛋白，在機(jī)體受炎癥刺激后分泌，生物效應(yīng)較為復(fù)雜，可引誘形成抗體并加強(qiáng)免疫功能；而在另外情況下可能誘發(fā)炎癥反應(yīng)，并引起免疫失調(diào)[15-16]。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清PCT、CRP、IL-6水平高于對照組兒童，表明骨關(guān)節(jié)感染會引起患兒體內(nèi)免疫炎癥反應(yīng)激活，而不同感染類型患者中PCT、CRP、IL-6水平也有明顯的差異，其中化膿性關(guān)節(jié)炎患兒的上述指標(biāo)升高最為明顯，可能是因為化膿性關(guān)節(jié)炎直接由化膿性細(xì)菌感染，致病菌毒性較強(qiáng)，病情發(fā)展較快，體內(nèi)炎癥反應(yīng)級聯(lián)放大效應(yīng)更明顯，提示血清PCT、CRP、IL-6水平對骨關(guān)節(jié)感染診斷及感染類型的鑒別有一定的輔助價值。趙智浩等[17]研究發(fā)現(xiàn)感染患者血清PCT、CRP水平高于未感染組，與本研究一致。本研究還發(fā)現(xiàn)重癥患兒血清PCT、CRP、IL-6水平要高于輕度患者，但本研究輕、重癥主要是根據(jù)X線片結(jié)果進(jìn)行判別，相關(guān)骨損傷是發(fā)生在炎癥反應(yīng)之后，此時血清指標(biāo)水平已趨向平穩(wěn)，因此雖有統(tǒng)計學(xué)意義，但數(shù)值之間差異較小，可能不適用于輕重癥的分層；在疾病恢復(fù)期，患兒血清PCT、CRP、IL-6水平明顯低于急性感染期，這可能是因為抗菌藥物的使用有效控制了病原菌的水平，代謝產(chǎn)物的分泌減少，對機(jī)體的炎癥刺激也隨著減少，其次機(jī)體自身通過分泌抑炎癥細(xì)胞因子可調(diào)控CRP、IL-6等促炎性細(xì)胞因子的合成，從而緩解免疫炎癥反應(yīng)失衡，說明血清PCT、CRP、IL-6水平可能對于患兒的預(yù)后有一定的評估價值。

綜上所述，本研究分析發(fā)現(xiàn)骨關(guān)節(jié)感染患兒血清PCT、CRP、IL-6水平更高，急性感染期高于恢復(fù)期，重度感染患兒高于輕度感染患兒，化膿性關(guān)節(jié)炎患兒高于急性骨髓炎及慢性骨髓炎患兒。本研究不足之處是所選病例數(shù)較少，后續(xù)將擴(kuò)大樣本量繼續(xù)研究。