一種新型新生兒退黃凝膠的研制

江川　顧慧敏　俞瑜　馬冬 梅　田慧　施陳飛

【關(guān)鍵詞】新生兒;黃疸;高膽紅素血癥;凝膠

[ 中圖分類號(hào)]R272.1 [ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [ 文章編號(hào)]2096-5249（2021）26-0001-02

新生兒膽紅素血癥又稱新生兒黃疸，因血清膽紅素濃度（ 主要是未結(jié)合膽紅素） 增高而引起的皮膚黏膜、鞏膜等黃染的現(xiàn)象[1]，是新生兒期最常見(jiàn)的疾病之一。在我國(guó)80% 以上的新生兒在出生后一周內(nèi)會(huì)發(fā)生黃疸[2]，因黃疸入院的患兒占新生兒住院數(shù)高達(dá)49.1%[3]。新生兒黃疸不及時(shí)治療后果嚴(yán)重，在一些情況下可以發(fā)展成嚴(yán)重高膽紅素血癥、急性膽紅素腦病和核疸黃/ 慢性膽紅素腦病[4]，嚴(yán)重威脅新生兒的生命和健康，病死率高，愈后效果不佳，容易產(chǎn)生嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，導(dǎo)致智力落后、視覺(jué)異常、聽力障礙等不良后果[6]。因此，對(duì)新生兒黃疸進(jìn)行及時(shí)、有效的治療，降低膽紅素腦病的發(fā)生，是當(dāng)前圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)研究的重要課題。目前，西醫(yī)對(duì)新生兒黃疸的干預(yù)措施主要采用光療、灌腸、換血等方法。光療雖療效確切，但存在著發(fā)生皮疹、腹瀉、體溫升高、晝夜節(jié)律紊亂、母嬰分離焦慮、視網(wǎng)膜損傷、嬰兒青銅綜合征等副作用[7];新生兒的皮膚十分稚嫩，灌腸易導(dǎo)致肛門或直腸粘膜損傷引起出血或感染;而換血療法是一種有創(chuàng)操作，對(duì)新生兒具有較大的風(fēng)險(xiǎn)。中醫(yī)治療主要采用口服中藥和臍部敷貼中藥治療等方法。新生兒黃疸治療凝膠配方和制備工藝經(jīng)我院多位中藥醫(yī)師專家長(zhǎng)期研究，使用時(shí)將中藥凝膠涂抹新生兒臍帶周圍皮膚，既未覆蓋臍部，又達(dá)到了預(yù)防和治療新生兒黃疸癥的目的，很好的解決了這一難題。

1主要成分研究

新生兒體質(zhì)弱，對(duì)藥物易過(guò)敏，因此對(duì)藥物的選取和劑量的控制十分重要。新生兒退黃中藥生物凝膠選取的中藥成分既具有降低新生兒膽紅素水平的作用，又兼有抗菌成分能抑制新生兒皮膚表面的細(xì)菌生長(zhǎng)，同時(shí)確保對(duì)新生兒使用安全。本中藥驗(yàn)方已申報(bào)了國(guó)家發(fā)明專利，其主要成分由黃芩、金銀花、梔子和殼聚糖等制成，不含防腐劑、香精和色素。黃芩，別名山茶根、土金茶根，為唇形科植物黃芩的干燥根，味苦，性寒，歸肺、膽、脾、小腸、大腸經(jīng)，為臨床常用的清熱燥濕藥，主要含有黃酮及苷類、萜類化合物、揮發(fā)油等成分，具有解熱、抗炎、抗微生物、抗腫瘤、抗氧化等藥理作用，對(duì)消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等疾病具有一定的治療作用[5]。金銀花為忍冬科忍冬屬植物忍冬，同屬多種植物的干燥花蕾，為中醫(yī)常用藥，富含揮發(fā)油，此外含黃酮類、三萜類及有機(jī)酸等，具有清熱解毒、涼風(fēng)散熱、抗病毒、保肝利膽的功能[6]。梔子是茜草科梔子屬植物，其干燥成熟果實(shí)作為中藥梔子，現(xiàn)代植物化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)該植物中含有大量的環(huán)烯醚萜類化合物，同時(shí)還存在一些有機(jī)酸、黃酮、香豆素、揮發(fā)油、皂苷、木脂素、多糖及其他類化合物，現(xiàn)代藥理研究表明梔子具有抗炎、抗氧化、利膽、利尿、抗腫瘤、解熱、鎮(zhèn)痛、輻射防護(hù)、降血脂等多種藥理活性，臨床廣泛用于熱病心煩、黃疸尿赤、血淋澀痛、血熱吐衄、目赤腫痛、火毒瘡瘍等癥[7]。

2關(guān)鍵制備技術(shù)研究

凝膠制備工藝的關(guān)鍵技術(shù)在于中藥的提取和純化、凝膠理化性能調(diào)試、凝膠制備及動(dòng)物安全性試驗(yàn)和評(píng)價(jià)。制備過(guò)程中用到的主要設(shè)備有：中藥煎煮器，型號(hào)YYG40L，長(zhǎng)沙市卓成醫(yī)療器械有限公司;高速攪拌設(shè)備，型號(hào)SWFS-5.5，上海壹維機(jī)電設(shè)備有限公司;減壓蒸餾裝置，型號(hào)5003，上海亞榮生化儀器廠;粘度計(jì)，型號(hào)NDJ-5 s，上海力辰邦西儀器科技有限公司等。

