受血者與供血者Rh（D、C、c、E、e）抗原相容情況的回顧性分析

王磊 吳學忠

Rh血型系統(tǒng)是一種重要且復雜的血型系統(tǒng)，由于紅細胞膜上Rh復合物的多樣性，形成了多種具有強抗原性的Rh血型抗原表位，其臨床重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)[1]。與臨床密切相關的Rh血型抗原主要有D、C、c、E、e，輸血或妊娠可導致相應不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，引起不同嚴重程度的Rh系統(tǒng)溶血性輸血反應和新生兒溶血性疾病（HDN）[2，3]。目前，我國現(xiàn)行的《臨床輸血技術規(guī)范》[4]對受血者和供血者要求進行ABO、Rh（D）血型檢測，但對Rh血型系統(tǒng)C、c、E、e抗原尚未要求，受血者可能存在Rh（C、c、E、e）不相容性輸血。江曉明[5]、史恩祥[6]等研究表明，C、c、E、e抗原不相容性輸血導致了受血者產(chǎn)生相應不規(guī)則抗體，增加了患者再次輸血時配血相合的難度，影響患者的及時治療。近年來諸多文獻報道[7-9]受血者Rh（C、c、E、e）血型不規(guī)則抗體產(chǎn)生，致使交叉配血不合。為了解我院受血者與其供血者Rh（D、C、c、E、e）抗原相容情況，本研究收集ABO、Rh（D）、交叉配血均相合的受血者和供血者血樣，在保存期內(nèi)進行Rh（D、C、c、E、e）抗原檢測，回顧性分析受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原和表型分布差異及Rh（D、C、c、E、e）抗原相合、相容和不相容性輸血的比率并探討其臨床意義，現(xiàn)報道如下。

材料與方法

1 樣本來源及分組 收集我院2019年6月9日～2020年1月6日期間ABO、Rh（D）、交叉配血均相合的418例受血者、710例供血者的儲存血樣。

Rh（D、C、c、E、e）抗原相容情況分為以下三種：相合，即受血者與供血者Rh（D、C、c、E、e）表型完全一致；相容，即受血者與供血者表型不完全一致，且受血者具有的Rh抗原包含供血者具有的全部Rh抗原；不相容，即受血者與供血者表型不完全一致，且供血者具有的Rh抗原包含受血者不具有的Rh抗原。

2 試劑與儀器 ABO及RhD血型檢測卡（伯樂生命醫(yī)學產(chǎn)品），抗-C、抗-c、抗-E、抗-e試劑（IgM型）（上海血液生物醫(yī)藥），抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥），抗體篩選紅細胞試劑盒及抗體鑒定紅細胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥），凝聚胺介質(zhì)試劑盒（珠海貝索），抗人球蛋白微柱凝膠卡（伯樂生命醫(yī)學產(chǎn)品）。

孵育器（ID-Incubator 37 S Ⅰ），離心機（IDCentrifuge 12 S Ⅱ），血清學低速離心機（安徽中科中佳）。

3 檢測方法 RhD抗原檢測采用微柱凝膠法，Rh（C、c、E、e）抗原檢測采用試管鹽水法，交叉配血試驗采用鹽水法+凝聚胺法（或抗人球蛋白微柱凝膠卡式法），不規(guī)則抗體篩選和鑒定采用試管鹽水法+抗人球蛋白微柱凝膠卡式法。

4 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 25.0進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料之間的比較采用卡方檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

1 受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原及表型的分布比較 418例受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽性比例分別為99.52%、90.67%、62.68%、49.76%和93.30%，710例供血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽性比例分別為99.30%、89.86%、55.63%、44.37%和93.52%，受、供者相應Rh（D、C、c、E、e）抗原分布無顯著性差異（P＞0.05）。見表1。

表1 受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原分布比較

418例受血者中Rh表型以CcDEe和CCDee為主，分別占比40.67%和37.32%；710例供血者中Rh表型以CCDee和CcDEe為主，分別占比43.80%和34.23%。受血者CcDEe表型分布比例高于供血者，供血者CCDee表型分布比例高于受血者，受、供者CcDEe和CCDee表型分布差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

2 供血者與相應受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容情況 710例供血者與相應受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原相合、相容和不相容例數(shù)分別為229例、237例和244例，比例分別為32.25%、33.38%和34.37%。244例供、受者不相容以cE雙抗原不合占比最高（50.00%），其余依次為Ce雙抗原、E抗原、c抗原、C抗原和e抗原不合，見表3。

