早期梅毒合并HIV感染的MSM人群Treg細胞的研究

汪曉丹,張 明,李 娟,翁文佳,高艷青

(首都醫科大學附屬北京佑安醫院皮膚科,北京 100069;*通訊作者,E-mail:gaoyanqing@ccmu.edu.cn)

梅毒以細胞免疫為主,而HIV可以破壞機體的細胞免疫。人們推測兩種疾病或許有較廣泛的相互作用,如早期的一些研究顯示,梅毒會導致CD4計數下降、HIV載量升高[1],進而推測,合并梅毒可能會加快HIV感染進展為AIDS;處于免疫缺陷狀態時,梅毒可能會迅速由一期進展為三期,甚至出現所謂的“惡性梅毒”[2-5]。查閱文獻,發現二者免疫方面相互作用的研究較少。所以本研究以男男性接觸者(men who have sex with men,MSM)為研究對象,從調節性T細胞(regulatory T cells,Treg)入手,初步探索梅毒合并HIV感染相互作用的特點。

1 材料與方法

1.1 研究對象

研究對象均來自2009-2014年首都醫科大學附屬北京佑安醫院性病艾滋病診療中心隨訪的MSM隊列人群。其中早期梅毒組患者26例(包括一期、二期梅毒、早期潛伏梅毒,且不伴HIV感染),HIV組18例[均為HIV感染者(外周血CD4≥350個/μl,感染HIV時間>6個月)],合并感染組18例[早期梅毒合并HIV患者(外周血CD4≥350個/μl,感染HIV時間>6個月)],健康組20例(MSM隊列中性別和年齡相匹配的未暴露于HIV和梅毒的健康者)。收集病例過程中不包括年齡小于18歲、合并有活動性肺結核的患者。所有梅毒患者均未進行驅梅治療,所有HIV感染者均未進行高效抗逆轉錄病毒療法(highly active antiretroviral therapy,HAART)治療。所有入選者一般情況見表1。

表1 四組患者的基線資料

1.2 方法

1.2.1 Ficoll-Hypaque密度離心法分離PBMC 健康對照組采集新鮮血。取新鮮采集的EDTA抗凝全血離心去除血漿后,用PBS稀釋一倍,加至淋巴細胞分離液上層,2 500 r/min,離心25 min,取中間白膜層(即單核細胞和淋巴細胞富集層),PBS洗滌2遍,得到外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。早期……