探究烏司他丁對重癥急性胰腺炎患者炎癥因子表達的影響

許智利，金爽，吳章，楊寶華，林強康，陳新國，陳玲瓏

（溫州市人民醫院 急診醫學科，浙江 溫州 325000）

0 引言

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是一種常見的消化道疾病，其中重型急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）是當前臨床治療的難癥之一，因其累計多個臟器損傷并已嚴重危及人類生命，其占AP的5%～10%，病死率仍高達30%-50%[1]。因此，發病早期及時有效清除炎性介質是預防多器官功能衰竭的關鍵。故本研究通過臨床分析急性胰腺炎患者在經烏司他丁治療前和治療后外周血來源巨噬細胞的極化以及炎癥因子的表達情況，結合臨床治療效果以及實驗室檢查指標，為急性胰腺炎臨床分層治療提供理論依據，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究資料。選擇2018年1月至2020年12月于本院診治的40例急性胰腺炎患者，按隨機數字法將其均分為常規組（20例）和觀察組（20例）。其中常規組男13例，女7例；患者年齡26～76歲，平均（51.1±0.7）歲。觀察組男11例，女9例；患者年齡25～75歲，平均（50.3±0.6）歲。診斷標準按照《中國急性胰腺炎診治指南（2013年，上海）》[2]，收集患者的實驗室檢查結果。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法。常規組患者予以常規治療，主要方法為禁食禁水，胃腸減壓，充分補充液體，平衡體內電解質，應用抗生素避免感染，解痙止痛，防止胰腺外分泌和胰酶抑制劑生長抑素，H2受體拮抗劑或質子泵抑制劑。觀察組患者在常規組治療基礎上予以烏司他丁10萬U溶于50 g/L葡萄糖溶液250 mL內靜脈滴注，每8小時1次，輸液速度為25 lag/h，持續5 d，病情改善后用量減半繼續治療5 d。共治療10 d。

1.3 觀察指標及判定標準。①用無EDTA的膠原酶細胞消化細胞后，用生理鹽水清洗2次，加入100 ul PBS懸浮后，各加入5 ul的FITC-CD163、PE-CD11c和Cy2-CD206熒光抗體，避光染色15 min后，加入400 ulPBS混勻，上機檢測，統計各組細胞的比例。②收集貼壁的巨噬細胞，加入Trizol后并按照試劑說明書抽提總RNA，核酸-蛋白測定儀分析RNA的濃度以及純度，按照cDNA合成試劑盒說明書操作程序，PCR儀上合成cDNA，檢測IL-1β、IRF-5、TNF-α、NF-kB、IL-10等基因mRNA水平。

1.4 統計學分析。采用統計學軟件（SPSS 20.0版本）進行數據分析，對本研究中所得的巨噬細胞免疫表型以及相關炎癥因子的表達情況等計量資料（t）以及治療效果等計數資料（χ2）分別進行對比，用（±s）、%分別表示，若P＜0.05，則表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療前后CD11c、CD206、CD163表達量比較。本研究結果顯示，兩組患者治療前CD11c、CD206、CD163表達量比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；與治療前相比，兩組患者治療5 d、10 d后CD11c、CD206、CD163表達量均有所提高，但觀察組低于常規組，兩組比較差異明顯有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組治療前后IL-1β、IRF-5、TNF-α、NF-kB、IL-10等基因mRNA水平比較。本研究結果顯示，兩組患者治療前IL-1β、IRF-5、TNF-α、NF-kB、IL-10等基因mRNA水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；與治療前相比，兩組患者治療5 d、10 d后IL-1β、IRF-5、TNF-α水平有所下降，而IL-10、NF-kB水平有所提高，且觀察組均優于常規組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表1 兩組治療前后CD11c、CD206、CD163表達量情況（±s）

表1 兩組治療前后CD11c、CD206、CD163表達量情況（±s）

注：與治療前相比，＊P＜0.05；與對照組相比，#P＜0.05。

組別 例數 CD11c CD206 CD163 CD11c CD206 CD163 CD11c CD206 CD163治療前 治療5 d 治療10 d常規組 20 20.89±10.57 60.43±5.16 63.08±3.2 46.89±2.43 73.79±4.81 95.56±1.76 68.57±2.59 76.63±9.34 97.59±2.18觀察組 20 21.16±11.16 60.42±5.17 62.76±3.1 44.72±2.41 70.61±6.90 91.92±1.73 63.93±1.75 74.57±9.48 96.26±2.48

表2 兩組治療前后基因mRNA水平情況（±s）

表2 兩組治療前后基因mRNA水平情況（±s）

注：與治療前相比，＊P＜0.05；與對照組相比，#P＜0.05。

組別 例數 觀察組 常規組治療前 治療5 d 治療10 d 治療前 治療5 d 治療10 d IL-1β 20 213.56±85.62 195.62±56.11 183.54±37.51 214.36±86.62 211.87±57.34 196.26±39.56 IRF-5 20 95.43±12.35 52.62±7.65 46.38±6.52 94.98±13.35 68.27±8.31 54.83±5.16 TNF-α 20 71.51±16.81 59.56±13.25 40.36±11.25 70.22±15.57 68.79±12.59 55.38±12.64 NF-kB 20 83.98±7.63 93.56±8.63 175.65±10.23 84.96±7.21 86.39±9.52 96.58±7.61 IL-10 20 44.59±6.13 59.68±9.74 88.65±12.51 45.13±6.12 48.05±8.26 72.58±7.55

3 討論

急性胰腺炎是一種常見的疾病，特別是重型胰腺炎具有高致死率，盡管烏司他丁聯合其他藥物治療急性胰腺炎具有一定的治療效果，但是是否影響巨噬細胞的極化尚未見報道。在巨噬細胞的極化過程中，受相關的調節因子的調控，研究發現IRF-5在M2巨噬細胞中高表達，通過抑制IRF-5的表達可以逆轉胰腺炎模型中肺巨噬細胞的極化[3]。TNF-α、IL-1β、IL-6和MCP-1等前炎癥因子和DAMP分子的大量產生和釋放是SAP從胰腺局部病變迅速發展為全身炎癥反應綜合征和多器官功能障礙綜合征的主要因素[4]。烏司他丁作為一種從人尿中提取精制的糖蛋白，含有143個氨基酸，屬蛋白酶抑制劑，能夠同時抑制胰蛋白酶、磷脂酶 A、透明質酸酶及彈性蛋白酶等多種水解酶的活性；另外還可以穩定溶酶體膜，具有抑制溶酶體酶和心肌抑制因子（MDF）的釋放、清除氧自由基及抑制炎癥介質釋放的作用。本研究結果顯示，烏司他丁誘導的DC表型中CD11c、CD206、CD163表達量均有所提高，但觀察組低于對照組（P＜0.05），表明對巨噬細胞免疫有一定作用。同時烏司他丁對DC細胞因子IL-1β、IRF-5、TNF-α、IL-10、NF-kB水平均有所影響，表現為DC分泌IL-1β、IRF-5、TNF-α能力明顯受抑制，IL-10、NF-kB能力明顯受刺激。因此烏司他丁在抑制和刺激DC成熟方面具有一定作用。

綜上所述，巨噬細胞的活化在重型胰腺炎的發生發展過程中有著重要的作用，過抑制疾病早期的巨噬細胞活化可能成為抑制疾病進展的重要靶點，具有較高的應用意義。