花生籽仁抗黃曲霉菌生理生化機制研究進展

柴芃沛，韓鎖義，崔夢杰，郭俊佳，黃冰艷，董文召，張新友

（河南省作物分子育種研究院/鄭州大學研究生培訓和科研基地/國家生物育種產業創新中心/農業部黃淮海油料作物重點實驗室/河南省油料作物遺傳改良重點實驗室，鄭州 450002）

0 引言

花生(ArachishypogaeaL.)含有大量的油脂和蛋白質等營養物質，在食用植物油和休閑食品消費中占有舉足輕重的地位[1-2]。受到黃曲霉菌侵染的花生會在籽仁中產生強致癌性的黃曲霉毒素，能夠誘導突變，抑制免疫功能，引起肝臟疾病甚至急性中毒，是目前自然界中已知的對人類健康危害最大的生物毒素之一，影響花生的食用安全，嚴重危害人類健康[3-5]。截止目前，已經鑒定出20余種黃曲霉毒素的同分異構體，最為常見的有 B1、B2、G1、G2四種，其中黃曲霉毒素 B1是分布最廣，毒性最強的，被國際癌癥研究機構定為一級致癌物質，也常被用作檢測糧食及各種糧制品中黃曲霉毒素含量的重要指標[6]。黃曲霉毒素是由黃曲霉(A.flavus)等曲霉屬真菌產生的一類含二氫呋喃環和氧雜萘鄰酮的次級代謝產物，黃曲霉菌(AspergillusflavusL.)是一種常見的兼性腐生真菌，廣泛存在于土壤、空氣以及發霉的糧制品中。黃曲霉菌在土壤中以菌核及分生孢子的形式存在，在植物細胞中以菌絲的形式存在。菌核能夠抵御不良生態環境，在高溫或干旱等惡劣環境條件下存活；當條件適當時，菌核能夠產生大量分生孢子或子囊孢子，起到傳播和再侵染的作用[7]。

花生由于其地上開花、地下結果的特性，花生莢果長期與土壤微生物接觸，在受到干旱等不良環境或被地下害蟲蠐螬、白蟻等侵襲時，極易受到黃曲霉毒素的污染。近年來，隨著花生種植面積的不斷擴大，這一風險在局部地區進一步增加。同時，花生產后干燥、儲存、運輸及加工等各個生產環節的任何過程都有受到黃曲霉毒素污染的可能[8-9]。

由于黃曲霉毒素危害的嚴重性，世界各國對此非常重視，在農產品國際貿易中黃曲霉毒素的限量標準也很嚴格。多國已設立黃曲霉毒素最大殘留限量，其中歐盟的標準最為嚴格，要求花生及其制品中AFB1的含量不超過2 μg/kg，黃曲霉毒素總含量不超過4 μg/kg[10]。黃曲霉毒素污染的因素有很多，可以通過在花生生長后期防治干旱脅迫、收獲后快速干燥等方法進行防治，但是依然不能完全控制黃曲霉毒素污染問題的發生[11]。因此，培育和大面積推廣能夠抵抗黃曲霉菌侵染和抑制毒素產生的花生品種是解決花生黃曲霉毒素污染問題的理想途徑，在品種創制的基礎研究中，花生抵御黃曲霉菌侵染和產毒的生理生化機制是重要內容。本文主要針對花生籽仁在抗黃曲霉菌侵染及產毒過程中生理生化物質的變化情況，對花生抗黃曲霉菌侵染和產毒的機制予以討論，旨在為未來花生籽仁抗黃曲霉菌侵染研究指明方向。

1 花生籽仁中抵抗黃曲霉侵染和產毒的物質

花生籽仁中抵抗黃曲霉侵染和產毒的物質從化學組成上，可以大體分為兩類：植物多酚和抗菌蛋白。其中多酚類物質包括白藜蘆醇、單寧、類黃酮等，抗菌蛋白包括病程相關蛋白、防御素、2S清蛋白、蛋白酶抑制劑、熱激蛋白、溶蛋白等。

1.1 多酚類物質

多酚類物質廣泛存在于各種植物當中，并且很多都具有抗菌作用。研究表明，多酚類物質能夠通過調節細胞色素P450的功能來抑制AFB1-DNA加合物的形成[12]。從花生籽仁中提取出的總多酚類物質也能夠抑制黃曲霉菌的生長和黃曲霉毒素的合成[13]。

