胃癌中TIP30 表達及其臨床病理特征的Meta 分析

寇瑞龍，劉祎皓，冉福林，龔藝貞，王振冉，菅志遠

(桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院胃腸外科，廣西 桂林 541001)

0 引言

胃癌是世界上常見惡性腫瘤之一，男性發(fā)病率在各種腫瘤中居第4 位，死亡率居第3 位；女性發(fā)病率在各類腫瘤中居第7位，死亡率排名第5 位[1]。胃癌的發(fā)生與發(fā)展是多因素綜合作用的結果。Tat 結合蛋白30(Tat interactive protein 30，TIP30)是臨床上所公認的一種抑癌基因，在腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程中有著重要的作用[2]。TIP30 蛋白的表達狀態(tài)與腫瘤患者的預后密切相關，其在多種腫瘤組織中處于缺失或低表達的狀態(tài)[3-4]。近年來，針對TIP30 表達與胃癌及其臨床病理特征之間的關系，國內外學者開展了眾多研究，但研究質量參差不齊且結論存在爭議。有研究結果顯示：胃癌中，性別、年齡、腫瘤直徑等臨床病理特征與TIP30 的表達無關，而TNM 分期、分化程度和淋巴結轉移與TIP30 蛋白的表達有密切關系[11-12]。也有研究結果顯示：胃癌的分化程度與TIP30 的表達無關[7.9.10]。還有研究結果顯示TIP30 的表達與胃癌的浸潤深度、淋巴結轉移無關[8]。此外，尚存在爭議的地方還有胃癌不同臨床分期、組織學分級及分類中的TIP30 的表達水平。鑒于此，本研究旨在系統(tǒng)評價相關研究結果，旨在明確TIP30 在胃癌患者不同臨床特征中的表達是否有差異，從而對腫瘤的篩查、早期診治和預后判斷提供新的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標準

1.1.1 納入標準

①研究設計：國內外公開發(fā)表的并提供病例組和對照組的詳細原始數(shù)據(jù)的有關TIP30 表達與胃癌及其臨床特征關系的病例對照研究。僅限中、英文文種。②研究對象：所有病例取材前均未接受放化療，且均有完整臨床病理資料。對照組組織均經過病檢未發(fā)現(xiàn)癌細胞。病例與對照均無年齡、性別與種族限制。③檢測方法：TIP30 的檢測方法全部采用免疫組化。④各文獻所研究的結局指標及研究方法相似。⑤結局指標：按照納入文獻數(shù)據(jù)計算比值比(oddsratio，OR)與 95%可信區(qū)間(confidence interval，CI)。

1.1.2 排除標準

①未明確提供病例及對照來源；②病例診斷標準不統(tǒng)一；③TIP30 的檢測方法為非免疫組化法；④無法利用的文獻：如數(shù)據(jù)雷同、重復報告、質量較差等；⑤動物實驗、綜述或摘要。

1.2 檢索策略

計算機檢索如下各數(shù)據(jù)庫：PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of science、CNKI、VIP、WanFang Data 和CBM，并對參考文獻進行追溯，收集公開發(fā)表在國內外各大數(shù)據(jù)庫的有關TIP30 表達與胃癌及其臨床特征關系的全部病例對照研究，從建庫至2020 年3 月7 日為檢索時間范圍。檢索方式用主題詞加自由詞。中文檢索詞包括Tat 結合蛋白30、TIP30、CC3、HTATIP2、胃癌、胃腫瘤；英文檢索詞包括 TIP30、CC3、HTATIP2、stomach neoplasms 等。以 PubMed 數(shù)據(jù)庫為例，具體檢索策略見框 1。

框1 PubMed 檢索策略

1.3 納入文獻篩選及資料提取

2 名作者獨立閱讀文章標題、摘要及全文，并進行資料提取。提取資料內容包括：編號、作者、發(fā)表年限、原始文獻出處、年齡、性別、樣本量、TIP30 陽性判定標準、胃癌及其浸潤深度、淋巴結轉移、組織學分級、組織類型及臨床分期等。

1.4 文獻質量評價

根據(jù)非隨機研究偏倚風險評估方法(Newcastle-Ottawa Quality Assessment Scale，NOS)[5]評估納入研究的文獻質量。NOS總共9 分?！? 分提示該研究的質量好。具體包括：(1) Selection(①病例確定是否恰當；②病例的代表性；③對照的選擇；④對照的定義；各1 分，共4 分)；(2) Comparability(⑤A/B，基于設計和分析所得的病例和對照的可比性；2 分)；(3) Outcome(⑥暴露因素的確定；⑦病例和對照的暴露是否采用了相同的確定方法；⑧無應答率；各1 分，共3 分)。得分越高，代表質量越高。若遇分歧則兩名作者討論解決，或咨詢第三位作者意見。最終達成一致。

