范冬雨,李可心,趙震宇,賈傳文,竇宏強,李長田**
(1.吉林農業大學食藥用菌教育部工程研究中心,吉林長春130118;2.吉林農業大學中藥材學院,吉林長春130118;3.河西學院廳市共建甘肅省食用菌遺傳育種重點實驗室,甘肅張掖734000)
玉木耳 [Auricularia cornea(Yumuer)][1]是我國最近馴化栽培成功、穩定性良好且子實體潔白的木耳品種,是毛木耳的一個變種[2]。玉木耳潔白如玉、晶瑩剔透,是木耳栽培者追求的最佳品質[3],廣受消費者喜愛,李玉院士曾寫詩贊嘆玉木耳“膚如凝脂肌如雪,吹彈可破潤而潔。剔透晶瑩瑊玏殿,應是九天梨花謝”[4]。玉木耳營養豐富,含有大量碳水化合物,含粗蛋白7.3%、粗脂肪2.7%、菌類多糖6.56%、不飽和脂肪酸6.22%和可食性膳食纖維35.1%[5]。另外,鈣、磷、胡蘿卜素、維生素等營養物質含量也很高,更富含賴氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、亮氨酸等多種人體所需的氨基酸,是木耳界名副其實的“白富美”[4]。目前已在吉林、遼寧、山東、浙江、新疆、廣西等地栽培成功,是有較大市場潛力的木耳品種[6]。
我國人工林發展迅速,截止到2020年,我國人工林保存面積達6 933萬公頃,居世界第一位,在生態功能維護和經濟發展中發揮著重要作用。人工林在加工過程中會產生大量的剩余物,是木材采伐后不適于繼續加工使用的廢棄物,如樹皮、木屑等,而傳統的廢棄物處理方式為焚燒、就地拋棄或掩埋,既造成巨大的資源浪費,又嚴重破壞環境,若能利用人工林木屑栽培出高品質的食用菌,對保護環境和節約資源均具有重要意義。
由于食用菌在生物鏈中的地位和具有富集作用的特性,其重金屬超標或污染日益受到人們的關注,培養料的選擇將影響食用菌產品在生產過程中的重金屬含量[7]。目前,關于玉木耳的研究大多集中在栽培基質和栽培技術等方面,而不同培養料對玉木耳營養成分影響和重金屬含量的研究較少。基于此,利用木材加工后產生的桉樹木屑、楊樹木屑和櫟樹木屑為主培養料栽培玉木耳,比較3種培養料栽培玉木耳后總糖、粗蛋白、粗脂肪和粗纖維等營養成分和重金屬鉛、鎘含量的差異,并與國家標準進行比較,以期為評價3種木屑栽培食用菌的營養價值與質量安全提供參考依據[8],同時為玉木耳的研究與開發提供借鑒。
玉木耳(編號2018091901) 由吉林農業大學食藥用菌教育部工程研究中心提供,桉樹木屑、楊樹木屑、櫟樹木屑、米糠、豆粕粉、玉米粉、石膏均由吉林省長春市農博園菌菜基地提供。
配方1:桉樹木屑80%、米糠15%、豆粕粉2%、米粉2%、石膏1%,pH自然;配方2:楊樹木屑80%、米糠15%、豆粕粉2%、玉米粉2%、石膏1%,pH自然;配方3:櫟樹木屑80%、米糠15%、豆粕粉2%、玉米粉2%、石膏1%;CK:雜木屑80%、米糠15%、豆粕粉2%、玉米粉2%、石膏1%,pH自然[9]。
按照各配方成分準確稱取各配方料,分裝于直徑為90 mm的培養皿中,每個培養皿裝料50 g,含水量60%,pH自然,每個配方設定5個重復,于121℃滅菌40 min,冷卻至室溫后接種,培養皿中央接入直徑為5 mm的菌塊,置于25℃黑暗培養,采用十字劃線法,每隔24 h測量1次菌落半徑,并觀察菌絲長勢,當菌絲生長即將長滿平板時結束培養,計算菌絲生長速度,進行差異顯著性分析。菌絲生長速度(V,mm·d-1)的計算公式為:

