陜北地區巨菌草在七彩山雞飼料中的應用研究

鄧新為，羅 娜，孫志宏,2*，劉 夏

(1.延安大學 生命科學學院，陜西 延安 716000；2.陜西省區域生物資源保育與利用工程技術研究中心，陜西 延安 716000)

七彩山雞(Phasianuscolchicus)，別稱野雞，因其羽毛色彩斑斕，故名為七彩山雞[1]。七彩山雞除了具有觀賞價值和經濟價值外，還具有補氣生血、滋肝腎、提神補腦及治多種慢性病等功效，含有多種人體必需的氨基酸、微量元素及維生素等成分，營養價值極高，對人體健康具有極好的功效[2-3]。

巨菌草(Pennisetumgiganteum)原產于非洲。目前，延安市已在巨菌草選育栽培、收割、飼料化利用等方面取得了一定的成就[4]。巨菌草作為一種高價值、低成本、產量高、粗蛋白和糖分含量高的植物，發展巨菌草業已經成為目前的潮流與趨勢[5-6]。

我國目前飼料種類繁多，大都以豆粕、玉米、麩皮等為主，延安市養殖業對牧草的添加和引用更是缺乏，篩選優質牧草和飼料作物是目前研究方向的一種新趨勢。通過在飼料中引用優質牧草，實現優質飼料的生產供應，對提高食草性畜禽的健康發展十分重要[7]。楊旭暉等[8]為了評定青貯巨菌草飼喂價值，利用青貯巨菌草與青貯全株玉米、青貯飼用甜高粱進行了飼喂育肥牛、羊對比試驗，研究表明青貯飼料適口性較好，對羊的增重效果好且差異顯著。李海燕等[9]利用巨菌草作為飼糧飼喂白絨山羊，對其生產性能和生長發育起著一定的促進作用，且經濟成本較低。由前人已取得的成果可見，利用巨菌草作為飼糧，在降低成本、增加動物產量、拓寬飼糧資源方面有著巨大的開發前景[10-12]。巨菌草在飼料領域的使用是否對動物腸道微生物產生影響，目前未見報道。因此，本研究選用七彩山雞為研究對象，采用巨菌草替代七彩山雞日糧中麩皮的含量，探討不同添加水平的巨菌草對七彩山雞免疫器官指數、血液生理生化指標及腸道消化酶活性的影響，以進一步探討添加巨菌草飼料飼養畜禽的應用價值。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

巨菌草采自延安大學萃園校區科研基地，待植株生長到3 m左右，進行收割，風干打碎，測定巨菌草營養成分見表1。七彩山雞飼養于延安大學萃園校區科研基地。

表1 巨菌草營養成分

1.2 試驗設計

本研究采用單因素設計，選取同批次、健康、日齡30 d、初始體重為(0.184±0.012)kg的七彩山雞150只，隨機分為5組，即1個對照組、4個試驗組，每組3個重復，每個重復10只。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組按照質量比例在基礎飼糧中添加4%、8%、12%、16%的巨菌草以替代麩皮，即T1、T2、T3和T4組。飼糧配比參照《雞營養標準》(NY/T 33—2004)，根據試驗實際情況進行調整。試驗飼糧制成顆粒形狀飼喂，飼糧組成見表2，試驗期為112 d。

表2 試驗日糧組成及營養水平(干物質基礎)

1.3 飼養管理

試驗在延安大學萃園校區科研基地進行，采用立體重疊3層籠養方式，自由采食和進水。22 d時第1次注射雞瘟疫苗，65～95 d時注射雞瘟疫苗和禽霍亂疫苗。試驗期內對雞舍定期打掃衛生，保持通風，并定期作消毒處理，保證飼養環境的清潔。

1.4 樣品采集與制備

于試驗第106～112 d進行消化能代謝試驗，每日下午定時收集當日全部新鮮糞樣(去除糞樣中羽毛、皮屑、飼料等雜物)，混合后取20%放入自封袋內，置于4℃冰箱保存，最后將5 d收集的糞樣于65℃烘箱中烘干，用小型粉碎機粉碎過40目篩，密封保存并做好標記，供指標測定用。

于試驗第111 d下午18時起試驗雞禁食，12 h后個體稱重，并從每個重復選取9只接近平均體重的肉雞，翅靜脈采血5 mL，采用翅靜脈采血法[13]采血，注入真空采血管中。采血后的雞即進行屠宰，解剖并摘取胸腺、脾臟、法氏囊，并取雞十二指腸腸道內容物，-20℃冰箱保存。