1.5 統(tǒng)計分析

運用 RevMan5.3 軟件進行Meta 分析，計算 TIP30 表達陽性與 GC 不同病理特征間聯(lián)系程度的優(yōu)勢比(odds ratio，OR)及95%可信區(qū)間(confidence ceinterval，CI)作為效應量。進行異質性檢驗采用Q 檢驗，檢驗水準為α=0.1。若P≥0.1 且I2≤50%，各研究結果間無統(tǒng)計學異質性，采用固定效應模型進行Meta 分析；若P＜0.1 但I2＜50%，說明各研究結果間存在低度異質性，采用固定效應模型進行Meta 分析；若P＜0.1 且I2＞50%，說明各研究結果間具有較大異質性，需探討異質性的來源：進行敏感分析或者亞組分析，或采用隨機效應模型進行Meta 分析；若異質性過大，則行描述性分析。效應分析有統(tǒng)計學意義的標準為P≤0.05。

2 結果

2.1 文獻篩選流程及結果

文獻篩選流程及結果見圖1。共 360 篇相關文獻從各數(shù)據(jù)庫被檢索出，經逐步篩選后，最終納入了7個病例對照研究[6-12]。

2.2 納入研究的基本特征和文獻質量評價結果

所納研究中，共包含456 例胃癌患者癌組織、371 例癌旁正常組織。表1 為納入研究的基本特征，表2 為所納入文獻的方法學質量評價結果。

圖1 文獻篩選流程圖及結果

表1 納入研究的基本特征

表2 納入研究的方法學質量評價

圖2 胃癌組與癌旁正常組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

圖3 胃癌高中分化組與低分化組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

2.3 Meta 分析結果

2.3.1 胃癌組與癌旁正常組

共納入7 項研究[6-12]報告了TIP30 在胃癌組與癌旁正常組中的表達，其中胃癌組456 例，癌旁正常組371 例。異質性檢驗結果為(P=0.40，I2=4%)，可采用固定效應模型對Meta 結果進行分析，胃癌組的TIP30 表達低于癌旁正常組，其差異有統(tǒng)計學意[OR=0.16，95%CI(0.12，0.23)，P＜0.00001]，提示TIP30 低表達增加了胃癌的發(fā)病風險(圖2)。

2.3.2 胃癌高中分化組與低分化組

納入6 個研究[7-12]報告了TIP30 在胃癌不同組織分級中的表達，其中高中分化組和低分化組分別是151 例和199 例。異質性檢驗結果為(P=0.008，I2=68%)(見圖3)，從圖3 可以清晰看到，研究結果存在明顯異質性，I2＞50%，因此，繼續(xù)進行敏感性分析，得到朱逸憨2013 是成異質性的主要原因，刪除之后，再次進行meta 分析，異質性檢驗結果為(P=0.10，I2=48%).結果如圖4 顯示：胃癌高中分化組的TIP30 表達高于胃癌低分化組，其差異有統(tǒng)計學意義[OR=2.24，95%CI(1.38，3.62)，P＜0.001]。提示TIP30 表達水平與胃癌不同組織分級相關。

2.3.3 胃癌伴淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組

共6 項研究[7-12]報告了TIP30 在胃癌伴淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組中的表達，例數(shù)分別為223 例和127 例。異質性檢驗結果為(P=0.40，I2=3%)，采用固定效應模型分析，胃癌伴淋巴結轉移組TIP30 表達低于無淋巴結轉移組，其差異有統(tǒng)計學意義[OR=0.23，95%CI(0.14，0.37)，P＜0.00001]，提示TIP30 表達水平與胃癌淋巴結轉移相關(圖5)。

2.3.4 胃癌漿膜以內浸潤組與漿膜以外浸潤組

共4 個研究[7.8.11.12]報告了TIP30 在胃癌不同浸潤深度中的表達，其中漿膜以內浸潤組和漿膜以外浸潤組例數(shù)分別為92 例，166 例。異質性檢驗結果為(P=0.49，I2=0%)，可采用固定效應模型對Meta 結果進行分析，浸潤深度為胃癌漿膜以內的TIP30 表達高于漿膜以外浸潤組，其差異有統(tǒng)計學意義[OR=3.34，95%CI(1.92，5.81)，P＜0.0001]，提示TIP30 表達水平與腫瘤浸潤深度相關(圖6)。

