安荔赤眼蜂在中國野外首次發現及其體內Wolbachia的檢測

肖莊婷, 王德森, 何余容

(華南農業大學昆蟲學系, 廣東省生物農藥創制與應用重點實驗室, 生物防治教育部工程技術研究中心, 廣州 510642)

赤眼蜂Trichogramma隸屬膜翅目(Hymenoptera)小蜂總科(Chalcidoidea)赤眼蜂科(Trichogrammatidae)，是農林害蟲的重要寄生性天敵。赤眼蜂種類繁多，分布遍及全球，全世界目前發現的有180余種(Pinto, 1999)，我國已記錄的有29種(何曉芳等, 2005)。已經被成功運用于玉米、棉花、蔬菜、甘蔗、果樹和森林的多種害蟲生物防治中，并且取得了顯著的經濟效益和生態效益(Smith, 1996)。在我國，近30年來赤眼蜂已成為應用范圍最廣、應用面積最大、防治對象最多的一類天敵。

赤眼蜂蜂種采集和種類的準確鑒定是赤眼蜂研究和應用的基礎。 赤眼蜂體型微小，成蟲體長0.2～1.2 mm，前翅寬圓，翅脈呈“S”形彎曲，翅面纖毛排列成行；雌雄觸角異型，雌蟲觸角7節，雄蟲觸角5節且具長剛毛(林乃銓, 1994)。赤眼蜂屬的種間鑒別最早是根據其體色、翅毛等外部形態進行的。但Flanders和Quednau(1960)發現赤眼蜂的形態特征會隨寄主及溫度的不同而改變，并通過實驗發現只有在嚴格控制溫度與選定寄主的情況下飼養的赤眼蜂才可依據其外部形態特征鑒定種類，顯然這種方法在實際研究中很難進行，不足以成為鑒別的依據。在赤眼蜂的現代形態學分類中，雄性外生殖器是主要的分類依據(Nagaraja and Nagarkatti, 1969; Nagarkatti and Nagaraja, 1977)。Doutt和Viggiani(1968)通過大范圍研究世界各地已發現的赤眼蜂種類，經過深入系統地對比分析制定了一套赤眼蜂的分類檢索表，由此形成了較為精確可靠的分類系統。然而赤眼蜂的形態鑒定費時費力，未經深入系統的學習往往難以勝任。此外，在野外采集過程中，赤眼蜂成蟲很難采集到，而寄生卵(赤眼蜂幼期)則更容易獲得。再者，被內共生菌Wolbachia感染后的赤眼蜂主要營產雌孤雌生殖，缺少用于形態鑒定的雄性個體(潘雪紅等, 2007)，若要得到雄性個體，還需通過高溫或抗生素等方法進行處理。因此，僅僅依靠成蟲的形態特征來進行赤眼蜂的種類鑒定，尚存在一定的局限性。

近年來，隨著分子技術的長足發展，越來越多的分子鑒定技術被應用于赤眼蜂的分類鑒定。ITS2序列已被用于赤眼蜂物種鑒定和系統發育方面的研究，Almeida和Stouthamer(2003)對rDNA-ITS2序列進行擴增、克隆、測序和比對后實現了對秘魯的卷蛾赤眼蜂Trichogrammacacoeciae的鑒定。在國內，李正西和沈佐銳(2001, 2002)對擬澳洲赤眼蜂Trichogrammaconfusum、廣赤眼蜂Trichogrammaevanescens等6種常見赤眼蜂的rDNA-ITS2進行了克隆測序，利用序列比對發現ITS2可以用于赤眼蜂種一級的分子鑒定。目前，在NCBI數據庫中，已積累了72個赤眼蜂命名種的ITS2序列。因此，形態學與分子生物學相結合，成為了當前赤眼蜂種類鑒定的重要方法。

