食管鱗癌患者腫瘤干細胞標志物CD133、Musashi-1的表達及臨床意義

周 虹，錢金鋒

（南通市第一人民醫(yī)院病理科，江蘇 南通 226001）

食管癌是一種發(fā)病率較高的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。全世界每年約有30 萬人死于食管癌。我國是食管癌的高發(fā)國家之一。有報道稱，我國每年新發(fā)食管癌患者的數(shù)量和死亡食管癌患者的數(shù)量占全球一半以上[1]。此病的病理類型有鱗狀細胞癌（鱗癌）、腺癌、小細胞癌、大細胞癌、腺鱗癌、未分化癌等，其中鱗癌和腺癌較為多見。近年來的研究表明，惡性腫瘤作為一類異質(zhì)性疾病，主要是由不同的細胞亞群構(gòu)成，且不同細胞亞群的成瘤能力、對抗癌藥物的敏感性及侵襲能力等差異顯著。作為惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的基礎(chǔ)，腫瘤干細胞具有無限增殖及更新的能力，它也是導致腫瘤細胞耐藥、復發(fā)及轉(zhuǎn)移的重要因素。CD133 是一種獨特的腫瘤干細胞標志物。既往的研究發(fā)現(xiàn)，CD133 與血液系統(tǒng)惡性腫瘤、消化系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[2]。Musashi-1 是一種神經(jīng)RNA 結(jié)合蛋白，其在早期的成體神經(jīng)干細胞中有一定的表達。本文主要是探討食管鱗癌患者腫瘤干細胞標志物CD133、Musashi-1 的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018 年1 月至2019 年12 月期間我院收治的68例食管鱗癌患者作為研究對象。其納入標準是：病情經(jīng)病理學檢查得到確診[3]；了解本研究的方法、目的及相關(guān)的注意事項；病歷資料完整。其排除標準是：存在嚴重的心、肝、腎、腦等器官功能障礙；合并有精神疾病或其他惡性腫瘤；存在溝通障礙或認知功能障礙；處于妊娠期或哺乳期。在這68 例患者中，有男性患者53 例，女性患者15 例；其年齡為47 ～84 歲，平均年齡為（67.92±4.85）歲；其中，腫瘤病理分期為Ⅰ期的患者有21 例，為Ⅱ期的患者有23 例，為Ⅲ期的患者有14 例，為Ⅳ期的患者有10 例。

1.2 方法

1.2.1 試劑 抗人CD133 單克隆抗體（由上海撫生實業(yè)有限公司生產(chǎn)），鼠抗人Musashi-1 單克隆抗體（由青島捷世康生物科技有限公司生產(chǎn)），檢測試劑盒（由上海瑞楚生物科技有限公司生產(chǎn)）。

1.2.2 檢測方法 在這68 例患者入院后，分別采集其食管鱗癌組織、癌旁黏膜增生組織及正常食管黏膜組織，然后采用免疫組織化學二步法檢測這三類組織中腫瘤干細胞標志物CD133 和Musashi-1 的表達水平，并計算其陽性表達率。

1.3 觀察指標

比較這68 例患者食管鱗癌組織、癌旁黏膜增生組織及正常食管黏膜組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率。比較這68 例患者中不同病理分期的患者食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率。

1.4 統(tǒng)計學方法

用SPSS 20.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，用t檢驗，計數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 這68 例患者不同組織中CD133 及Musashi-1 的陽性表達率

這68 例患者正常食管黏膜組織中CD133 和Musashi-1的陽性表達率均低于其癌旁黏膜增生組織和食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 這68 例患者不同組織中CD133 及Musashi-1 的陽性表達率[%（例）]

2.2 這68 例患者中不同病理分期的患者食管鱗癌組織中CD133及Musashi-1 的陽性表達率

在這68 例患者中，Ⅳ期食管鱗癌患者食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率均高于Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期食管鱗癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；Ⅲ期食管鱗癌患者食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率均高于Ⅰ期、Ⅱ期食管鱗癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；Ⅱ期食管鱗癌患者食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率均高于Ⅰ期食管鱗癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 這68 例患者中不同病理分期的患者食管鱗癌組織中CD133 及Musashi-1 的陽性表達率[%（例）]

3 討論

食管癌是指發(fā)生于食管上皮細胞的惡性腫瘤。早期食管癌患者的癥狀不明顯，診斷其病情的難度較大。多數(shù)食管癌患者的病情在得到確診時已發(fā)展至中晚期，對其進行治療的難度較大，其預后較差。食管癌的病理類型有鱗癌、腺癌、小細胞癌、大細胞癌等，其中鱗癌和腺癌較為多見。臨床研究表明，人體的正常干細胞具有反饋調(diào)節(jié)機制，在細胞的新老更替中起到維持平衡的作用，且其具備基因保護功能，能避免DNA 錯誤積累、復制現(xiàn)象的發(fā)生。與正常干細胞相比，腫瘤干細胞不僅能完成自我更新及增殖，還具備分化成熟能力，具有完整的自我調(diào)節(jié)、自我更新的信號路徑。隨著腫瘤干細胞自我更新頻率的加快，惡性腫瘤進展的速度會進一步提升。CDl33 是一種分子質(zhì)量為120 kDa 的跨膜蛋白，屬于Prominin 家族成員之一，有兩個同源性抗原CDl33.1 和CDl33.2。CDl33 是由865 個氨基酸組成的5 次跨膜糖蛋白，基因定位于4p15.32，它是造血干細胞、血液腫瘤和內(nèi)皮祖細胞的傳統(tǒng)標志物[4]。CDl33.1可選擇性地在骨髓和外周血的造血干細胞、內(nèi)皮祖細胞中表達，但其在成熟的內(nèi)皮細胞中無表達。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，CDl33.1 在胎腦及成年人的骨骼肌中有一定的表達。CDl33.2 主要集中于胎肝和胎腎中，成年人的肝腎系統(tǒng)及胰腺中無CD133.1 表達。CDl33+ 細胞具有多向分化的潛能。有研究證實，CDl33+ 細胞在不同的培養(yǎng)條件下可分化為心肌細胞、內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞和成骨細胞等。Musashi-1 是一種RNA 結(jié)合蛋白，包括362 個氨基酸，其N 端存在2 個保守的RNA 結(jié)合區(qū)[5]。Musashi-1 在神經(jīng)元前體細胞及膠質(zhì)前體細胞中有一定的表達。有學者研究Musashi-1 在小鼠神經(jīng)系統(tǒng)中的表達，發(fā)現(xiàn)Musashi-1 可作為小鼠神經(jīng)干細胞的分子標記物。有研究發(fā)現(xiàn)，Musashi-1 是正常干細胞累積突變的結(jié)果，其在惡性腫瘤的形成中具有一定的促進作用，可將其作為腫瘤干細胞的作用靶點。

本研究的結(jié)果顯示，食管鱗癌患者癌旁黏膜增生組織和食管鱗癌組織中腫瘤干細胞標志物CD133 和Musashi-1的陽性表達率較高，且此病患者食管鱗癌組織中CD133 和Musashi-1 的陽性表達率與其腫瘤的病理分期呈正相關(guān)。