圖4 胃癌高中分化組與低分化組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

圖5 胃癌伴淋巴結轉移組與無淋巴結轉移組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

圖6 胃癌漿膜以內浸潤組與漿膜以外浸潤組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

圖7 胃癌TNM 分期I-II 期組與III-IV 期組 TIP30 表達比較的 Meta 分析

圖8 胃癌不同性別之間 TIP30 表達比較的 Meta 分析

2.3.5 胃癌TNM 分期，I-II 期組與III-IV 期組

共納入6 個研究[6-10.12]報告了TIP30 在胃癌不同分期中的表達，其中I-II 期組162 例，III-IV 期組249 例。異質性檢驗結果為(P=0.14，I2=39%)，采用固定效應模型分析，I-II 期組的TIP30 表達高于III-IV 期組，其差異有統(tǒng)計學意義[OR=4.32，95%CI(2.82，6.63)，P＜0.00001]，提示TIP30 表達水平與腫瘤分期相關(圖7)。

2.3.6 不同性別胃癌的TIP30 的表達

共7 個研究[6-12]報告了TIP30 在胃癌不同性別中的表達，其中胃癌男性組 318 例，胃癌女性組 138 例。異質性檢驗結果為(P=0.88，I2=0%)，采用固定效應模型分析，不同性別胃癌患者之間 TIP30 表達無明顯差異[OR=1.23，95%CI(0.82，1.85)，P=0.32] (圖 8)。

2.3.7 不同年齡胃癌的TIP30 的表達

共5 個研究[7,8,10-12]報告了TIP30 在胃癌不同年齡(＜60 歲、≥60 歲)組中的表達，其中胃癌年齡＜60 歲組146 例，胃癌年齡≥60 歲組152 例。異質性檢驗結果為(P=0.22，I2=30%)，采用固定效應模型分析，胃癌年齡＜60 歲組與≥60 歲組之間 的TIP30 表 達 無 明 顯 差 異[OR=0.72，95%CI(0.45，1.15)，P=0.17](圖9)。

圖9 胃癌不同年齡之間 TIP30 表達比較的 Meta 分析

3 討論

TIP30 基因，又稱CC3 或HTATIP2，CC3 與小細胞肺癌轉移抑制相關，是由美國學者Shtivelman 等[13]首先在1997 年利用RNA 差異顯示技術發(fā)現(xiàn)的一種基因。TIP30 是由國外學者xiao 等[14]于1998 年命名而來，其分子量為30KD，與人類免疫缺陷病毒(HIV)的體外轉錄有關。序列分析發(fā)現(xiàn)TIP30 與CC3 為同一蛋白，故稱為TIP30/CC3 基因[13]。TIP30 基因廣泛表達于正常人體的多種器官中，如：心、腦、肺、腎、肌肉、骨骼、胰腺等。但在許多腫瘤細胞中表達卻顯著下降，說明TIP30 基因表達和腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關[15]。因此，對TIP30 的表達進行檢測可能有助于對腫瘤的篩查、早期診治和預后判斷。

國內外眾多研究[16-23]發(fā)現(xiàn)，TIP30/CC3 基因的表達缺失與腎癌、胰腺癌、前列腺癌、喉癌、肝癌、膀胱癌、肺癌、膽囊癌、鼻咽癌、乳腺癌、上頜竇鱗癌、腺樣囊性癌、神經膠質瘤等的轉移呈正相關。劉慶偉等[24]最新報告提示，與正常胃黏膜組織比較，TIP30 在胃癌中的表達較正常組織降低，差異有統(tǒng)計學意義。提示TIP30 表達降低參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展過程。本 Meta 分析結果也顯示：胃癌組的TIP30 表達明顯低于癌旁正常對照組，提示TIP30 低表達增加了胃癌的發(fā)病風險，其表達可能與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關。我們進一步分析各項臨床特征后發(fā)現(xiàn)，TIP30 表達水平與胃癌患者的性別和年齡的相關性無統(tǒng)計學意義，而與淋巴結轉移與否、 腫瘤的組織學分級、TNM 分期及浸潤深度呈負相關性。我們推斷TIP30 檢測有可能作為胃癌早期篩查和預后判斷的一項輔助診斷指標。

本文也存在一些不足：(1)納入的相關文獻較少，樣本量不足，未檢索到可納入的歐美國家相關研究。(2)個別統(tǒng)計指標所納入的文獻異質性較大。(3)納入的文獻中僅有個別文獻研究TIP30 表達水平與組織學分型或者預后關系，因此本研究未能報道TIP30 表達水平與組織學分型、預后等結局指標的相關性?？傊琓IP30 蛋白的表達與胃癌不同臨床病理特征有顯著相關性。Meta 分析將隨著檢測水平的提高和之后樣本量的增大對此作出更準確的評價，以期更好的對臨床應用進行指導。