Wolbachia是一種革蘭氏陰性細菌，具桿狀和球狀兩種形態，屬于變性菌綱 (Proteobacteria)α亞群、立克次氏體科(Richettsiaceae)和Wolbachia屬，具有較高的遺傳多樣性，可以誘導宿主生殖過程中細胞質不親和、孤雌生殖和遺傳上雄性雌性化來調節宿主后代的種群(Sioziosetal., 2008; Ahmedetal., 2016)。Wolbachia表面蛋白基因(Wolbachiasurface protein gene,wsp)的進化速度快，具有很高的序列多態性，基于wsp序列曾建立起一套較為完善的Wolbachia分類系統。Pintureau等(2000)基于wsp基因對短管赤眼蜂T.pretiosum、T.deion和食胚赤眼蜂T.embryophagum等7種赤眼蜂體內Wolbachia構建了系統發育樹并認為這7種赤眼蜂均被wSib感染；宋月等(2010)通過對Wolbachia特異的wsp基因PCR擴增及測序，發現采自華南、華北不同寄主的螟黃赤眼蜂Trichogrammachilonis4個地理種群全部感染Wolbachia，Wolbachia分屬A大組的Kue組及B大組的Pip組，且雙重感染率達到了100%。到目前，在GenBank中登錄注冊的Wolbachiawsp基因序列已有200多個，為Wolbachia系統發育和進化關系的研究提供了基礎資料。但由于Wolbachia的基因組內具有很高的重組率，應用單一基因的序列信息不能全面反映Wolbachia類群之間的系統進化關系(Baldoetal., 2006a)，因此，Baldo等(2006b)從候選的46個基因中篩選出多位點序列分型 (multilocus sequence typing, MLST)的5個基因(gatB,coxA,hcpA,ftsZ,fbpA)，為Wolbachia開發了一個標準的MLST系統，該系統廣泛應用于各種單一感染宿主物種的Wolbachia菌株，對Wolbachia進行鑒定、分型及系統聚類分析。

本研究以野外誘集到的赤眼蜂為研究對象，對采集的赤眼蜂進行形態鑒定并結合rDNA-ITS2測序，實現對野外赤眼蜂準確有效的鑒定。利用Wolbachia的wsp序列以及MLST引物檢測該赤眼蜂的Wolbachia感染情況，基于wsp和MLST對檢測到的Wolbachia進行同源性分析并構建系統發育樹。研究結果為將來在田間進行害蟲防控提供了科學依據，為后續探明Wolbachia與赤眼蜂互作的分子機制提供基礎。

1 材料與方法

1.1 蜂種野外采集

赤眼蜂的蜂種采集時間為2018年5月至2019年2月，采集地點位于華南農業大學樹木園(23.16°N, 113.36°E)內，采集頻率為每月采集1次。具體的采集方法如下：在樹木園內隨機選取10點懸掛10 mm×30 mm米蛾Corcyracephalonica卵卡(由新鮮米蛾卵用膠水均勻粘于坐標紙上制成，在紫外燈下照射60 min 殺胚)，卵卡用雙面膠貼于塑料杯內壁上，將塑料杯倒置、并懸掛于樹枝上，距離地面1.5 m。塑料杯杯口用紗網封住，防治螞蟻等其他昆蟲取食米蛾卵。

7 d后取回卵卡，放置在人工氣候箱(溫度26±1℃，相對濕度60%±10%，光周期12L∶12D)中培養，直至蜂完全羽化。羽化后的成蜂用30%蜂蜜水飼喂，1 d后將單頭雌蜂引入小指形管中，并放入10 mm×5 mm大小的米蛾卵卡供其寄生。1 d后取出卵卡，放入新的小指形管中，待后代羽化后，鑒定種類，統計雌雄比，若后代全為雌性則將雌蜂后代單管分離建立單雌品系。