1.1.1 白藜蘆醇 白藜蘆醇(Resveratrol)化學名為3,5,4’-三羥基-反-二苯乙烯(3,5,4-trihydroxysitlbene)，是一種含有芪類結構的非黃酮類多酚化合物[14]。白藜蘆醇及其衍生物具有抗菌、抗癌、調節人體代謝等多種功能。在植物中，其還具有抗真菌的生物學特性，是一種重要的植物抗毒素。研究認為，白藜蘆醇是花生受到黃曲霉菌侵染時產生的一種主動抗性物質，其誘導生成的速度與花生籽仁的抗性相關，并以此提出花生接種黃曲霉菌后白藜蘆醇及其衍生物的含量可以作為篩選花生抗黃曲霉品種的重要生化指標[15]。Wang等[16]研究發現花生種子中白藜蘆醇含量與抗產毒水平呈顯著正相關，而且在培養基條件下白藜蘆醇對黃曲霉毒素的生物合成具有顯著抑制作用。研究發現白藜蘆醇能抑制黃曲霉毒素合成基因簇中的關鍵基因aflR的表達，從而抑制黃曲霉毒素的合成[17]。以白藜蘆醇為基本單元氧化合成的聚合體稱為其衍生物或芪化物。除白藜蘆醇外，花生種子中還含有種類豐富的芪化物，目前，從被黃曲霉菌侵染的花生種子當中已經分離出20余種，其中很多都具有與白藜蘆醇相似的生物學特性，具有抑制黃曲霉菌分生孢子的產生和黃曲霉毒素合成的生物功能[18-21]。

1.1.2 單寧 單寧又稱單寧酸或鞣質、植物鞣質，是一類廣泛存在于植物體內的多元酚化合物。植物單寧具有抗菌和抗氧化功能，并且被認為其具有預防癌癥的功能[22]。單寧對多種微生物都是有毒的，它能有效地抵抗細菌對植物的侵染，也能抑制大多數真菌的繁殖[23-25]。從高粱中分離獲得的單寧可以顯著抑制細菌、霉菌、酵母菌的生長[26]。此外，研究表明單寧對不同真菌的抑制具有不同的機制，可以通過抑制真菌纖維素酶和果膠酶的活性來抵抗真菌對植物的侵染[27]，也可以通過破壞微生物的膜轉運蛋白來抑制微生物侵染[28]。目前已有研究證明指狀青霉細胞壁上存在單寧酸的作用位點[29]?；ㄉt衣中含有數量可觀的單寧[30]，從而使其具有抗菌和抗氧化的功能。從花生紅衣和子葉中提取的粗單寧可以有效抑制黃曲霉分生孢子的形成[31-32]。并且，花生單寧不止與黃曲霉菌在花生籽仁中的定殖相關，而且還能抑制寄生曲霉菌中黃曲霉毒素的合成[33]。

1.1.3 類黃酮 黃酮類化合物是一類重要的植物次級代謝產物，也是一種天然色素，因多呈黃色而被稱為生物類黃酮。至今已發現近萬種類黃酮物質，幾乎存在于所有具有維管的植物中[34]。植物類黃酮具有抗菌和抗氧化等活性，還能在體外抑制黃曲霉毒素的毒性[35]。在植物體內，類黃酮物質可能參與激素、活性氧、轉錄因子調控等信號轉導途徑[36]，并且可以參與到植物與病原體的互作中[37]。研究表明，類黃酮物質的合成受到WRKY轉錄因子的刺激，在抗感品種中存在一定差異[38]，在玉米中，WRKY基因家族也是抵抗黃曲霉侵染的重要部分[39]。但花生受到黃曲霉菌侵染時，WRKY基因家族的大部分成員的表達量也會迅速上調[40]。很多類黃酮物質都具有抗真菌的特性，例如山柰酚、槲皮素、花青素等[41]。有研究表明，一定濃度的槲皮素在培養基中能顯著抑制黃曲霉菌的生長甚至殺死黃曲霉菌[42]。花生種皮中的花青素及其前體物質也能抑制黃曲霉菌絲的生長和毒素的合成[43]?；ㄉN子中還含有5,7-二甲氧異黃酮，其在培養基中也能抑制黃曲霉菌的生長[44]。

