新疆生產建設兵團第十師羊小反芻獸疫抗體監測與評價

李 軍，黃佐興，李 偉，侯小林，黃 新，張 賓，韓猛立，吳桐忠*

（1.新疆生產建設兵團第十師北屯市畜牧獸醫工作站，新疆 北屯836000；2.新疆農墾科學院/省部共建綿羊遺傳改良與健康養殖國家重點實驗室，新疆 石河子832000）

小反芻獸疫（Peste des petits ruminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（Peste des petits ruminants virus，PPRV）感染小型反芻動物如山羊、綿羊導致的一種以發熱、腹瀉、口炎、肺炎為主要臨床特征的急性烈性接觸性傳染病[1，2]。PPR的發病率和病死率分別高達100%和90%[3]，世界動物衛生組織（OIE）將其列為法定報告動物疫病，我國則將其列為一類動物疫病，世界糧農組織將其列為緊急預防系統規劃的重點疾病[4]。據報道，該病自1942年于西非的科特迪瓦被首次發現以來[5]，目前已蔓延至亞洲、中東和非洲等全球70多個國家，致使超過17億只山羊和綿羊（占全球總量的80%）處于嚴重威脅狀態下[6，7]。PPR自2007年傳入我國西藏阿里地區，并被迅速控制撲滅，至2013年底開始，又在我國多個省份爆發[8]，2014年我國農業農村部（原農業部）將其列為強制免疫病種。

為了進一步了解2017-2020年第十師北屯市（以下簡稱師市）PPR免疫抗體水平，評估師市轄區內PPR的防疫效果，也為了檢驗師市政府購買重大動物疫病免疫的實踐成效，查漏補缺，為今后繼續擴大政府購買服務的范圍，確保服務質量，處理好政府、第三方服務機構、服務對象之間的關系，明確責權利，提供參考依據。

1 材料方法

1.1 樣品來源

多數樣品采集于2018-2020年每年集中的春秋防疫結束后25～40 d，采取配額抽樣與隨機抽樣相結合的方法進行，確保樣品的代表性和覆蓋性；少數樣品為定點檢測時采集。采樣時按照師市畜牧獸醫工作站統一制作的采樣單和采樣要求進行。共采集來自師市所屬8個單位的4 010份有效血清樣本（詳見表1）。

表1 師市各單位不同年份血清樣本采集數據 份

1.2 疫苗試劑

小反芻獸疫活疫苗為政府統一采購自天康生物股份有限公司產品，小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒產自青島立見診斷技術發展中心。

1.3 儀器耗材

酶標儀、洗板機、離心機、微量移液器、恒溫培養箱、微型振蕩器、超純水儀等。

1.4 檢測方法

嚴格按照小反畜獸疫ELISA檢測試劑盒說明書對血清樣品進行檢測，具體步驟如下：

對照孔每孔依次加入50μL PPR陽性、陰性血清，稀釋液（酶標單抗對照），各做2個平行。樣品孔每孔加入25μL樣品稀釋液和25μL待測血清樣品，輕振混勻（勿溢出），37℃孵育60 min。

每孔加入300μL洗滌液1×，洗板4次，拍干，每孔加入50μL酶標抗體，37℃孵育30 min。

每孔加入300μL洗滌液1×，洗板4次，拍干，每孔加入50μL底物溶液，室溫避光反應15 min。

每孔加入50μL的終止液，測定450 nm波長處的OD值。

1.5 結果判斷

操作和結果判斷嚴格按照試劑盒說明書進行；陽性血清抑制率即PIPC＞60，陰性血清抑制率即PINC＜40，實驗結果有效；否則重新進行試驗；樣品抑制率PIs＞50，結果為陽性；PIs≤50，結果為陰性。樣品合格率達70%以上為合格單位（社/戶），（注：個體（表觀）免疫合格率（AP）=個體免疫合格數/檢測樣品總數×100%，群體（表觀）免疫合格率（HAP）=免疫合格場數/檢測場數×100%）。

2 檢測結果

2.1 總體情況

本次調查涉及八個單位四年來采集的4 010份樣品，抗體合格率為84.69%（3 396/4 010），符合國家防疫要求。具體每個單位檢測合格率依次為A 84.20%（1 103/1 310），B 82.08%（435/530），C 82.56%（355/430），D 76.11%（137/180），E 87.22%（157/180），F 84.12%（143/170），G 86.45%（268/310），H 88.67%（798/900）；高于平均合格率的有三家單位，分別是E、G、H，其中H單位的合格率最高，D單位的合格率最低。

