CD117和神經巢蛋白在三陰性乳腺癌組織中的表達及臨床意義*

馮穩，宋魏，于慶凱，趙冬梅

[鄭州大學附屬腫瘤醫院（河南省腫瘤醫院）病理科，河南鄭州450003]

?

CD117和神經巢蛋白在三陰性乳腺癌組織中的表達及臨床意義*

馮穩，宋魏，于慶凱，趙冬梅

[鄭州大學附屬腫瘤醫院（河南省腫瘤醫院）病理科，河南鄭州450003]

摘要：目的探討CD117、神經巢蛋白（Nestin）在三陰性乳腺癌（TNBC）組織中的表達及臨床意義。方法收集2010年11月-2012年5月于本院手術治療的乳腺癌患者腫瘤組織病理切片，隨機選取其中50例經免疫組織化學染色ER、PR、HER2均為陰性者，設為實驗組。另隨機選取普通乳腺癌組織50例，設為對照組。通過免疫組織化學方法研究正常實驗組和對照組切片組織中CD117、Nestin的表達情況，分析CD117、Nestin在TNBC中的臨床意義。結果實驗組CD117、Nestin表達陽性率顯著高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論在TNBC組織中CD117、Nestin的表達顯著上調，與TNBC的發生關系密切。

關鍵詞：CD117；Nestin；免疫組織化學；三陰性乳腺癌

*基金資助：河南省醫學科技攻關計劃項目（No：2011020159）

三陰性乳腺癌（triple negative breast carcinoma，TNBC）是指雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）和人表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptors，HER-2）3者均為陰性表達的乳腺癌，約占所有乳腺癌患者的15%～19%[1-2]。TNBC發病年齡比其他類型乳腺癌小，社會經濟地位低的婦女發病率高，腫塊直徑較大，組織學Ⅲ級比例高，淋巴結轉移陽性率高[3-4]，無病生存率及總生存率均比非三陰乳腺癌差[5]。術后3年是TNBC的復發高峰[6]，且更易出現內臟及軟組織轉移。目前乳腺癌的治療主要為內分泌治療和分子靶向治療，但對三陰乳腺癌的治療效果欠佳[7-9]。

已有研究證實，原癌基因蛋白（proto-oncogene proteins c-kit，CD117）是c-kit基因的表達產物，而c-kit原癌基因編碼跨膜酪氨酸激酶受體，屬于受體型酪氨酸激酶Ⅲ家族[10]，在腫瘤的發生、發展中有重要的調控作用。因此，本研究擬檢測TNBC組織中CD117、神經巢蛋白（Nestin）的表達情況，探索CD117、Nestin與三陰性乳腺癌的相互關系，現將研究方法及結果報道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料

收集2010年11月-2012年5月于鄭州大學附屬腫瘤醫院行乳腺癌手術治療者的腫瘤組織病理切片，篩選出其中經免疫組織化學染色ER、PR、HER2均為陰性者，隨機選取50例設為實驗組。50例切片組織來源均為女性患者，年齡24～49歲，平均（37.21±4.21）歲。50例病例均為原發性腫瘤，術前未經任何治療，術后經病理診斷為TNBC并排除合并其他腫瘤。另隨機選取普通乳腺癌組織50例作為對照組，組織來源均為女性，年齡27～46歲，平均（36.88±3.91）歲。本項目經本院倫理委員會審核通過，所有研究對象均自愿參與本項目，并簽署知情同意書。兩組病例在年齡、性別及體重指數方面差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2方法

各組織切片中CD117、Nestin表達的檢測：組織切片先后予梯度乙醇脫水，抗原修復，一抗過夜（鼠抗人CD117抗體、鼠抗人Nestin抗體，美國Abcam），二抗（辣根過氧化物酶標記）室溫靜置，蘇木素復染等處理，中性樹膠封固，光鏡下觀察。

1.3觀察指標

光鏡下觀察，細胞內出現棕黃色或棕褐色顆粒為陽性。觀察10個高倍鏡視野，各計數500個細胞，計算陽性細胞百分比，陽性細胞百分比≤25%為陰性，>25%為陽性。

1.4統計學方法

采用SPSS13.0統計軟件。對實驗組和對照組免疫組織化學指標（CD117、Nestin）的比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結果

CD117、Nestin表達情況比較：實驗組50張組織切片中，35例CD117表達陽性，陽性率為70%，39例Nestin表達陽性，陽性率為78%，見圖1；對照組10張組織切片中，2例CD117表達陽性，陽性率為20%，2例Nestin表達陽性，陽性率為20%，見圖2；就CD117、Nestin表達陽性率進行比較，實驗組與對照組的差異有統計學意義（P<0.05），實驗組陽性率均高于對照組。見附表。

圖1　實驗組乳腺組織切片免疫組織化學染色結果（×200）

圖2　普通乳腺癌組織切片免疫組織化學染色結果（×200）

附表　CD117、Nestin表達情況比較　例（%）

3　討論

c-kit基因是位于染色體1q12-13上的原癌基因，參與多種細胞信號轉錄，通過一系列自分泌和旁分泌機制促進細胞的增殖，與多種腫瘤的發生發展聯系密切[11]。CD117為c-kit基因的表達產物，在原始細胞中高表達，隨著細胞的增殖分化，其表達水平逐漸降低，但在腫瘤組織中顯著表達，可作為惡性腫瘤的預后指標之一[12]。Nestin主要表達于發育狀態的幼稚細胞中，正常分化成熟的組織器官中幾乎難以檢測到Nestin[13]，但近年來有學者在多種腫瘤組織中檢測到Nestin重新表達，提示Nestin可能與細胞惡性增殖有關[14]。

