網織紅細胞的檢測進展及其參數在臨床疾病中的應用

王學菊

天津市北辰醫院 （天津 300400）

網織紅細胞（reticulocyte，RET）檢測能充分反映骨髓紅系造血水平。一般紅細胞形成過程中，晚幼紅細胞的增殖形成需分裂3～4次，個數轉為6～8個，且紅細胞不再分裂，排除細胞核后形成RET[1]。正常情況下，骨髓僅是由RET、成熟紅細胞釋放并進入血液內，對疾病的評估、預后起到參考作用，人工顯微鏡法是RET 的主要檢測方法，但檢測指標單一、穩定性差、耗時長，影響疾病判斷準確度。近年來，醫學領域檢測技術明顯提高，使RET 檢測水平極大提高。另外，各種檢測儀器的推陳出新，使多種檢測項目的各類型參數數量得以增加。目前，RET 項目參數主要有RET 絕對值（RET#）、RET 百分比（reticulocyte percentage，RET%）、未成熟RET 比率（immature reticulocyte fraction，IRF）、 低 熒 光 強 度RET 比 率（low fluorescent reticulocyte，LFR）、中熒光強度RET 比率（middle fluorescent reticulocyte，MFR） 以 及 高 熒 光 強 度RET 比 率（high fluorescent reticulocyte，HFR）[2]。不同參數是否起到不同作用需進行闡明。現本研究對RET 的檢測方法以及其參數應用情況進行綜述，旨在為疾病診斷、療效評定提供參考。

1 RET 檢測技術

1.1 手工計數

手工計數分為玻片法及試管法，但玻片法的準確度受血液水分揮發、染色時間等主觀因素影響，故被試管法替代；試管法易掌握、重復性高，但仍有諸多因素影響。Miller 窺盤法是早期應用的手工計數法，檢測RET 的主要標準性方法，由國際血液學標準化委員會推薦[3]；該方法是將具備1:9比例正方形計數方格Miller 窺盤放置在顯微鏡目鏡內，計數小格紅細胞數，即可明確總體數目。但早期手工計數檢測準確度受檢驗人員經驗的影響，且操作耗時長，準確度、重復性有一定局限性，故逐漸被取代。

1.2 自動分析儀

血細胞分析儀具備耗時短、測定結果準確度高、自動化強等優勢，逐漸用于各級醫院血液常規檢查中。流式細胞儀較傳統檢測方法更加簡便，靈敏度、特異度均較高，能夠直觀反映紅細胞形態學改變，檢測病變細胞表面抗原表達。汪梅花和趙康[4]證實了流式細胞術可準確分析急性白血病患者的免疫表型。徐芬等[5]發現流式細胞術檢測RET 參數，有助于判斷紅細胞的活動度，了解其參數在新生兒溶血病自然病程中的變化規律。國內血細胞分析儀邁瑞6800血細胞分析儀，采用流式細胞法及激光射頻法進行RET 的檢測。隨后美國拜爾公司推出多功能紅細胞分析儀，利用容量、電導、光散射以及電阻抗、熒光分析儀技術等，測定結果準確、自動化強，逐漸取代手工計數。

2 RET 參數分類

隨著全自動分析儀的廣泛應用，RET 相關參數不斷增加，且能精確得到各種參數，如RET#、RET%、IRF、LFR、MFR、HFR 等，檢測熒光越高，RET 含核酸量越高，細胞幼稚程度越高；IRF是反映幼稚細胞占RET總數的比例，是MFR 與HFR 之和[6]。通常健康者外周血內主要為LFR，若骨髓刺激，未成熟細胞進入外周血，使相關參數發生改變。因此，RET 參數對腎衰竭、貧血、肝臟疾病等有一定參考意義。

3 疾病應用

3.1 缺鐵性貧血

缺鐵性貧血主要表現為小細胞低色素性貧血，骨髓鐵染色、血清鐵參數等應用各具優劣勢，前者有一定創傷性，后者評價紅細胞生成有一定局限性、靈敏度差。李綿綿等[7]表明IRF、RET 生成指數（reticulocyte production index，RPI）可更好地評價骨髓造血功能。朱瓊等[8]表明缺鐵性貧血患兒REF%高于健康兒童，且動態評估紅細胞參數可早期診斷兒童缺鐵性貧血，判斷補鐵效果及兒童生長發育。因此，就國內RET 參數判定而言，IRF 可作為早期檢測缺鐵性貧血的重要指標。