1.2 抗菌蛋白

自然環境中的植物隨時會受到各種病原菌的侵染，因生存競爭的需要，植物自身常產生一些物質來與外源侵襲物對抗，植物抗真菌蛋白就是其中的一類，它們可抑制真菌生長甚至殺死真菌。根據植物抗真菌蛋白的作用機制、結構和序列特性，可將其大體分為以下幾類：病程相關蛋白(pathogenesis-related proteins，PRs)、防御素(defensins)、2S清蛋白(2s albumin proteins)、蛋白酶抑制劑(protease inhibitors)、熱激蛋白(heat shock proteins)、溶蛋白及其他蛋白等[45]。

1.2.1 病程相關蛋白 在植物自然衰老期間出現的少量蛋白或傷口誘發產生的大量蛋白常伴隨著對病原菌的反應，也稱病程相關蛋白[46]。病程相關蛋白具有多種生物學活性，包括幾丁質酶、β-1,3-葡聚糖酶、過氧化氫酶、溶菌酶等。幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶是病程相關蛋白中重要的兩種水解酶，在植物抵抗真菌侵染的過程中發揮著重要作用[47]。幾丁質是真菌細胞壁的主要成分，當病原菌侵染植物時，幾丁質酶會在被侵染的部位累積，起到分解真菌細胞壁的作用，從而抑制真菌的生長與繁殖。與幾丁質酶功能類似，β-1,3-葡聚糖酶能夠水解β-1,3-葡聚糖和β-1,3-1,6-葡聚糖，這兩種葡聚糖也是真菌細胞壁的重要組成部分。幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶在植物抵抗病原菌侵染時通常協同起作用，兩種酶同時存在時的抑菌活性遠高于單種酶的抑菌活性[48]。研究表明，玉米種子在受到黃曲霉菌侵染后會產生這兩種酶來達到抵抗黃曲霉菌侵染的作用[49]。在轉基因實驗中，不論是轉入了幾丁質酶基因還是β-1,3-葡聚糖酶基因的花生，都能夠抵抗黃曲霉菌的侵染，侵染率可以降低到10%以下[50-51]?；ㄉ陨淼牟〕滔嚓P蛋白也具有水解酶活性，并且在花生抵抗黃曲霉菌侵染過程中發揮著一定作用[52]。Liang等[53]從花生中克隆出β-1,3-葡聚糖酶基因，并轉入花生植株當中，發現其對真菌病原體的抗性也有所增強。

PR10蛋白是PR蛋白家族當中的重要成員之一，也是研究較多的病程相關蛋白之一。目前已經發現17個家族的PR蛋白，其中大部分都是定位在細胞外或者細胞內的囊泡當中，只有PR10蛋白定位在細胞質內[54]。PR10蛋白呈酸性，長度16k～19kDa，缺少信號肽，在生物脅迫和非生物脅迫中都發揮作用，并且和蛋白酶有較大區別[55]。Chadha等[56]從花生中克隆出PR10蛋白并證明了其核酸酶活性及抗真菌作用。使用RNAi技術沉默玉米種子中的PR10基因會顯著加快黃曲霉菌菌絲的生長，并且在沉默系中，黃曲霉毒素的累積量更高[57]。通過微陣列技術，發現并證明了PR10基因的表達與花生抗黃曲霉毒素污染相關[58-59]。在花生PR10基因的過表達系中，受到黃曲霉侵染后的侵染率也遠遠小于正常品種[60]。

1.2.2 防御素 植物防御素，是一類分子量小、呈堿性、具有半胱氨酸保守結構域以及復雜三維折疊結構的短肽，一般由45～54個氨基酸組成，在微摩爾濃度下就能起到廣譜的抑菌作用，并抑制多數植物病原菌的生長，尤其是絲狀真菌。大部分植物防御素都在細胞內合成并且具有信號肽序列，被分泌到胞外空間發揮作用，在宿主防御系統中發揮著重要作用[61]。不同植物防御素類型及氨基酸組成雖有所不同，但其三維結構大多相似[62]。植物防御素抵御真菌侵染的作用已經有較多報道，但關于防御素的作用機理目前有兩種主流的假說，第一種是防御素與病原細胞細胞膜上的負電荷相互作用，破壞病原細胞的細胞膜，從而導致病原菌細胞壞死[63]；另一種假說則認為防御素不會破壞細胞膜，而是與磷脂相互作用，從而改變膜透性，破壞細胞內環境，從而導致病原菌細胞死亡[64]?？傊?，植物防御素抵抗真菌的能力是通過作用于細胞膜，改變膜透性來達到的。從苜蓿中克隆出的防御素基因能夠顯著抑制黃萎病菌的生長[65]。轉入芥菜防御素基因的花生植株對葉斑病具有較強的抗性[66]。轉入MtDef4和MtDef5基因的花生抗黃曲霉侵染能力顯著增強[67]。李萬福等[68-69]研究發現花生防御素基因過表達系幾乎不受黃曲霉菌的侵染，將花生籽仁切開后，直接向籽仁中接種黃曲霉菌，花生籽仁仍未受到過多的黃曲霉菌侵染。

