(銅仁職業技術學院 貴州 554300)
從目前情況來看,對銀杏的開發而得到的提取物是一種天然植物制劑。銀杏葉的活性包括多種,最為主要的就是黃酮類以及多糖類物質,其表現功效是有抗氧化等。比如說,其可以對各個器官或者是中樞神經起到一定的保護作用,另外,對于腫瘤還有其他疾病也有治療效果。目前很多資料表明,GBLP具有生物學功能、藥物功能,所以說對其開發潛力巨大。在多糖的提取中,方法是多樣的,我們最常見到的就是蒸餾法、超聲提取等。超聲提取主要是通過高頻次的振動對細胞組織破壞,這種方法效率非常高。酶提取方法也是常見的一種,這種方法主要是通過酶反應進行提取有效物質。糖類物質的分子質量大,因此不能使用一般的方法。同時,多糖的生物活性和分子質量、基數等因素相關。
銀杏葉多糖主要是從其葉片、果和外種皮中提取而得。目前植物多糖已被大量應用在保健食品和化妝品等行業中,以銀杏多糖為代表,因其特有的藥理作用如:抗腫瘤、調節免疫、抗氧化、降血脂等。銀杏葉多糖,是從干燥銀杏葉片中提取出的多糖物質,最常用的提取方法為水提醇沉法,對酶解法提取銀杏葉多糖進行了初步研究,這次主要采取的是纖維素酶法結合的方法,首先需要銀杏葉粉10克,將其按照1:15加入到蒸餾水中,容器含量不能少于250mL。50℃恒溫振蕩2h后,加入0.5%纖維素酶(以銀杏粉重量為準),同時,還需要調節pH值,大概在4.5,將其酶解50min,將剩余的藥渣再放入50mL的蒸餾水中,這種方法可以多次使用,從而提取溶液。提取后再進行乙醇沉淀,得銀杏葉多糖,其提取率為1.67%,并證實纖維素酶法與水提法比較,提取量更高。
對于銀杏葉多糖的提取,最主要的是采取超聲波方法,這種方法主要是采用810瓦的功率,用超聲將其處理20min,再添加0.75%的纖維素酶,沉淀冷凍干燥后得銀杏葉粗多糖,其提取率為12.2%。影響銀杏葉多糖提取率的主要因素有:破碎粒度、料液比、溫度、提取時間、超聲功率、酶用量和提取次數等。使用不同的提取方法,銀杏葉多糖含量也不盡相同。如果使用水提醇沉法,得到的多糖和含量為12.58%,5.69%;如果使用酶法,水體醇沉法得到的含量則為14.12%和6.82%;使用微波-水提沉法得到的含量為13.31%和6.15%。GBLP也有一定的抗腫瘤效果,將它和其他抗腫瘤藥物進行比較,GBLP是沒有副作用的,還可以改善肌體的新陳代謝和增強自身的免疫力。GBLP和它的溶液還可以對肝臟進行排毒,也有抗氧化及抗炎的作用。

圖1 時間的影響
在多糖的提取中,被浸提取物和提取的料液還沒有達到平衡之前,如果時間越長,其產率也會隨之上升。換句話說,就是在料液相同的情況下,如果被浸時間越長,GBLP的產率也就會隨之增加。在進行相關實驗的時候,可以將時間進行設定,可以設置為1h、2h等,然后再對GBLP的濃度進行提取。我們由圖1可以發現,被浸時間從1h到3h,GBLP的濃度剛開始在300.75微克到471.55微克,產率明顯增加;在后期的3h到4h之間,產率也是增加。我們可以得出,在3h階段,提取的多糖是最佳時間。
我們知道,在熱作用下,分子的運動也會不斷的加速,從而使細胞內的多糖浸出。另外,熱作用會使銀杏葉細胞壁的組織破壞掉,這樣也會使多糖更容易浸出。在本次的試驗中,相關人員可以將溫度設定為70℃、80℃,以此類推。可以觀察圖2,隨著溫度的不斷上升,銀杏葉多糖的產量也在不斷的上升,在70℃上升至80℃時,銀杏葉多糖的產量由319.32微克上升到450.02微克,GBLP產率明顯增加。在溫度為80℃到90℃時,產率增加了4.54%,從90℃到100℃時,濃度則會逐步下降,此項研究我們可以知道,在溫度為80℃時,GBLP是最佳溫度。

圖2 溫度的影響
在此次研究中,料液設定為1:10、1:20等,提取到的多糖濃度見圖3,料液在1:10到1:30的時候,銀杏葉多糖的濃度從341.6微克增加到了376.75微克,可以看出得出的濃度明顯提升,這主要是由于隨著料液濃度的增加,銀杏葉細胞內的多糖濃度差就越大,得到的多糖也就越多。當料液在1:30到1:40的時候,多糖濃度也是增加的,但是此次增加的比較少,產率只增加了2.18%。這次研究可以得出,料液濃度在1:30的時候,GBLP的產率會比較高。

圖3 料液比的影響

圖4 破碎程度的影響
綜上,本次研究分析中,銀杏葉的料液配比應設置到1:30,溫度應該設置到80℃,銀杏葉的破碎程度應該設置到80目,將提取時間設置為3h,提取次數為兩次,采取水提醇沉法工藝,用活性炭對銀杏葉多糖進行純化,此方法可以得到更多的GBLP產率。這種方法實用性強且安全率更高,同時也適用于大規模的生產,希望本次研究可以對銀杏葉多糖提取起到一定的借鑒,從而促使整個行業的健康發展。