1.2 蜂種鑒定

1.2.1形態鑒定：為獲得用于形態鑒定的赤眼蜂雄性個體，將1.1節建立的單雌品系后代通過30℃高溫連續處理2代，對獲得的雄性個體在體式顯微鏡下進行外生殖器解剖。具體步驟：首先，配制荷氏液(Hoyer’s medium)及醋酸乳酸酚浸液各1份；然后，將赤眼蜂標本在醋酸乳酸酚浸液中浸泡6～12 h；最后，待標本透明后移至載玻片上，在荷氏液中解剖、整姿，封片拍照(林乃銓, 1994)。證據標本保存于華南農業大學植物保護學院生物防治實驗室。

1.2.2分子鑒定：赤眼蜂基因組的提取方法采用天根生化科技(北京)有限公司的血液細胞組織基因組試劑盒，提取后用NanoDrop微量核酸/蛋白檢測儀測定各DNA樣品的濃度及純度，檢測合格后DNA保存于-20℃備用。對赤眼蜂核糖體核糖核酸基因第2內部轉錄區(ITS2)片段進行擴增，引物由生工生物工程(上海)股份有限公司參考已報道的安荔赤眼蜂TrichogrammaoleaeITS2序列(GenBank登錄號: DQ389070.1)合成。引物序列：上游引物5′-CTGGCTGAGGGTCTGTTAT-3′；下游引物5′-CTTGCBDHTCGYTTRAGGC-3′。本實驗采用的反應體系(50 μL): ddH2O 36 μL, PCR Buffer 5 μL, dNTPs(2.5 μmol/L)4.5 μL, 上下游引物(10 μmol/L)各1 μL, DNA模板2 μL, rTaq(5 U/μL)0.5 μL。空白對照不加DNA模板。PCR反應條件: 94℃預變性2 min; 94℃變性30 s, 50℃退火50 s, 72℃延伸90 s, 循環38次；72℃延伸10 min，產物在4℃保存。使用1.5%瓊脂糖凝膠電泳對PCR產物進行檢測，電泳結束后置于凝膠成像系統下觀察并拍照記錄。PCR產物送廣州擎天生物技術有限公司進行雙向測序。

測序結果用核苷酸序列分析軟件MEGA5.04對序列進行拼接剪裁，在GenBank中作BLAST比對，比對確認后的序列進行赤眼蜂系統發育的分析，選取ITS2完整序列，利用鄰接(neighbor-joining)法構建系統發育樹，最后運用boostrap 1 000次重復進行檢驗。

1.3 赤眼蜂Wolbachia感染檢測

PCR擴增Wolbachia的wsp，對采集到的15頭赤眼蜂樣品進行Wolbachia感染情況分析，計算感染率。引物序列見表1。引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。PCR反應采用體系(25 μL): ddH2O 9.5 μL, 1.2.2節提取的DNA模板1 μL,2×TSINGKE Master Mix 12.5 μL, 上下游引物(10 μmol/L)各1 μL。PCR擴增條件: 94℃預變性2 min; 94℃變性30 s, 59℃退火50 s, 72℃延伸90 s, 循環38次; 72℃延伸10 min。PCR產物在1.5%的瓊脂糖凝膠中電泳后染色觀察，于凝膠成像系統下觀察并拍照記錄，將目的片段的PCR產物進行回收、純化后，交由公司進行雙向序列測定。

1.4 赤眼蜂體內Wolbachia系統發育分析

從GenBank中下載31條其他昆蟲以及其他赤眼蜂品系或種群體的Wolbachiawsp序列，連同1.3節獲得的Wolbachia的wsp序列，利用MEGA5.04軟件的最大似然法(ML)構建系統發育樹，采用Kimura 2-Parameter模型計算遺傳距離，位點間變異率采用G位點間變化的離散Gamma分布，其他參數設置為默認值，檢驗支持率的重復性抽樣分析(bootstrap analysis)參數設置為1 000次。

