4 413例包頭地區女性高危宮頸人乳頭瘤狀病毒(hrHPV)基因型的流行病學研究

王興宇，胡 海，張 晶

(1.內蒙古科技大學包頭醫學院基礎醫學與法醫學院，內蒙古 包頭 014040；2.包頭市中心醫院)

宮頸癌在低收入國家中是第二常見的診斷性癌癥，同時也是引起女性死亡的三大癌癥之一[1]。高危人乳頭狀瘤病毒(hrHPV)的持續感染是高級宮頸上皮內瘤變(CIN2/3)和浸潤性宮頸癌(ICC)發展的必要因素[2]。迄今為止，超過170種基因型可感染肛門上皮細胞，其中有12個基因型因其致癌潛力高而被列為是“高危型”[3]。HPV16和HPV18是眾所周知的致癌基因型，另外HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68型也與宮頸癌的發生有密切關系[3-4]。

目前，hrHPV測試法被作為檢查未知意義的非典型鱗狀細胞(ASCUS)結果或與臨床實踐的宮頸細胞學聯合的一種額外方法[5-6]。最近，美國食品和藥物管理局(FDA)批準將hrHPV測試作為初步篩查的方法，這些檢測使用HPV16和HPV18基因分型以及其他12種hrHPV基因型組成的混合型[7]。除HPV篩查方案外，HPV疫苗接種也已被證明是一種針對HPV感染的有效方案，近期已在大多數國家實行。然而在內蒙古包頭地區尚未進行該疫苗接種的計劃。

高危HPV基因型在世界范圍內非常普遍，HPV基因型因地理區域而異，性傳播HPV可能導致宮頸癌的發生[8]。本研究可為包頭地區的HPV篩查奠定基礎。

1 對象與方法

1.1研究人群 2015年4月至2017年7月，共有4 413名女性到包頭市中心醫院進行HPV檢測，年齡16～91歲，平均年齡43.1歲。根據美國癌癥協會的宮頸癌篩查指南，將研究人群分為11組。本研究得到本院醫學倫理審查委員會批準。參與者均簽訂了知情同意書。在本院完成的數據收集過程中保證了保密性。本研究匿名分析數據。

1.2樣本采集 采用亞能生物技術(深圳)有限公司生產的宮頸脫落細胞采集器(宮頸刷)進行采樣。由婦科醫生對標本進行采集，取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉4～5周以獲得足量的上皮細胞標本，然后將宮頸刷頭部放入細胞保存液管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊管蓋，做好標本標識，登記編號后送檢。標本一經采集，當日送檢；標本室溫保存<12 h，2～8 ℃保存<7 d，-20 ℃以下保存<3個月。避免反復凍融。

1.3儀器與試劑 儀器選用BD公司Step One Plus Real-Time PCR儀進行基因分型，所用試劑為上海之江生物醫藥科技有限公司生產的人乳頭瘤病毒基因分型檢測試劑盒。

1.4統計數據處理 所有統計學分析使用SPSS 13.0進行。計數資料以率(%)表示，各組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1HPV感染的總流行率 包頭女性人群HPV感染率為15.6 %(690/4 413)。在所有HPV陽性的女性中，單基因感染率為76.7 %(529/690)，混合基因感染率為23.3 %(161/690),以單一性感染為主，進一步用2檢驗分析結果顯示，單一感染和混合感染的構成比差異具有統計學意義(χ2=66.773，P=0.000)。在多發HPV感染的女性中，81.4 %(131/161)的患者感染了2種基因型，最常見的組合是16+58(14例)、39+68(9例)、52+58(8例)；另外，有11.8 %(19/161)患者感染3種基因型，最常見的為16+31+39型；最后，分別有5.0 %(8/161)和1.9 %(3/161)的患者感染了4種和4種以上的基因型。

我們回顧調查了3年期間的HPV流行率，以便更詳細地評估與HPV感染相關的年齡趨勢。基于年齡分布將患者分為11組，統計不同年齡組患者的HPV感染率，并進行對比分析，結果顯示不同年齡組之間患者的感染率差異有統計學意義(χ2=63.116，P=0.000)。HPV感染的年齡分布在整體HPV流行率中顯示出雙峰曲線，分別為16-20歲(47.2 %)年齡組和56-60歲(25.5 %)年齡組，見圖1。

圖1 2015-2017年HPV在女性中的流行率

2.2HPV基因型分布特征 總體看來，在感染HPV的女性中，HPV16無論是以單基因型或混合基因型出現均是感染概率最高的基因型(43.2 %)，其次是HPV58(17.2 %)、HPV18(9.4 %)。見表1。

表1 HPV基因型流行率(n=690)

根據年齡確定HPV基因型的分布見表2。對于不同年齡組感染率可看出，HPV16基因型的陽性率最高。對于不同年齡組的患者，年輕女性患者患病率均高于年齡較大的女性患者。

表2 HPV在不同年齡階層感染流行性的分布情況

3 討論

目前大量的研究與實踐結果表明，嚴重危害女性健康的宮頸癌是唯一一種可經過醫學干預降低發病率和死亡率的人類惡性腫瘤。根據宮頸癌的危險性差異，分為高危型HPV和低危型HPV兩大類。研究證實，高危型HPV的持續感染是宮頸癌發生的前提條件。

不同地區之間HPV流行情況存在著較大的差異。本研究發現的hrHPV陽性率(15.6 %)低于海口(31.9 %)[9]、廣東(20.0 %)[10]、重慶(27.3 %)[11]、濟南(25.7 %)[12]和上海(22.6 %)[13]，但與杭州(19.9 %)[14]和南昌(18.4 %)[15]的比例相似。與中國人口調查數據相一致，HPV16、52和58基因型是主要的hrHPV類型，但與全球范圍內結果存在差異(HPV16,18和45，HPV16,18和33以及HPV16,18和58是最常見的基因型),在研究人群中，HPV16和58占感染的50.2 %，代表亞洲人群中的常見類型，這一比例明顯高于全球平均感染率(14.0 %)[8]。

年齡特異性分布呈現雙峰曲線，第一個峰值出現在16～20歲年齡組，中年患病率較低，這反映了HPV感染的自然病史。女性中檢測HPV通常在15歲以上，在發生性行為后即應開始。現發現在年輕女性中患病率高達80 %，主要是短暫性感染，在1年或2年內可清除。在研究人群中，我們觀察到在56～60歲(28.5 %)年齡較大的女性中出現了的第二個高峰，這與中美洲、東南亞和西非地區觀察到的趨勢相似[16-17]。56～60歲年齡組的女性HPV感染率略有增加可能反映了絕經期HPV的持續性或潛在的HPV再激活，可能與激素和HPV活動周期的相互作用以及宿主的易感性相關。

由于經濟條件、文化存在多樣性、遺傳變異、HPV疫苗接種意識和生活方式存在差異，HPV的流行率具有地區差異，北京為9.9 %，海口為31.9 %，西方國家感染率為67.1 %～71.3 %[8]，值得注意的是，中國HPV疫苗接種率僅為16.0 %。免疫實踐咨詢委員會(ACIP)建議二價HPV疫苗、四價HPV疫苗和九價HPV疫苗(9vHPV)進行常規疫苗接種。在中國，最迫切的公共衛生問題是增加HPV疫苗接種覆蓋率，并提高疫苗接種效果。

HPV類型的HPV流行率和分布在不同的女性年齡組之間差異很大。這項研究的數據可能對包頭地區HPV的宮頸癌篩查工作很有價值，并可幫助包頭地區未來的HPV疫苗接種，疾病的篩查、診斷和治療。