1.2.3 2S清蛋白 花生種子中存在3種貯藏蛋白：arachin，coarachin I和coarachin II（2S清蛋白）?；ㄉ?S清蛋白在65%～85%硫酸銨溶液中沉淀，占花生中總可溶性蛋白質的約20%[70]。在植物體內，2S清蛋白不止是一種貯藏蛋白，其還具有酶抑制劑、抗真菌、鈣調蛋白拮抗劑等多種作用[71]。從胡蘿卜中提取出的2S清蛋白在高濃度的情況下能夠抑制一部分病原真菌的生長[72]。油菜、芝麻等種子中的2S清蛋白已被證實在體外具有抗真菌活性[73-74]?；ㄉN子中的2S清蛋白同樣具有一定的抑菌活性，Duan等[75]從花生中分離純化出2S清蛋白，并發現其和其它抗菌肽相似，氨基酸序列中富含谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸。經過分離純化后的花生2S清蛋白在體外能夠有效抑制黃曲霉菌菌絲的生長和孢子的形成。

1.2.4 蛋白酶抑制劑 蛋白酶抑制劑是一類分子量較小的多肽或蛋白，普遍存在與豆科、茄科、禾本科及十字花科等植物種子當中，能與蛋白酶活性部位或變構部位結合抑制酶的催化活性或阻止酶原轉化為有活性的酶，在調節蛋白酶活性和蛋白質代謝等方面起重要作用[76]。在黃曲霉菌侵染作物種子的時候，需要分泌胞外角質酶來降解表皮的角質，分泌彈性蛋白酶來降解組織中的彈性蛋白，分泌α-淀粉酶降解碳水化合物，從而獲得其生長和增殖所需的碳源和氨基酸[77-79]。研究發現，抗黃曲霉侵染的玉米種子中胰蛋白酶抑制劑的含量遠高于感病品種[79]，其能夠抑制真菌α-淀粉酶的活性，從而阻止孢子萌發[80]，而α-淀粉酶分解產生的還原性糖還是黃曲霉毒素合成的主要誘導者[81]。從大豆中分離出的胰蛋白酶抑制劑能顯著抑制黃曲霉菌α-淀粉酶和部分蛋白酶的活性，從而抑制黃曲霉毒素的合成和黃曲霉菌的生長[82]。梁炫強等[83]發現從花生種子中分離純化的胰蛋白酶抑制劑能在體外顯著抑制黃曲霉孢子的萌發和菌絲的生長，并且發現花生種子中的胰蛋白酶抑制劑活性高低與品種抗黃曲霉侵染能力相關。

1.2.5 熱激蛋白 熱激蛋白又稱熱休克蛋白，分子量為10k～200 kD，幾乎存在于所有生物體內，且高度保守[84]。正常條件下熱激蛋白在體內含量較低，但當到不良條件刺激時，會大量合成，因此也被稱為逆境誘導蛋白。熱激蛋白含有一個被稱為“heat-shock”的結構域，能夠在植物受到生物或非生物脅迫時作為分子伴侶發揮作用[85]。研究表明，當植物受到病原菌侵害時，熱激蛋白能夠調節R蛋白的結構和穩定性，從而達到調節植物防御系統的作用[86]。Baldeep等[87]認為熱激蛋白可作為一種真菌抑制劑被應用到生產中。在花生抗黃曲霉侵染的轉錄組研究中，熱激蛋白基因均為關鍵基因[87-90]。

1.2.6 溶蛋白及其他蛋白 由于干旱是導致花生黃曲霉污染的重要因素之一，當花生受到干旱脅迫且被黃曲霉菌侵染時，籽仁中會發現溶蛋白的存在[91]。Waraluk等[92]研究發現花生中溶蛋白與黃曲霉抗性相關，在培養基中，溶蛋白能夠顯著抑制黃曲霉菌的生長。另外，類親環素蛋白(cyclophilin-like proteins)、核糖體失活蛋白(ribosome-inactivating proteins，RIPs)、脂質轉運蛋白(1ipid-transfer proteins，LTPs)等蛋白的研究表明也可以抑制真菌生長或殺死真菌[45]。