1.5 赤眼蜂體內Wolbachia MLST序列分型

進行MLST(Wolbachia管家基因gatB,coxA,hcpA,ftsZ和fbpA)序列分型，引物序列見表1，PCR反應體系(25 μL): ddH2O 9.5 μL, 1.2.2節提取的DNA模板1 μL, 2×TSINGKE Master Mix 12.5 μL, 上下游引物(10 μmol/L)各1 μL。反應程序: 94℃預變性2 min; 94℃變性30 s, Tm退火50 s, 72℃延伸90 s, 循環38次; 最后72℃延伸10 min。PCR產物在1.5%的瓊脂糖凝膠中電泳后染色觀察，于凝膠成像系統下觀察并拍照記錄。將目的片段的PCR產物切膠純化回收，采用北京擎天新業生物技術有限公司pClone007 Simple Vector試劑盒進行連接轉化，將純化產物連接至pClone007 Simple Vector，然后轉化到大腸桿菌EscherichiacoliDH5α感受態細胞中，通過藍白斑篩選，挑選陽性克隆，經菌液PCR鑒定含有目的片段后，交由公司進行雙向序列測定。用核酸序列分析軟件MEGA5.04對序列進行手工檢查核對并拼接剪裁，在NCBI上作BLAST比對，比對確認后將測序結果全部提交到PubMLST等位基因譜和wsp的基因譜，得到感染Wolbachia的序列型(ST)。利用IQ-Tree，基于獲得的PCR擴增序列構建MLST多基因聯合ML系統發育樹(Nguyenetal., 2015)，用ModelFinder進行單基因最佳模型篩選(Kalyaanamoorthyetal., 2017)，利用FigTreev1.4.0進行可視化。

2 結果

2.1 赤眼蜂形態鑒定

本實驗共采集到兩批赤眼蜂，采集時間分別為2018年5月和10月，被寄生的米蛾卵分別為11粒和9粒，羽化出蜂數分別為9頭和6頭，羽化蜂均為雌蜂。在其他的采集月份，存在米蛾均被昆蟲(螞蟻等昆蟲)啃食、發霉等現象，導致未能采集到赤眼蜂。在實驗室條件下，進一步的擴繁結果顯示所采集的15頭雌蜂產雌率均為100%，推測為產雌孤雌生殖。

圖1 本研究觀察的赤眼蜂雌蜂Fig. 1 Female adults of Trichogramma observed in this studyA, B: 產卵前行為Behavior before oviposition; C: 背部觀Dorsal view; D: 腹部觀Ventral view.

雌蜂(圖1)體色微黃褐色，腹部為黑褐色，前足腿節兩端與脛節及各跗節、中后足腿節與脛節兩端及第1和2跗節褐色；翅透明；頭頂區若干短刺毛；產卵管略短于后脛節。

15個單雌品系后代通過30℃高溫連續處理2代后獲得了多個雄性后代，其雄性外生殖器(圖2)陽基背突高度骨化，廣三角形，有較寬圓弧形側緣，基部收窄，腹中突基部至陽基側瓣末端的距離(D)的長度近于陽基全長的1/3，腹中突成銳角三角形，其長度為D的2/5；鉤爪末端突出于陽基側瓣之外；陽莖稍長于內突，兩者之和明顯近于陽基全長，短于后足脛節。該特征與Voegelé 和 Pointel(1979)描述的TrichogrammaoleaeVoegelé & Pointel的雄性外生殖器一致。據此將誘集到的赤眼蜂種鑒定為安荔赤眼蜂T.oleae。

2.2 赤眼蜂分子鑒定

將擴增的ITS2的測序結果用MEGA5.04分析軟件對序列進行拼接后在 NCBI上進行比對，發現與已報道的安荔赤眼蜂ITS2序列(GenBank登錄號: DQ389070.1)一致性為100%，并將獲得的ITS2完整序列提交GenBank注冊，登錄號為MT738247。

圖2 赤眼蜂雄蜂外生殖器形態特征Fig. 2 Morphological characteristics of external genitaliaof male adults of TrichogrammaCS: 鉤爪Chelate structures; D: 腹中突基部至陽基側瓣末端的距離Length between the base of MVP and GF; DEG: 陽基背部Dorsal expansion of gonobase; GF: 陽基側瓣Apex of gonoforceps; MVP: 腹中突Median ventral projection.