1.5 指標測定

1.5.1 消化能

在第106～112 d階段5 d的采糞期，采用全收糞法代謝試驗測定消化能。

1.5.2 血液生理生化指標

采用DIRUI600全自動生化分析儀測定血液中白細胞計數、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、紅細胞計數、平均紅細胞血紅蛋白量、血小板計數、平均血小板體積、總蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶、乳酸脫氫酶、血清甘油三酯。

1.5.3 免疫器官指標

試驗雞屠宰后，解剖并摘取胸腺、脾臟、法氏囊，除去血液后稱重。免疫器官指數采用公式計算：免疫器官指數(mg/g)=免疫器官重(mg)/雞活重(g)。

1.5.4 消化酶活性

將-20℃下保存的十二指腸內容物，未解凍前用分析天平稱重，按照質量體積比為1:1加入4℃的生理鹽水，低溫下勻漿30 s后用低溫離心機在4℃條件下2500 r/min、離心10 min，取上清液若干等份，消化酶活性采用試劑盒(南京建成生物有限公司)測定。測定酶為十二指腸淀粉酶、脂肪酶。

1.6 數據統計分析

試驗數據采用SPSS 25.0和 Microsoft Excel 2019 進行統計處理分析。各處理組采用單因素ANOVA分析，差異顯著時采用Duncan氏法進行多重比較，數據均采用平均值±標準差表示。P<0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 巨菌草對七彩山雞血液生理生化指標的影響

由表3可知，與對照組相比，添加不同水平巨菌草的飼料對七彩山雞的紅細胞計數、平均紅細胞血紅蛋白量、血小板計數、平均血小板體積、總蛋白、白蛋白、丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶、乳酸脫氫酶、血清甘油三酯均無顯著性影響。與對照組相比，僅T3組雞血液中的白細胞計數、中性粒細胞百分比顯著性提高，但其淋巴細胞百分比顯著降低。綜合來看，在飼料中添加較多巨菌草對七彩山雞血液中的免疫指標有較顯著的影響。

表3 巨菌草對七彩山雞血液生理生化指標的影響

2.2 巨菌草對七彩山雞免疫器官指數的影響

由表4可見，與對照組相比，T3組雞的脾臟指數、胸腺指數顯著增大，T1、T2、T4組雞未達到顯著性差異；T1、T2、T3組雞的法氏囊指數與對照組相比有顯著性差異，T3組雞的法氏囊指數最大；綜合結果來看，T3組中添加巨菌草對七彩山雞的免疫器官指數影響較好。

表4 巨菌草對七彩山雞免疫器官指數的影響

2.3 巨菌草對七彩山雞消化酶活性的影響

根據表5可知，與對照組相比，隨著巨菌草添加比例的升高，T1、T2、T3、T4組雞的十二指腸淀粉酶活性顯著提高，分別增加了2.12%、4.52%、5.58%、7.71%；十二指腸脂肪酶活性達到了顯著性差異，T2、T3、T4組雞的脂肪酶活性均隨著巨菌草添加比例的提高而顯著性降低，T1組雞的十二指腸脂肪酶較對照組活性有所降低。

表5 巨菌草對七彩山雞十二指腸消化酶活性的影響

3 討 論

3.1 巨菌草對七彩山雞血液生理生化指標的影響

血液是機體的重要組成部分，各組織與細胞間的交換必須依賴于血液流動來完成，血液也有維持內環境穩態的作用[14]。血液的生理生化指標會隨著內外環境的變化而變化，如營養水平和外界環境等因素，其變化可反映機體的生長狀況，也可反映動物健康狀況[15-17]。血液生化指標可反映機體營養代謝情況和各組織器官功能，也可間接反映了機體的生長性能[18-19]。白細胞計數、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比在血液的細胞免疫系統中起著十分重要的作用[20]。本研究中，添加12%巨菌草水平與對照組相比，白細胞計數、中性粒細胞百分比顯著提高，淋巴細胞百分比顯著降低，表明巨菌草在一定程度上提高了七彩山雞的免疫功能。添加巨菌草的試驗組丙氨酸氨基轉移酶活性與對照相比雖無明顯差異，但活性卻明顯增加，研究表明丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶活性高低可反映蛋白質合成和分解的能力[21]。與對照組相比，試驗組雞血液中的總蛋白、白蛋白含量有所提高，其中，T3組雞的血液中總蛋白、白蛋白高于對照組和其他試驗組。夏信山等[22]研究報道總蛋白、白蛋白含量的增加可反映豬的消化吸收增強，蛋白質代謝加強，免疫能力提高。史卉玲等[23]研究表明，添加苜蓿后飼糧中蛋白質水平增高，為奶牛瘤胃中微生物合成蛋白質提供了充足的氮源，從而促進了血清總蛋白、白蛋白的增加。飼糧中添加巨菌草后蛋白水平增高，促進七彩山雞的消化吸收與機體的蛋白質水平，改善七彩山雞的免疫能力，促進其健康生長，這與雷曉軍等[24]研究中草藥飼糧添加劑對肉仔雞血液生化指標中總蛋白、白蛋白含量增加增強機體免疫力的結果一致。飼糧中添加巨菌草后，增加了七彩山雞對飼糧的吸收與利用，進而促進新陳代謝，增強機體的免疫能力。