式中:R為菌落半徑(mm);T為菌絲生長天數(d)。
1.3.1 制種
使用液體菌種配方:馬鈴薯300 g、葡萄糖20 g、蛋白胨 2 g、KH2PO42 g、MgSO41 g、VB10.5 g,蒸餾水1 000 mL。1 000 mL三角瓶中裝入400 mL液體培養基,121℃滅菌30 min,冷卻至室溫后接入6塊玉木耳菌塊(直徑為5 mm),后放入150 r·min-1,25℃的恒溫震蕩培養器中培養7 d左右。
1.3.2 菌包制作
準確稱取3種木屑,提前預濕24 h后加入米糠、豆粕粉、玉米粉和石膏混合均勻,含水量60%,使用33 cm×17 cm×0.05 cm的聚丙烯袋進行裝袋,每袋裝濕料1.25 kg,高壓蒸汽滅菌柜121℃滅菌120 min后移入冷卻間至室溫后每袋接入15 mL液體菌種。
1.3.3 養菌
在養菌前將菇房清理干凈,使用二氧化氯消毒劑熏蒸菇房12 h,熏蒸結束后通風,使藥品味道散盡。將菌包用塑料筐裝好放入養菌架培養。維持室溫25℃~28℃,(30±5)d菌絲滿袋,及時將污染的菌袋移出菇房。
1.3.4 打孔
菌絲滿袋后繼續在原條件后熟5 d左右即可打孔,使用木耳專用開口機對菌包打孔,打孔前用75%酒精對開口機消毒,每個菌袋打孔100個小三角孔,孔深8 mm,打孔后將菌袋掛在長2 m、寬0.6 m、高2 m的架子上,每隔0.3 m左右掛1串,每串5包,菌包距地面大于50 cm。
1.3.5 出耳及采收
控制菇房的環境條件,溫度20℃~24℃,濕度90%~95%,二氧化碳濃度不高于0.5%,每天450 lx散射光照射12 h[9]。待耳片直徑長至3 cm左右即可采收。采收前2 h停止加濕,采收后及時晾干,留取不同配方的干耳片備用。
1.4.1 常規營養成分
分別依據GB/T 15672-2009食用菌中總糖含量的測定、GB/T 5009.6-2016食品安全國家標準食品中脂肪的測定、GB 5009.5-2016食用菌中粗蛋白含量的測定、GB/T 5009.10-2003植物類食品中粗纖維的測定,檢測供試菌株干燥子實體中總糖、粗脂肪、粗蛋白、粗纖維的含量。
1.4.2 氨基酸種類和含量
使用高效液相色譜儀測定供試菌株干燥子實體中17種氨基酸含量。
1.4.3 重金屬含量
依據 GB 5009.268-2016食品中多元素的測定檢測供試菌株干燥子實體中重金屬鉛、鎘的含量。
使用WPS 2019進行數據整理和圖形繪制,利用SPSS 24軟件進行統計分析。
不同配方對玉木耳菌絲生長的影響見圖1。

圖1 不同配方的菌絲生長速度Fig.1 Mycelial growth of different formulations
由圖1所示,3個配方的菌絲生長速度具有顯著性差異(P<0.05),菌絲生長速度大小為配方2>配方3>CK>配方1,配方2的菌絲生長速度最快,為7.50 mm·d-1,高于CK的菌絲生長速度6.85 mm·d-1。配方1的菌絲生長速度最慢,為5.93 mm·d-1,且低于CK。由此可見,80%楊樹木屑作主料對玉木耳的菌絲生長具有促進作用。
2.2.1 常規營養成分
4種配方培養料栽培玉木耳的總糖、粗脂肪、粗蛋白和粗纖維測定結果見表1。

表1 不同配方干耳營養成分含量Tab.1 Main nutrient contents of different formulations
由表1可以看出,3種不同的木屑對玉木耳的營養成分含量的影響具有一定的差異性,櫟樹木屑(配方3) 栽培玉木耳的總糖含量最高,明顯高于CK,楊樹木屑和CK無明顯差異,桉樹木屑配方對總糖含量的效果最差。楊樹和櫟樹木屑栽培玉木耳的粗脂肪含量與CK無明顯差異,只有桉樹木屑栽培玉木耳的粗脂肪含量稍高,說明在促進玉木耳粗脂肪含量方面,3種木屑與傳統的雜木屑栽培基質效果相當。在粗蛋白含量方面,楊樹木屑栽培玉木耳的粗蛋白含量最高,為73.59%,比CK高1.18%,桉樹和櫟樹木屑栽培玉木耳的粗蛋白含量較低,且均低于CK,說明楊樹木屑作為培養基能夠栽培出高蛋白質含量的玉木耳。楊樹木屑栽培玉木耳的粗纖維含量與CK無明顯差異,其中,桉樹木屑栽培玉木耳的粗纖維含量最低,僅為29.32%。從以上4種常規營養成分分析結果可以看出,玉木耳主要營養成分除總糖含量外,配方2即楊樹木屑作培養料栽培玉木耳時,各項營養成分含量均最高,說明培養料的正確選擇對玉木耳干耳片營養價值的具有很大的影響。
2.2.2 氨基酸種類和含量
食用菌中含有多種氨基酸,約占干品重量的0.2%~3.6%[10]。通過高效液相色譜儀對3種培養料栽培的玉木耳干耳片進行氨基酸的檢測結果見表2。
由表2可知,共檢測出17種氨基酸含量,包括8種必須氨基酸和9種非必須氨基酸。在4個配方中,配方1的谷氨酸和半光氨酸的含量最高,丙氨酸、絲氨酸和精氨酸的酸含量最低;配方2中除了絲氨酸、谷氨酸和半胱氨酸3種氨基酸外,其余14種氨基酸在4個配方中含量均高于其他3個配方,且氨基酸總含量顯著高于其他配方,說明楊樹木屑對玉木耳的氨基酸含量的增加具有一定的促進作用。配方3除了脯氨酸、丙氨酸、絲氨酸和精氨酸之外,其余10種氨基酸含量在4個配方中均最低,且低于CK,說明櫟樹木屑不利于玉木耳氨基酸含量的增加。4個配方的氨基酸總含量為配方2>CK>配方1>配方3,其中必須氨基酸總含量為配方2>配方1>CK>配方3,非必須氨基酸總含量為配方2>CK>配方1>配方3,說明楊樹木屑代替CK栽培玉木耳能夠提高其氨基酸含量。