選擇鄰接法對采集到的安荔赤眼蜂的ITS2全序列以及從GenBank中下載的赤眼蜂品系或種群ITS2全序列構建系統發育樹(圖3)。結果表明，基于ITS2核苷酸序列，本研究的安荔赤眼蜂和其他品系或地理種群的安荔赤眼蜂聚在一起。ITS2序列分析結果支持將本研究從野外采集獲得的赤眼蜂材料鑒定為安荔赤眼蜂T.oleae。

圖3 鄰接法構建的基于ITS2核苷酸序列的赤眼蜂品系或種群系統進化樹(1 000次重復)Fig. 3 Phylogenetic tree of Trichogramma strains or populations by neighbor-joining methodbased on nucleotide sequence of ITS2 (1 000 replicates)

2.3 基于wsp基因的安荔赤眼蜂體內Wolbachia系統發育

將PCR擴增的wsp序列的測序結果用MEGA5.04分析軟件對序列進行拼接后，在 NCBI上進行比對并將序列提交GenBank注冊，登錄號為MW006098。PCR檢測結果顯示，所采集的安荔赤眼蜂均感染了共生菌Wolbachia，感染率為100%。從系統發育建樹上(圖4)可以清晰地看到Bootstrap值為100大于70，說明構建的進化樹可信度較高，所測得的安荔赤眼蜂體內Wolbachia與安荔赤眼蜂(前南斯拉夫品系)、短管赤眼蜂Trichogrammapretiosum(烏拉圭品系)以及Trichogrammadeion(荷蘭品系)體內Wolbachia親緣關系較近，屬于B超組中的Sib亞組。

圖4 最大似然法構建的基于wsp核苷酸序列的不同種昆蟲體內Wolbachia系統發育樹Fig. 4 Phylogenetic tree of Wolbachia from different insect species by maximum likelihood methodbased on nucleotide sequence of wspWolbachia來源昆蟲種Origin insect species of Wolbachia: MW006098: 安荔赤眼蜂Trichogramma oleae from Guangzhou; AF245166: 安荔赤眼蜂Trichogramma oleae (前南斯拉夫品系Former Yugoslavia line); MG255146: 短管赤眼蜂T. pretiosum(烏拉圭品系Uruguay line); AB094397: 松毛蟲赤眼蜂 Trichogramma dendrolimi; AF071925: Trichogramma deion(荷蘭品系Netherlands line); AF071927.1: 蜆蝶赤眼蜂Trichogramma kaykai; AF245164: 科爾多瓦赤眼蜂Trichogramma cordubensis; AF071923: Trichogramma sibericam; AF245167: 廣赤眼蜂Trichogramma evanescens; AF020084: Trichogramma deion; AF245162: 顯棒赤眼蜂Trichogramma semblidis; AF071926: 歐洲玉米螟赤眼蜂Trichogramma nubilale; AF394235: 松毛蟲赤眼蜂Trichogramma dendrolimi; AY311486: 螟黃赤眼蜂Trichogramma chilonis; EU399644.1: 棉鈴蟲Helicoverpa armigera; AM999887.1: 食胚赤眼蜂Trichogramma embryophagum; EU399642.1: 米蛾Corcyra cephalonica; EU399641.1: 柞蠶Antheraea pernyi; AY641091: 螟黃赤眼蜂Trichogramma chilonis; AY633579: 玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae； AY390279: 廣赤眼蜂Trichogramma evanescens; AF071913: 摩洛哥赤眼蜂Trichogramma bourarachae; AF071912: 蜆蝶赤眼蜂Trichogramma kaykai; AF452644: 卷蛾赤眼蜂Trichogramma cacoeciae; EU399635.1: 楊扇舟蛾Clostera anachoreta; EU399633.1: 腎斑尺蛾 Ascotis selenaria; EU399636.1: 甘薯天蛾Herse convolvuli; EU399634.1: Chiasmia cinerearia; AY377733.1: 甘藍夜蛾赤眼蜂Trichogramma brassicae; EU399640.1: 黃刺蛾Cnidocampa flavescens; EU399639.1: Pandemis dumetana; EU399638.1: 梨小食心蟲Grapholitha molesta. A, B: 分別為A超組和B超組Supergroups A and B, respectively; Sib, Dei, Pip, Sem, Eva, Kue: 分別為亞組Subgroups.