2 被黃曲霉菌侵染時相關酶活性的變化

在植物抵抗病原菌侵染的過程中，會伴隨著大量酶活性的變化，除了之前提到的能直接作用于病原菌的幾丁質酶和葡聚糖酶以外，還有很多與植物和病原菌互作相關的酶。其中，有兩種酶活性常被用來評價植株的抗性，分別為苯丙烷類代謝途徑相關酶以及與活性氧代謝相關酶。

2.1 苯丙烷類代謝酶活性

植物體內苯丙烷類代謝途徑已闡明，反式肉桂酸、阿魏酸、香豆酸等是該途徑的中間產物，這些物質可進一步轉化成類黃酮與木質素等[93]。香豆酸和肉桂酸能夠抑制P450單加氧酶，而該酶可以被黃曲霉菌利用產生黃曲霉毒素[94]。阿魏酸在體外條件下被證明具有高度的抑菌活性，能夠有效抑制黃曲霉孢子的形成[95]。木質素作為植物體內一種重要的物理抗菌物質，能夠沉積于細胞壁上而作為結構屏障，加固細胞壁，保護細胞免受病原菌的侵染[96]。類黃酮和酚類物質具有清除體內自由基的作用，是植物抵抗病原菌侵染的重要成分。

除此之外，苯丙烷類代謝途徑還與水楊酸(SA)合成相關。水楊酸是植物系統獲得性抗性的重要組成部分。苯丙氨酸在經肉桂酸、苯甲酸等中間代謝產物，最終可以合成水楊酸。當植物受到病原菌入侵時，在植物入侵部位會發生過敏反應(HR)，導致植物被侵染部位局部壞死，從而阻斷病原菌。之后經過一系列信號轉導，引發植物對病原物的廣譜抗性，稱為系統獲得性抗性。水楊酸是系統獲得性抗性中最重要的調控因子。首先，SA可以調節HR反應。在缺少HR基因的突變體中，會有較高水平的SA產生；在缺少SA基因的突變體中，HR反應會增強[97-98]，這說明SA或其代謝產物可以調節HR反應和細胞死亡。其次，SA可以調控下游病程相關蛋白基因的表達，從而增強植物的抗真菌能力。有研究表明，SA處理能夠增強植物中幾丁質酶和β-1,3-葡聚糖酶以及苯丙氨酸解氨酶等的活性，從而增強植物的抗真菌能力[99-100]。除此之外，SA還具有誘導植物中抗氧化酶活性增強的作用[101]。

苯丙烷類代謝途徑中，苯丙氨酸解氨酶(PAL)是該途徑的限速酶，同時，該途徑還包括多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)等。梁炫強等[103]測定了抗感差異花生在受黃曲霉菌侵染后苯丙烷類代謝途徑中相關酶的活性，發現抗病品種中PPO和PAL活性的提高速度高于感病品種，其中PAL的變化幅度更是遠高于感病品種。同時其還測定了木質素的含量，發現感染7天后木質素的含量與品種的平均感染率呈顯著負相關，即抗性越強的品種木質素含量越高。朱敦瑋等[104]也測定了苯丙烷類代謝途徑中相關酶的活性，驗證了前人的研究結果，還發現在抗病品種中黃酮類物質的含量遠高于感病品種。Nandini等[105]測定了水楊酸及其它苯丙烷類代謝途徑相關酶的活性和產物的含量，發現受黃曲霉菌侵染后，水楊酸和該途徑中的PAL、POD酶活性均呈現上升趨勢，水楊酸調控的β-1,3-葡聚糖酶活性也大幅提高。苯丙烷類代謝途徑的終產物之一木質素的含量也比未侵染時大幅提高。在花生抗黃曲霉侵染的轉錄組研究中，也發現抗病品種PAL基因的表達比感病品種更早且表達量更高[90]。這些結果都表明，抗病品種在受黃曲霉侵染后苯丙烷類代謝途徑能夠迅速反應，產生足量的酚類化合物、木質素等以抵御黃曲霉菌的侵染。