3.2 巨菌草對七彩山雞免疫器官及免疫功能的影響

器官指數可在一定程度上反映機體的功能強弱與受損狀況。脾臟、胸腺、法氏囊作為七彩山雞的主要免疫器官，其發育狀況影響機體的免疫應答水平與免疫防御功能，免疫器官指數的增加和降低可表明機體的體液免疫與細胞免疫的能力[25]。有研究表明免疫器官指數的增加可間接表明機體的健康狀況[26-27]。本試驗中T3組雞的器官指數均顯著高于對照組，且優于其他試驗組。崔玉銘等[28]人研究表明蛋白質和氨基酸是動物機體免疫系統的基本組成物質，飼糧中的蛋白質可以保障機體維持正常免疫功能。胡永娜[29]研究表明飼糧中菜籽粕可刺激肉仔雞的免疫應答反應，促進肉仔雞免疫器官的發育，增強肉仔雞的免疫功能。王娟娟等[30]研究表明，飼料中添加蛋白質對雞的免疫器官指數有顯著性影響。本試驗中，巨菌草作為一種高蛋白的營養物質加入飼糧后，提高了飼糧的蛋白質含量，增強了七彩山雞的正常免疫應答水平，促進機體免疫應答反應的能力，提高免疫器官的重量，進而增強七彩山雞的免疫功能水平。由此可見，巨菌草對七彩山雞的代謝及免疫功能具有一定的促進作用，在機體免疫反應中起著至關重要的作用。

3.3 巨菌草對七彩山雞消化酶活性的影響

動物消化食物的方式主要分為機械性消化和化學性消化。七彩山雞主要以消化酶進行化學性消化，因此相關的腸道消化酶可作為動物消化利用營養物質的首要工具，在一定程度上反映機體的消化能力，消化酶的變化可間接反應機體的消化能力[31-32]。與對照組相比，T1、T2、T3、T4組雞的十二指腸淀粉酶活性均達到了顯著性差異，T2、T3、T4組雞的十二指腸脂肪酶活性顯著增加。加入較高比例巨菌草替代部分麩皮可改變機體的淀粉酶活性，一定程度上促進七彩山雞對淀粉的吸收與轉化，改善新陳代謝與能量轉化。殷海成等[33]研究中提到消化酶活性受眾多環境因素的影響，提高飼糧中的纖維含量，可促進唾液、胃酸、胃液的分泌，提高胰液的分泌量，加入巨菌草后，飼糧中纖維含量明顯增加，可能對酶活性的改變起了一定的促進作用。巨菌草在8%比例以上，均能提高消化酶和脂肪酶活性，可能是因為飼糧中較高的纖維含量增加了腸道絨毛高度與寬度，促進飼糧在腸道中的消化與吸收，增強七彩山雞對營養物質的轉化，提高動物機體的消化吸收能力。但隨著巨菌草比例的不斷增加，脂肪酶與淀粉酶活性增加的幅度逐漸變低，說明七彩山雞對巨菌草飼糧的吸收具有一定限制。

4 結 論

在七彩山雞日糧中，添加不同比例的巨菌草對其血液生理生化指標有一定的改善作用，同時也可以顯著提高七彩山雞的免疫功能，增強七彩山雞十二指腸脂肪酶和淀粉酶的活性，從而促進七彩山雞對飼糧中營養物質的消化、吸收與代謝。添加巨菌草比例為12%可替代麩皮，其對七彩山雞的各項指標改善效果最好，建議在陜北地區推廣使用。