2.4 基于MLST的Wolbachia株系分型及系統發育

在確定感染Wolbachia的安荔赤眼蜂個體中分別擴增管家基因coxA,fbpA,ftsZ,gatB和hcpA片段，將測序結果用MEGA5.04分析軟件對序列進行拼接后，在NCBI上進行比對并將序列提交GenBank注冊，登錄號分別為MW006093, MW006094, MW006095, MW006096和MW006097。Wolbachia數據庫在線比對結果顯示，野外采集的安荔赤眼蜂種群所感染的Wolbachia序列型為ST486(表2)。系統發育分析結果表明，在B超組中，安荔赤眼蜂體內的wSib株系與T.deion體內的wDei株系聚為一支，遺傳距離為0.006，表明wSib株系與wDei株系為兩個親緣關系很近的亞群(圖5)，這一結果與圖4基于wsp基因構建的Wolbachia系統發育樹所顯示的結果一致。

表2 安荔赤眼蜂體內Wolbachia 株系的MLST等位基因譜及序列型Table 2 MLST allelic profiles and sequence types (ST)of Wolbachia strains detected from Trichogramma oleae

圖5 基于MLST基因序列的不同種昆蟲體內Wolbachia系統發育樹Fig. 5 Phylogenetic tree of Wolbachia from different insect species based on MLST gene sequencesWolbachia來源昆蟲種Origin insect species of Wolbachia: Cqui_B ST9.ID30: 尖音庫蚊Culex pipiens; wBol1 ST125.ID40: 幻紫斑蛺蝶Hypolimnas bolina; Ekue_B ST20.ID31: 地中海粉螟Ephestia kuehniella; Ccep_B_BJ ST41.ID1631: 米蛾Corcyra cephalonica; wLvict ST306.ID507: Leptopilina victoriae; Osca_B ST27.ID32: Ostrinia scapulalis; wDei ST31.ID35: Trichogramma deion; wSib ST486: 安荔赤眼蜂Trichogramma oleae; wLclav ST303.ID342: Leptopilina clavipes; wRu3 ST265.ID423: 小腹繭蜂屬Microgaster; Bmal_D ST35.ID37: 馬來絲蟲Brugia malayi; Clec_F ST8.ID36: 溫帶臭蟲Cimex lectularius; Drec_A ST13.ID9: 果蠅Drosophila recens; Zang_H ST90.ID207: 白蟻Zootermes angusticollis. MLST: 多位點序列分型Multilocus sequence typing. A, B, D, F, H: 超組Supergroups. 各分支標記為Wolbachia寄主名稱、所屬超組及序列型。The host name, supergroup and sequence type (ST) of Wolbachia are marked on each branch.

3 討論

原廣東省昆蟲研究所李麗英教授從法國引進了安荔赤眼蜂T.oleae，長期保種于原廣東省昆蟲研究所(現廣東省動物研究所)，華南農業大學博士研究生曾贊安2006年曾在實驗室對其大量繁殖，并引進到香港特別行政區用于防治荔枝蒂蛀蟲Conopomorphasinensis(曾贊安等, 2007)。本研究通過形態和分子鑒定將2018年5月和10月在華南農業大學樹木園(該園靠近荔枝種植園)采集到的赤眼蜂材料鑒定為安荔赤眼蜂T.oleae，是完全感染Wolbachia的產雌孤雌生殖品系，該蜂為中國野外首次發現。5月為中國華南地區荔枝蒂蛀蟲的高發季，荔枝分泌出的芳香烴會吸引荔枝蒂蛀蟲雌蟲產卵(Mengetal., 2018)，可能會導致安荔赤眼蜂種群數量的升高。10月份再次在華南農業大學樹木園內采集到了安荔赤眼蜂，而此時安荔赤眼蜂的寄主種類尚需進一步確認。