2.2 活性氧代謝相關酶活性

活性氧是泛指那些含有氧原子但較氧具有更活潑化學反應性的某些代謝物及其衍生物。植物體內的活性氧主要有超氧自由基、過氧化氫、羥自由基等，其參與膜質過氧化、細胞壁木質化和蛋白聚合，具有直接殺死病原菌和啟動植物過敏反應等功能[106]。當植物受到病原菌侵染時，會迅速產生和積累活性氧，一方面直接殺死病原菌或抑制病原菌生長，另一方面，活性氧的局部爆發可以引發植物細胞壞死，從而阻斷病原菌繼續入侵[107]。同時，活性氧也有促進細胞壁木質化及調控部分抗病相關基因表達的作用。

植物體內與活性氧代謝相關的酶包括脂氧合酶(LOX)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)等。超氧化物歧化酶和過氧化氫酶能夠清除植物體內的活性氧，從而抑制過敏反應。脂氧合酶則是參與到不飽和脂肪酸代謝途徑中，部分代謝物能有效抑制真菌的生長和毒素合成，例如9S-HPODE[108]，也有部分能誘導植物啟動體內逆境脅迫基因的表達，調節一系列防御反應，例如茉莉酸甲酯(MEJA)，與水楊酸類似，都能誘導啟動植物體內蛋白酶抑制劑和類黃酮合成酶等病原相關蛋白基因的表達，使植物獲得系統抗性。有研究表明，經MEJA處理過的棉花、開心果的黃曲霉毒素污染水平顯著降低[109-110]。

梁炫強等[111]對抗感花生活性氧相關生理指標的測定發現抗病品種中LOX活性迅速提高，同時產生大量活性氧，但活性氧清除酶SOD和CAT活性的變化不明顯，而感病品種正好相反，SOD和CAT活性迅速升高，體內的活性氧累積量較少，并且在其結果中丙二醛濃度也發生了很大變化，丙二醛是判斷膜質過氧化的重要指標，可以推測出活性氧可能是破壞細胞膜，導致細胞壞死，從而阻斷了黃曲霉菌的侵染。這些結果表明活性氧的累積在花生抗黃曲霉菌侵染的過程中起著重要作用。

3 展望

近年來，隨著生產的不斷擴大，部分區域花生收獲、運輸和貯藏等條件難以保證，從而導致花生的黃曲霉毒素污染問題日益嚴重。花生抵抗黃曲霉菌侵染的生理生化機制研究對于解決花生黃曲霉毒素污染具有重大意義。目前，已有的研究表明，在黃曲霉菌侵染花生種子的過程中，花生自身的部分成分和花生防御系統共同發揮作用，其中，花生種皮中的多酚類物質，例如黃酮類和單寧等，率先發揮抵御作用。溶蛋白和2S清蛋白等花生種子中的貯藏蛋白和其它內含物也部分具有抗菌作用。在防御過程中，還有植物抗毒素基因及抗菌蛋白基因的表達，如白藜蘆醇合酶、幾丁質酶、類黃酮合成基因等。JA和SA信號通路也在花生防御系統中發揮著重要作用?；钚匝醮x、脂肪酸代謝、苯丙烷類代謝途徑的相關酶類都在花生抵抗黃曲霉侵染的過程中協同發揮著重要作用。

近年來，雖然花生抗黃曲霉菌生理生化成分的變化與抗性相關基因表達模式已基本清晰，但是仍存在很多問題。第一，花生中各個抗性成分在抵抗黃曲霉菌侵染中的具體作用尚不清楚，目前已知的很多成分有些只能抑制寄生曲霉，有些只能抑制黃曲霉，這些成分對曲霉菌的作用機理尚不清楚；第二，由于花生真實的生長環境是復雜的，會受到地上及地下生物和非生物等各種脅迫因素的影響，這些外部因素都有可能影響花生對黃曲霉菌的抗性，其具體的影響程度尚不清楚；第三，植物與病原菌的互作是一個復雜的過程，其中有部分物質可以被植物和病原菌共同利用，這也為研究花生籽仁中各個成分對黃曲霉的抗性機制增加了難度。

隨著多組學技術的發展與應用，預期花生抗黃曲霉機制研究在未來主要集中在以下幾個方面：（1）通過對花生抗黃曲霉物質的分離、驗證及檢測，了解各個組分的作用；（2）通過對不同環境花生黃曲霉抗性的檢測，進一步探究環境因素對花生黃曲霉抗性的影響；（3）不斷深化各組學技術間的融合，強化多學科交叉融合意識并積極創新，進一步揭示花生與黃曲霉相互作用的機制。