2.2 年份統計

按照不同年份對8個單位的抗體檢測結果（見表2）進行統計分析。結果表明2017年各單位合格率為85.22%（865/1 015），2018年為79.13%（819/1 035），2019年為87.18%（911/1 045），2020年為87.65%（802/915），其中2018年最低，2020年最高。

表2 不同年份各單位小反芻獸疫抗體檢測情況 份

2.3 類別統計

按照不同年份合作社和養殖大戶的抗體檢測結果（見表3）進行統計分析。結果表明養殖合作社的抗體合格率為84.81%（1 340/1 580），略高于養殖大戶的84.65%（2 057/2 430），差異不顯著（P＞0.05），均接近于平均合格率84.69%（3 396/4 010）。

表3 不同年份各養殖合作社和大戶小反芻獸疫抗體檢測情況份

3 討論分析

從小反芻獸疫抗體檢測整體情況來看，2017-2020年師市轄區內整體免疫血清抗體合格率為84.69%（3 396/4 010），符合國家農業農村部的相關要求。

從各單位檢測情況來看，各單位之間的抗體檢測結果參差不齊，且抗體合格率最高的H單位為88.67%（798/900），較最低的D單位76.11%（137/180）高出近12.00%。利用IBM spss25.0軟件分析，結果顯示8個單位分為兩個大組A、B、C、D和E、F、G、H，差異極顯著（P＜0.01）（如表2所示）。從不同年份檢測情況來看，除2019年和2020年檢測結果差異不顯著（P＞0.05）外，其余年份之間差異均極顯著（P＜0.01）（如表3所示）。從不同類別統計結果小反芻獸疫抗體群間分布來看，養殖合作社和養殖大戶之間的差異不顯著（P＞0.05），整體水平趨于一致。

此次小反芻獸疫抗體檢測結果與疆內外其他地區的差異不大，免疫抗體合格率均在70.00%以上，如2019年哈密市伊州區小反芻獸疫抗體檢測的總體合格率為80.16%（楊嫻靜等[9]）；2017-2019年河南省羊群小反芻獸疫抗體檢測的個體合格率為83.23%，平均場群合格率為86.75%（趙勝杰等[10]）；2017年、2018年榆林市橫山區小反芻獸疫抗體檢測的合格率分別為87.93%、90.12%（魯印國等[11]）；2017-2019年山西全省小反芻獸疫免疫抗體平均個體和群體合格率分別為82.96%、81.19%（王治維等[12]），云南西雙版納州規模養殖場和散養戶羊小反芻獸疫免疫抗體合格率分別為74.44%、81.98%（閆曉霞等[13]）等。各地檢測的結果顯示PPR免疫抗體合格率雖有差異，但均高于國家農業農村部要求最低標準（70.0%），表明我國目前的小反芻獸疫免疫防控效果較好，為下一步開展PPR凈化工作奠定了堅實的基礎。

對以上結果進行分析，首先可能與各單位重視程度有直接關系，導致各單位防疫結果出現較大差距；其次可能與2018年防疫行業部門組織管理形式調整有關，2019年開始實施政府購買重大動物疫病防疫工作服務，由第三方機構來承擔具體的防疫工作，職能部門做好監督檢驗，從防疫結果來看，達到了預期的效果，具備推廣的基礎和價值；最后從合作社和養殖大戶檢測結果來看，體現出師市轄區內防疫水平和防疫意識沒有差異，具有普遍性，間接地體現出廣大養殖戶和防疫人員對重大動物疫病防控思想上重視、行動上認真與落實上不打折扣。

存在的不足是此次統計單位、年份和類別之間跨度較大，統計數據分析的還不夠細致，如春季和秋季防疫、城郊區和邊境區、養殖合作社和養殖大戶的數量等，在今后的工作中加以改進。還有一點值得關注，就是關于重大動物疫病師市動物防疫部門只做血清抗體檢測，未做相對應的病原學檢測，如后續條件允許可開展相關工作。

4 結論

第十師北屯市轄區內8個單位的羊小反芻獸疫免疫抗體檢測結果顯示不同年份、單位之間雖有波動，但均達到了國家農業農村部規定的標準，且養殖合作社與養殖大戶免疫抗體合格率之間差異不顯著，但部分單位仍需提高認識，狠抓落實，以便進一步提高免疫合格率。還有一點，此次對檢測結果的統計分析表明，師市轄區內重大動物疫病免疫形式已由以前的政府全程負責順利過渡到政府履行防疫主體責任、職能部門負責監督監管、第三方專業機構承擔具體防疫任務與服務，呈現權責明晰，任務具體，效果顯著的市場化運作狀態，為進一步拓寬畜牧獸醫行業市場化服務奠定了基礎和提供了實踐先例。