2.1中藥提取和純化工藝研究 中藥成分提取的關(guān)鍵技術(shù)在于不破壞中藥有效成分的前提下如何充分提取藥材成分以及提取后如何純化處理，本項(xiàng)目研究的方法如下：取金銀花3 份、黃芩6 份、梔子6份，加入10倍的水，煎制1 h 后過(guò)濾，然后將藥材浸泡2 h;按此煎制、過(guò)濾、浸泡過(guò)程重復(fù)3 次;藥渣加藥材8 倍重量的水煎煮1h，過(guò)濾;合并。

3次煎煮液，減壓濃縮，攪拌、靜置、過(guò)濾后形成中藥濃縮液，用于后續(xù)凝膠制備。

2.2凝膠理化性能研究 不同分子量、脫乙酰度和含量的殼聚糖在凝膠的物理性能和涂抹效果上有較大的差別：粘度太大不易涂抹和吸收，粘度太小易流淌，造成凝膠流失，因此必需研制一種理化性能最佳的凝膠配方。經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)和測(cè)試，殼聚糖的分子量、脫乙酰度和含量與凝膠性能的相關(guān)性如表1 所示。

本項(xiàng)目將繼續(xù)對(duì)殼聚糖季銨鹽中加入中藥提取物后形成的復(fù)合凝膠性能進(jìn)行優(yōu)化，并做抗菌比對(duì)試驗(yàn)，以最終確定配方中選用殼聚糖的分子量、脫乙酰度和含量。

2.3生物凝膠制備工藝研究 生物凝膠制備工藝分為以下步驟：①殼聚糖加水?dāng)嚢? 份，緩慢加入乙酸;②加入提取好的中藥濃縮液，攪拌均勻;③靜置30 min，得到凝膠溶液;④加季銨鹽水溶液，攪拌均勻;⑤緩慢加入戊二醛水溶液，充分?jǐn)嚢?⑥靜置12 h 后獲得凝膠成品;⑦對(duì)凝膠成品進(jìn)行滅菌處理。

2.4動(dòng)物安全性試驗(yàn)和評(píng)價(jià) 參照標(biāo)準(zhǔn)GB27954-2001《黏膜消毒劑通用要求》《消毒技術(shù)規(guī)范》2002 年版、《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015 版設(shè)計(jì)凝膠動(dòng)物安全試驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的安全性評(píng)價(jià)項(xiàng)目為急性經(jīng)口毒性、皮膚變態(tài)試驗(yàn)、重金屬限量、產(chǎn)品性狀、有效成分含量（ 季銨鹽）、pH 值、產(chǎn)品穩(wěn)定性、衛(wèi)生微生物指標(biāo)、殺滅微生物指標(biāo)、多次皮膚刺激試驗(yàn)和陰道刺激試驗(yàn)。其中毒性試驗(yàn)過(guò)程和結(jié)果如下：①試驗(yàn)動(dòng)物：20 只昆明小鼠（Kunmingmice，KM 小鼠），雌雄各半，20 g 左右，SPF 級(jí)，由南方醫(yī)科大學(xué)提供，許可證號(hào)：SCXK（ 粵）2016-0041，質(zhì)量合格證號(hào)：44002100023276。②檢測(cè)環(huán)境：屏障環(huán)境，溫度20℃～26℃，相對(duì)溫度40%～70%，許可證號(hào)：SYXK（ 粵）2018-0194。③飼料來(lái)源：廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)許可證號(hào)：粵飼證（2019）05073，生產(chǎn)日期：2019-12-02。④樣品制備：稱取6.32 g 樣品，加純水配制成25 mL 樣品溶液。⑤試驗(yàn)方法：采用一次性最大限度試驗(yàn)。試驗(yàn)前禁食過(guò)夜，不限飲水，一次性灌胃5056mg/kg 體重劑量，染毒后繼續(xù)禁食3 h。每天對(duì)動(dòng)物進(jìn)行觀察，連續(xù)觀察14 d。每周稱重一次，并對(duì)死亡動(dòng)物及觀察結(jié)束后存活動(dòng)物進(jìn)行大體解剖觀察。⑥試驗(yàn)結(jié)果：染毒動(dòng)物在染毒14 d 內(nèi)未見(jiàn)任何中毒癥狀和無(wú)發(fā)生中毒死亡，動(dòng)物體重未見(jiàn)異常，試驗(yàn)觀察結(jié)束后對(duì)動(dòng)物進(jìn)行大體解剖未見(jiàn)異常，如表2 所示。該樣品對(duì)KM 小鼠的經(jīng)口LD50>5000 mg/kg 體重，根據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002 年版），急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的評(píng)價(jià)規(guī)定，屬實(shí)際無(wú)毒。

3結(jié)論

本項(xiàng)目研制的新生兒退黃凝膠采用中藥療法治療新生兒黃疸，不僅解決了西醫(yī)療法中光療、灌腸、換血等方法對(duì)新生兒產(chǎn)生的傷害，同時(shí)嚴(yán)格按照護(hù)理技術(shù)指南和臨床保健技術(shù)要求，解決了口服中藥和臍部敷貼中藥治療等方法的弊端，使新生兒黃疸治療可在普通病房或居家開展，解決了原來(lái)新生兒藍(lán)光治療占用了大量NICU床位問(wèn)題，緩解了醫(yī)療資源的緊缺，節(jié)約了醫(yī)療費(fèi)用，同時(shí)避免了新生兒家長(zhǎng)見(jiàn)不到孩子產(chǎn)生的焦慮心理，提高醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量和病人滿意度。