原癌基因在高度分化組織中處于抑制狀態，表達水平極低，當某些致癌因素作用于機體，c-kit等原癌基因可突變激活，其將通過編碼一系列功能蛋白質作用于細胞，刺激細胞持續增殖，致使腫瘤惡性化的發生。本研究通過免疫組織化學染色的方法對TNBC及普通乳腺癌病理組織切片進行分析對比研究，發現CD117的表達在TNBC組織中顯著上調，在普通乳腺癌組織中雖然也有表達，但其表達顯著下調（P<0.05），間接證實c-kit原癌基因在TNBC組織中顯著高表達，c-kit基因在TNBC的發生、發展中可能發揮重要的調控作用，這與Zhu等[15]研究結果一致；本研究還發現，Nestin的表達在TNBC組織中顯著上調，而在普通乳腺癌組織中表達顯著下調（P<0.05）。因此，通過聯合檢測CD117及Nestin在組織切片中的表達可以鑒別診斷TNBC及普通乳腺癌。

綜上所述，本研究證實CD117、Nestin在TNBC組織中的表達顯著上調，參與對TNBC發生、發展的生物調控。c-kit基因上某些位點可能成為抗癌藥物靶向治療的潛在靶點。針對c-kit基因的產物CD117以及針對Nestin的阻斷劑可能抑制TNBC的異常增殖，延緩癌細胞的發生、發展。但本研究的樣本量比較小，所得結論具有一定的局限性，因此對TNBC靶向治療的可行性還有待進一步收集大樣本資料深入研究。

參考文獻：

[1]朱信信,楊紅鷹.三陰性乳腺癌相關分子標記物的表達及臨床特征分析[J].診斷病理學雜志, 2015, 22(1): 53-56.

[2]李春艷,王培,張晟,等.三陰性乳腺癌的臨床病理特征和預后分析[J].中華腫瘤雜志, 2013, 35(6): 463-467.

[3]呂剛,施開德,朱際飚,等. 79例三陰乳腺癌臨床特點回顧性分析[J].中國醫藥導報, 2015, 12(6): 36-39.

[4]吳震宇.三陰性乳腺癌和HER-2過表達乳腺癌的臨床病理特征[J].健康研究, 2015, 35(1): 46-48.

[5]陳洪流.三陰性乳腺癌患者的臨床特征及預后因素[J].中國老年學雜志, 2013, 33(23): 5840-5841.

[6] Li CY, Zhang S, Zhang XB, et al. Clinic pathological and prognostic characheristics of triple-negative breast cancer (TNBC) in Chinese patients: a retrospective study [J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevent, 2013, 14(5): 3779-3784.

[7]余峰,張霄蓓,張晟,等.三陰性乳腺癌復發特征及危險因素分析[J].中華醫學雜志, 2014, 94(28): 2180-2183.

[8]張淼,任力,胡蓉,等. ki67、EGFR在三陰性及非三陰性乳腺癌中的表達與相關性分析[J].武警醫學, 2014, 25(12): 1256-1258.

[9]張春俠,王妍,章來長,等.趨化因子受體CCR4和CCR7在三陰性乳腺癌組織中的表達及與臨床預后的相關性[J].現代中西醫結合雜志, 2015, 24(6): 618-620.

[10] Usatyuk PV, Fu P, Mohan V, et al. Role of c-Met/phos-phatidylinositol 3-kinase (PI3k)/Akt signaling in hepato-cyte growth factor (HGF)-mediated lamellipodia forma tion, reactive oxygen species(ROS) generation, and motility of lung endothelial cells[J]. J Biol Chem, 2014, 289(19): 13476-13491.

[11] Shah YM, Van Den Brink GR. c-Kit as a Novel Potential Therapeutic Target in Colorectal Cancer [J]. Gastroenterology, 2015, 149(3): 534-537

[12] Zhao F, Chen Y, Wu Q, et al. Prognostic value of CD117 in cancer: a meta-analysis[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2014, 7(3): 1012-1021.

[13] Neradil J, Veselska R. Nestin as a marker of cancer stem cells [J]. Cancer Sci, 2015, 106(7): 803-811.

[14] Gao N, Xu H, Liu C, et al. Nestin: predicting specific survival factors for breast cancer[J]. Tumour Biol, 2014, 35(3): 1751-1755.

[15] Zhu Y, Wang Y, Guan B, et al. C-kit and PDGFRA gene mutations in triple negative breast cancer[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2014, 7(7): 4280-4285.

（張蕾編輯）

論著

Expression and clinical significance of CD117 and Nestin in triple negative breast carcinoma*

Wen Feng, Wei Song, Qing-kai Yu, Dong-mei Zhao
(Department of Pathology, The Affiliated Cancer Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou, Henan 450003, China)

Abstract:Objective To investigate the expression and clinical significance of CD117、an nestin in triple negative breast carcinoma. Methods Pathological sections of tumor tissues from breast cancer patients were collected in our hospital between 2010 and 2012. Total 50 cases negative for ER、PR、HER2 were randomly selected as experimental group. Other 50 general breast cancer cases were randomly selected as control group. The expression of CD117 and Nestin was detected by immunohistochemistry. Results The expression of CD117 and Nestin in the experimental group was higher than that in the control group(P < 0.05). Conclusions The expression of CD117 and Nestin is higher in the triple negative breast carcinomas, which is closely related to the occurrence of this disease.

Keywords:CD117; Nestin; immunohistochemistry; triple negative breast carcinoma

[通信作者]于慶凱，E-mail：yuqingkai@hotmail.com

收稿日期：2015-10-15

文章編號：1005-8982（2016）08-0048-03

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.08.010

中圖分類號：R737.9

文獻標識碼：A