表2 不同配方干耳氨基酸含量Tab.2 Contents of amino acid of different formulations
根據GB 2762-2017食品安全國家標準食品中污染物限量中的規定,食品中鉛的限量為1.0 mg·kg-1,鎘的限量為0.5 mg·kg-1[11];根據 NY 749-2012綠色食品食用菌的規定,綠色食用菌的鉛限量值為1.0 mg·kg-1,鎘的限量為 0.5 mg·kg-1[12]。3 種木屑栽培玉木耳的重金屬鉛、鎘含量的檢測結果見表3。
由表3可知,用3種木屑栽培玉木耳的鉛、鎘含量符合國家食品安全標準,3種培養料栽培玉木耳的鉛含量排序為桉樹木屑>櫟樹木屑>CK>楊樹木屑,鎘含量排序為桉樹木屑>楊樹木屑>櫟樹木屑>CK,雖然3種培養料中均檢測出鉛、鎘的存在,但含量均低,都符合國家限量的標準,符合綠色食品(食用菌)的要求。

表3 不同培養料栽培玉木耳的重金屬含量比較Tab.3 Comparative analysis on heavy metal content of Auricularia cornea(Yumuer)cultured with different mediums
栽培原料是食用菌栽培過程中的重要部分,原料的正確選擇影響著食用菌生產的安全和質量。以目前食用菌傳統栽培原料緊缺和廢棄木屑污染環境為前提,用木材加工后產生的桉樹木屑、楊樹木屑和櫟樹木屑為主栽培料,傳統雜木屑培養料為對照,分析栽培玉木耳的總糖、粗脂肪、粗蛋白、粗纖維和氨基酸營養成分的差異。結果表明,不同木屑培養料栽培玉木耳的營養成分存在明顯差異,楊樹木屑栽培玉木耳時,除了總糖含量略低于櫟樹木屑,粗脂肪、粗蛋白和粗纖維含量在4個配方中均最高,氨基酸總含量、必需氨基酸總含量和非必需氨基酸總含量均顯著高于其他配方,說明楊樹木屑對促進玉木耳的營養品質方面效果最佳;櫟樹木屑栽培玉木耳除了總糖含量高于楊樹木屑,粗脂肪、粗蛋白和粗纖維含量均低于楊樹木屑,高于桉樹木屑,與CK配方存在明顯差異,氨基酸含量在4個配方中最低;桉樹木屑栽培玉木耳的總糖粗脂肪、粗蛋白和粗纖維含量顯著低于其他配方,但氨基酸含量高于配方3,可能的原因是桉樹木屑的成分以木質素為主,本身氮含量不高[13],全氮含量僅為0.143%[14],且材質疏松,營養不足[15]。
隨著人們對健康和食品安全問題的日益重視,在使用廢棄木屑作為基質原料栽培食用菌時,除對其利用的可行性進行研究外,還需注意其栽培食用菌的安全問題。栽培原料的來源是引起重金屬污染的重要因素之一,以桉樹木屑、楊樹木屑和櫟樹木屑栽培玉木耳,其干耳片含有的鉛、鎘含量均未超出綠色食品食用菌的規定,符合食用菌中污染物限量的標準,說明3種木屑作為基質原料栽培的玉木耳安全可食用。
通過利用3種木屑為基質原料栽培玉木耳,并對其營養成分和重金屬鉛、鎘含量的分析表明,不同木屑對營養成分和重金屬含量影響不同,需要以實際生產目的為前提,選擇合理的栽培原料,并有針對性地改善栽培食用菌的營養品質,生產出符合實際需要且質量安全的食用菌產品。