在過去的研究中，赤眼蜂的鑒定依據主要是雄蟲的形態特征(Nagaraja and Nagarkatti, 1969; Nagarkatti and Nagaraja, 1977)，以及ITS2序列(Stouthameretal., 1999)。不同的分子標記技術都有自己的缺點，例如，ITS2不能區分微小赤眼蜂T.minutum和T.plantneri(Stouthameretal., 1999)。因此只通過一種分子鑒定方法得到的結果往往是不準確的，但先通過解剖赤眼蜂的雄性外生殖器進行形態鑒定之后，再進行ITS2序列的分子比對，將形態鑒定與分子鑒定結合起來可以得到可靠的結果(Polaszeketal., 2011)。

安荔赤眼蜂分布于前南斯拉夫、意大利、保加利亞、希臘及法國，寄主為橄欖樹上的絹螟屬Diaphania(Glyphodes)unionalesHB及菜蛾科橄欖蛾PraysoleaeBernard(Voegelé and Pointel，1979)。在國外，Gharbi等(2014)探究了冷藏期和飼養溫度對安荔赤眼蜂的生物學影響，表明該赤眼蜂具有耐低溫的能力。安荔赤眼蜂通常被用于橄欖樹上的害蟲防治(Ksentinietal., 2011)，隨著雌蜂日齡的增長，安荔赤眼蜂可傾向于接受更多變質的卵(Ksentinietal., 2018)；中國曾贊安等(2007)從室內的18個赤眼蜂蜂種中發現只有食胚赤眼蜂Trichogrammaembryophagum和安荔赤眼蜂對荔枝蒂蛀蟲卵有寄生能力，其余16種赤眼蜂并未發現能寄生荔枝蒂蛀蟲，其中安荔赤眼蜂的寄生率為29.00%，子代羽化率為80.49%。這些生物學特征說明該赤眼蜂在田間釋放可以很快適應野外環境，具有很強的種群定殖能力，在生物防治上具有一定的應用前景。

李菁等(2018)基于wsp序列及MLST等位基因譜系統發育分析表明wOfur2株系與其他昆蟲宿主中具有殺雄和誘導胞質不親和作用的Wolbachia株系具有很近的親緣關系。國內外都未對安荔赤眼蜂體內的Wolbachia進行MLST分析，本研究通過對野外采集的安荔赤眼蜂進行了體內Wolbachia的檢測，結果表明采集到的安荔赤眼蜂Wolbachia感染率達到了100%。本研究中基于wsp基因分析顯示，安荔赤眼蜂體內的Wolbachia屬于B超組中的Sib亞組，與GenBank上下載的安荔赤眼蜂(前南斯拉夫品系)、短管赤眼蜂(烏拉圭品系)以及T.deion(荷蘭品系)體內Wolbachia親緣關系較近(圖4)，這一結果與MLST分析結果(圖5)一致，表明wSib株系與wDei株系為兩個親緣關系很近的亞組。但由于Wolbachia數據庫中寄主為Trichogramma的數據較少，所采集到安荔赤眼蜂同其他赤眼蜂體內的Wolbachia之間是否存在水平傳播的現象還需進一步研究。MLST基因存在重組的現象，重組率低導致一般的系統發育研究難以體現差異(Lefoulonetal., 2017)，Bleidorn和Gerth(2018)建議使用Wolbachia的基因組來作為Wolbachia分類及系統發育研究，這為進一步研究親緣關系較近的Wolbachia亞群提供了研究方向。