3.2 溶血性貧血

溶血性貧血主要是由紅細胞存活時間縮短，且骨髓代償功能下降所致。紅細胞膜缺陷、血紅細胞異常及酶缺陷等內在因素以及免疫性、非免疫性等外在因素均可造成紅細胞壽命縮短[9]。韓啟福等[10]表明溶血性貧血患者RET%、RET#、IRF、MFR 和HFR 明顯高于健康對照人群，紅細胞計數、血紅蛋白水平、LFR 均低于健康對照人群。Li WW 等[11]報道不同貧血之間RET%存在差異，不同溶血特征的綜合評估簡單、實用、有效。通常，溶血性貧血患者促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）應激性增加，促使骨髓造血系統不斷釋放REF，故而會導致HFR、MFR 及IRF 表達增加。黎海江等[12]對自身免疫性溶血性貧血患者采用血液置換及洗滌紅細胞輸注，治療后RET 相關參數下降。因此，根據RET 相關參數檢測結果可用于診斷溶血性貧血，為臨床診斷、治療提供可靠的參考依據。

3.3 終末期腎病貧血

腎臟是釋放EPO 的重要臟器。終末期腎病或腎移植的患者EPO 釋放量下降，故會引起貧血，其中部分患者因循環鐵缺乏，且無法滿足紅系造血，造成功能性缺鐵。徐茂茂和汪秀英[13]的研究表明慢性腎功能不全合并貧血患者LFR 顯著高于非腎病貧血患者，RET#、IFR、MFR 以及HFR 低于非腎病貧血患者。戴學慶和蔡守兵[14]證實對RET各種參數的測定，能作為診斷、治療腎性貧血的重要指標，反映機體骨髓造血功能，觀察紅系生長狀況。因此，RET參數可相應作為判斷腎性貧血疾病的重要標準。

3.4 惡性腫瘤放化療

目前，惡性腫瘤患者在放化療時，主要是判定白細胞計數及血小板計數，若兩者表達量下降，則表明骨髓抑制明顯，并可能出現感染、出血風險。張碩[15]的研究表明急性白血病患者化療后RET#、RET%、IRF 以及白細胞計數均等降低，化療第4天開始，IRF 逐漸降低且顯著，化療第7天開始，RET#、RET%水平明顯降低。葉火林等[16]證實，化療第14天開始，腫瘤患者IRF、RET 表達下降，且與化療后7 天無明顯差異，化療后21 天開始，IRF 及RET 表達明顯升高，而且患者化療后白細胞減少程度與IRF、RET 表達具有正相關性。因此，IRF 和RET 表達可作為評估腫瘤化療后骨髓造血功能早期恢復的主要指標，并與白細胞計數呈正相關，有積極的臨床意義。故此根據RET 參數變化，較白細胞計數、紅細胞計數更具應用價值，能準確評估骨髓抑制恢復狀況。

3.5 骨髓移植

骨髓移植前，患者需要先接受放化療破壞機體病態的造血功能，隨后輸注大量的造血干細胞，實現造血以及免疫系統重建的目的。黎雯等[17]指出異基因造血干細胞移植聯合輸注內皮祖細胞后RET 數量明顯升高。當前，通過RET 及絕對中性粒細胞計數監測，可評估骨髓移植患者造血功能恢復效果，但多種因素會影響RET 的釋放，因此在應用時需綜合其他指標進行判斷。

3.6 肝臟疾病

肝臟是人體造血的重要器官，肝臟病變會影響機體正常造血系統的功能，進而使紅細胞異常。另外，肝細胞破壞會引起人體營養吸收異常，鐵元素、葉酸等成分吸收不足，使細胞DNA 合成與成熟功能受阻，合成速度減慢，造成細胞核無法在短時間內分裂，最后形成巨細胞貧血或缺鐵性貧血，導致RET 改變[18]。陸國偉等[19]表明肝硬化患者RET 參數高于健康體檢者，而聯合凝血功能、肝功能以及RET 參數，可提高疾病診斷準確度。魏三舟等[20]提示慢性丙型肝炎病毒感染患者RET 比例、血清EPO 水平高于非貧血患者，證實丙型肝炎病毒相關性貧血的發生與自身免疫相關。因此，肝臟疾病患者存在RET 參數改變，但并非屬于特異性指標，仍需進一步探討，或聯合其他指標檢測。

4 結論

隨著RET 檢測技術的完善、全自動及多功能血液分析儀的應用，使臨床檢測更加準確、方便，且經濟成本低，受到臨床醫師的青睞。目前，RET 參數應用日漸廣泛，在貧血性疾病、肝臟疾病、腎臟疾病、腫瘤等疾病的輔助診斷、治療判定及預后評估中有積極的應用價值，且較侵入性操作更具優勢。可見，隨著檢測技術的不斷發展使其參數不斷更新，這將逐漸成為疾病診斷、治療等的新方向。