表2 受、供者Rh（D、C、c、E、e）表型分布比較

表3 供血者與相應受血者Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容情況

3 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血的概率 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容的概率不同，ccDEE、ccDEe和CcDEE表型的受血者不相容性輸血概率較高，見表4。

4 輸注不同個數(shù)供者血液的受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血概率 418例輸注單個供者、兩個供者和多個供者血液的受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原相合（容）性輸血例數(shù)分別為143例、74例和24例，不相容性輸血例數(shù)分別為80例、71例和26例，輸注多個不同供者血液的受血者發(fā)生Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血的概率最高（P＜0.05），見表5。

表4 不同表型受血者Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血概率

表5 輸注不同個數(shù)供者血液的受血者與供血者Rh（D、C、c、E、e）匹配情況分析

討 論

Rh血型系統(tǒng)抗原是人類紅細胞抗原家族的重要成員之一，具有重要的臨床意義。不同人群Rh抗原的表達與分布不完全相同，了解Rh抗原的表達與分布情況對于患者臨床輸血治療具有重要的參考價值[10]。本結(jié)果顯示，418例受血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽性比例分別為99.52%、90.67%、62.68%、49.76%和93.30%，710例供血者中Rh（D、C、c、E、e）抗原陽性比例分別為99.30%、89.86%、55.63%、44.37%和93.52%，與江曉明[5]等的研究結(jié)果接近；受血者CcDEe表型比例高于供血者而供血者CCDee表型比例高于受血者，受血者輸注與自身Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性血液的可能性大，受血者受到異體抗原免疫刺激從而增加產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風險[11]。但是，本研究中受血者與供血者CcDEe和CCDee表型分布的差異可能與研究樣本量較少有關，后續(xù)我們將進一步增加研究樣本以做分析比較。

目前，我國《臨床輸血技術規(guī)范》[4]未要求常規(guī)檢測受、供者Rh（C、c、E、e）抗原，雖然受、供者交叉配血試驗相合，但受、供者之間Rh（D、C、c、E、e）抗原可能存在不相容，這無疑增加了受血者不相容性輸血的概率。本結(jié)果顯示，供血者與相應受血者之間Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容輸血的比例較高（244例/710例）；受血者中ccDEE、ccDEe和CcDEE表型者輸注供者血液時，發(fā)生抗原不相容性輸血的概率高。這主要是由于供血者C和e抗原陽性頻率高達89.86%和93.52%，因此C或e抗原陰性患者輸注相應抗原陽性供者血液的概率較高，從而增加受到異體抗原免疫刺激的可能，這與邱芳等的研究結(jié)論相近[12]。此外，本研究結(jié)果顯示，輸注單個、兩個或多個供者血液的受血者發(fā)生Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血的概率存在差異；受血者輸注多個供者的血液時，其Rh（D、C、c、E、e）不相容性輸血的概率最高，表明受血者在輸注多個供者的血液時更容易受到異體抗原的免疫刺激，產(chǎn)生相應的同種抗體[13，14]。

另外，本研究期間還遇到4例患者因不規(guī)則抗體陽性致交叉配血困難，經(jīng)抗體型特異性鑒定結(jié)果為3例抗-E、1例抗-cE。其中2例患者明確有輸血史，這可能因既往輸注了Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容的供者血液，進而刺激機體產(chǎn)生了不規(guī)則抗體。因此，Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容性輸血對患者具有潛在的風險，可能導致患者產(chǎn)生不規(guī)則抗體而無相容性血液可輸。上述4例患者通過檢測供血者Rh（D、C、c、E、e）抗原，選擇Rh表型一致且交叉配血相合的血液供患者輸注，均未發(fā)生輸血不良反應，血紅蛋白濃度得到有效提升。

綜上所述，受、供者Rh（D、C、c、E、e）抗原檢測在交叉配血試驗和臨床患者多次輸血治療中具有重要意義。實施Rh（D、C、c、E、e）相合性或相容性配血，一方面，可避免受血者輸注Rh（D、C、c、E、e）抗原不相容的血液，降低異體抗原對機體免疫刺激產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風險；另一方面，遇到因Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體致使交叉配血不合且需輸血的患者時，篩檢出Rh（D、C、c、E、e）表型相合或相容的供者血液，可有效縮短發(fā)血時間，提高患者血液輸注的安全性和有效性[15]。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突