分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測中應用熒光探針法的價值分析

鄒惠英，李麗華，向雨

（中山市黃圃人民醫院，廣東 中山 528400）

0 引言

沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體這3 種病原體是引發性病傳播的常見病原體，這3 種病原體引發的泌尿生殖系統感染是造成我國發生性傳播的重要病癥之一[1]。近年來，人們生活觀念的改變，尤其是對待性生活的開放，導致泌尿生殖系統發病患者數量逐漸增多，給患者的日常生活與工作造成嚴重影響。如果不能及時、準確的進行疾病診斷，并無法給予患者對癥治療，容易耽誤疾病治療，給患者造成更大的影響。沙眼衣原體是基本生理特征與革蘭陽性細菌相似，具有非常高的傳染性[2]。淋病菌屬于革蘭陰性雙球菌，該病原體在性接觸高危人群中的流行性和傳播性極強。解脲支原體可通過損害精子、吸附精子造成不孕不育[3]。總之3 者對人類健康造成了嚴重威脅，早確診、早治療是及時其阻止對人類生殖健康損害、控制病情發展的關鍵。本文將對2019 年1 月至2019 年12 月到我院進行分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測的疑似泌尿生殖系統感染的患者進行回顧性分析，對分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測中應用熒光探針法的價值展開分析，具體內容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2019 年1 月至2019 年12 月到我院進行分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測的疑似泌尿生殖系統感染的患者作為研究對象，實施回顧性分析，病例數量為80 例。所選取的80 例樣本均采取了熒光探針法。所有患者均在進行抗生素治療前采樣。男性受試者26 例，女性受試者54 例，年齡16～47 歲，平均年齡（31.21±8.85）歲。納入標準：（1）患者符合泌尿生殖系統感染的臨床癥狀表現；（2）患者無精神障礙類疾病，可以積極配合診斷檢查；（3）患者年齡≥16歲。排除標準：（1）患者年齡不足16 歲；（2）患者存在精神障礙；（3）患者是因為其它病原體造成的感染。

1.2 方法

全部患者都接受在抗生素治療前進行了樣本采集，并使用了熒光探針法對分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體進行了檢測。具體檢測過程如下：

（1）樣本采集：男性受試者使用無菌拭子在尿道口內，女性受試者使用無菌拭子深入宮頸口內，使用無菌拭子擦拭并停留1 分鐘后，將拭子進入無菌生理鹽水或接種于培養基中。

（2）診斷使用儀器和試劑：熒光探針試劑盒選用上海科華生物工程有限公司生產的PCR 熒光探針試劑盒。培養基選購上海伊華醫學科技有限公司。

（3）熒光探法：使用熱裂解法提取分泌物中的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體DNA，作為模板。使用試劑盒中含有熒光探針額引物進行擴增，反應條件：在50℃進行UNG酶處理2 分鐘，在93℃下進行預變性2 分鐘，隨后在93℃下進行變性10 秒鐘，在60℃下進行退火、延伸以及檢測熒光30 秒，檢測通道為FAM，總共為40 個循環，最后讀取結果。

1.3 觀察指標

對沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率進行觀察。樣本循環閾值（cycle threshold，CT）≤37 為判定為陽性。

2 結果

結果顯示，沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率分別為13（16.25）、15（18.75）、28（35.00）。見表1。

表1 沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體的檢出率[n(%)]

3 討論

沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測是性傳播疾病門診中的常見檢測病原體。當人體在感染上述病原體后，第一時間獲得準確的疾病診斷是十分必要的，越早確診，越早治療越好，對患者造成的影響就會越小。如果疾病診斷不準確，或者檢出率較低的情況下，患者延誤最佳治療時機后，將對其生殖健康造成嚴重損傷[4]。尤其對于女性感染者而言，因為臨床癥狀不明顯而很容易被漏診，臨床整體檢出率不是很高，延誤時間過長時可導致患者不孕。可看出選擇準確又快速的檢測方法用于該類病原體感染篩查的重要性。目前，臨床上用來檢測沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體的方法很多，常用的有涂片法、免疫法、培養法等傳統方法，也包括比較先進的熒光探針法。其中傳統檢測方法的特異性、敏感度都不是很高，并且檢測時間比較長，不是特別適合門診使用，具有一定的局限性，患者需要等候較長時間，不是很方便。熒光探針法作為一種先進的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測法，彌補了傳統檢測方法的不足和缺陷，檢出效率高，通量高。熒光探針法就是一種在紫外-可見-近紅外區有特征熒光，并且其熒光性質（激發和發射波長、強度、壽命、偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。主要用途是標記檢測對象與目標，分為熒光素類探針和無機離子熒光探針。是一種比較好的沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測方法，檢測操作簡單、快速、準確，具有較高的檢出率，目前在臨床上的應用比較多，取得了非常好的檢測效果。所以，在臨床上，懷疑患有泌尿系統感染疾病的時候，為了提高診斷準確率，應該多使用熒光探針法。

在本次研究中結果顯示沙眼衣原體、淋病菌、解脲支原體檢出率分別為13（16.25）、15（18.75）、28（35.00）。表明在沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原的檢出中，使用熒光探針法更為合適。采用熒光探針法檢測，能夠同時對多種病原體進行檢測，實現了診斷上對便捷、快速的要求，避免了因為通過不同方式檢測不同病原體而需要患者取多分標本的麻煩以及標本間差異[5]。并且熒光探針法的產物不需要使用EB（溴化乙錠）進行紫外觀察，檢測安全性得到了有效提升，并且該檢測方法對于檢測儀器的要求也降低，能夠更易普及化[6]。該種檢測方式僅僅在加樣時進行1 次開蓋，后續均在封閉狀態下進行操作，被污染而導致假陽性的可能性極小，確保了診斷的準確性[7]。此外，我們發現陽性者主要集中在21～30 歲年齡段人群，但是20 歲以下陽性者占比也并不低，且最小者僅僅16 歲，這提示我們應當加強青少年、青壯年的相關健康教育，提高人們的性道德觀念、文化素質和健康性行為知識，提升人們的自我保護意識。并且我們發現，雖然單種病原體感染患者居多，但也不能完全排除兩種及以上病原體感染情況，者進一步體現了熒光探針法的優勢。

綜上所述，熒光探針法可有效檢出沙眼衣原體、淋病菌，整體檢出率較高，基本上可以滿足門診診斷需求。因此，在分泌物沙眼衣原體、淋病菌及解脲支原體檢測中應用熒光探針法對臨床診斷具有重要指導價值，是一種高效、可靠、易操作的檢測方式，值得臨床應用與推廣。