氣相色譜法測(cè)定蔬菜中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析

李新梅

（常州市金壇區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 江蘇常州213200）

隨著生活水平的提高，人們的食品安全意識(shí)在增強(qiáng)，蔬菜質(zhì)量安全問(wèn)題也備受關(guān)注。果蔬的種植需要農(nóng)藥的支持，但如果在種植時(shí)農(nóng)藥使用過(guò)多就會(huì)造成果蔬中農(nóng)藥殘留。當(dāng)它的殘留量高于最大殘留限量時(shí)，會(huì)對(duì)人體健康造成不利影響[1]。有機(jī)磷農(nóng)藥是一類含磷元素的有機(jī)化合物農(nóng)藥，因其高效性、廣譜性而被廣泛應(yīng)用于植物病蟲(chóng)草害的防治。在生產(chǎn)中，因有機(jī)磷農(nóng)藥的使用不當(dāng)，導(dǎo)致蔬菜中發(fā)生不同程度殘留的問(wèn)題客觀存在。因此，開(kāi)展蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)、準(zhǔn)確的檢測(cè)殘留農(nóng)藥，對(duì)蔬菜安全生產(chǎn)及提高蔬菜品質(zhì)具有重要意義。蔬菜中有機(jī)磷殘留檢測(cè)的樣品前處理方法和檢測(cè)方法眾多，氣相色譜法因具有分離效率高、分析速度快、靈敏度高、選擇性好及低成本等特點(diǎn)[2]，廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留分析[3－6]。本試驗(yàn)于2020年進(jìn)行，利用氣相色譜儀脈沖火焰光度檢測(cè)器（PFPD），對(duì)蔬菜中10種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)分析，建立同時(shí)測(cè)定蔬菜中多種有機(jī)磷殘留的方法，為蔬菜安全生產(chǎn)提供一定的技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)儀器與試劑

1.1.1 試驗(yàn)儀器 氣相色譜儀（瓦里安GC450，自動(dòng)進(jìn)樣器、PFPD檢測(cè)器）；氮吹儀（OrganomationN-EVAP）；食品加工器；高速勻漿機(jī)（IKA T25）；冷凍高速離心機(jī)（eppendorf 5804R）；冷凍高速離心機(jī)（ThermoFisher）；振蕩器（IKA KS260）；CP-Sil24 CB毛細(xì)管柱（0.32 mm×0.25μm×30 m）。

1.1.2 試劑 乙腈（HPLC級(jí)）、丙酮（HPLC級(jí)）、氯化鈉（140℃烘烤4 h）；分散固相萃取管（4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉、1 g檸檬酸鈉）、分散固相萃取純化劑（150 mg MgSO4、50 mgPSA、50 mgC18），購(gòu)于上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、樂(lè)果、甲基對(duì)硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷，購(gòu)于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津），濃度為1 000 mg/L。分別以丙酮配制成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（100 mg/L），存儲(chǔ)于冰箱中備用（-20℃）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品提取 蔬菜樣品購(gòu)于農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。樣品經(jīng)縮分后切碎，充分混勻放入食品加工器粉碎，制成待測(cè)樣。提取方法參照NY/T 761-2008和QuEChERS。

提取方法1：稱取蔬菜樣品25.0 g于三角燒瓶中，加人50.0 mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min后濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有5 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，劇烈震蕩2 min，室溫靜置30 min，使乙腈相和水相分層。凈化：取上清液10 mL放入燒杯中，氮吹至近干。加入2 mL丙酮溶解，轉(zhuǎn)移至15 mL刻度離心管中，再用3 mL丙酮沖洗燒杯，定容至5 mL，漩渦混合器上混勻，過(guò)濾膜，用于測(cè)定。

提取方法2：稱取蔬菜樣品10 g（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10.0 mL乙腈，振蕩30 min，加入分散固相萃取劑（4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉、1 g檸檬酸鈉），劇烈振蕩1 min后6 000 r/min離心5 min，吸取上清液于分散固相萃取純化管（150 mg MgSO4、50 mgPSA、50 mgC18）中，6 000 r/min離心5 min，取上清液，過(guò)濾膜，用于測(cè)定。

1.2.2 色譜操作條件 進(jìn)樣口溫度250℃，柱溫40℃，保 持1 min，40℃/min到200℃，3℃/min到230℃，20℃/min到260℃，保持2 min，開(kāi)啟檢測(cè)器PFPD，溫度300℃，柱流量2 mL/min。進(jìn)樣量1μL（不分流進(jìn)樣）。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的優(yōu)化

通過(guò)對(duì)柱溫箱升溫程序、檢測(cè)器的溫度、載氣流速等色譜條件進(jìn)行探索，形成了“1.2.2”的色譜條件，所測(cè)10種有機(jī)磷農(nóng)藥組分均得到了良好的分離，峰型清晰不拖尾，分離效能高，出峰順序依次為甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、樂(lè)果、甲基對(duì)硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷。

表1 10種有機(jī)磷農(nóng)藥線性方程及檢出限

2.2 方法的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

精確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用丙酮逐級(jí)稀釋成質(zhì)量濃度為0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L和0.500 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測(cè)定對(duì)應(yīng)的峰面積。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從表1的結(jié)果可以看出，在0.010～0.500 mg/L濃度范圍內(nèi)，10種有機(jī)磷農(nóng)藥組分呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999 3～0.999 9，滿足儀器分析相關(guān)系數(shù)要求。以3倍的信噪比計(jì)算10種有機(jī)磷農(nóng)藥的檢出限，檢出限為0.002 0～0.007 8 mg/kg。

2.3 回收率和精密度試驗(yàn)

在蔬菜樣品中添加農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液，加標(biāo)濃度為0.050 mg/L、0.100 mg/L，并采用2種方法進(jìn)行提取。從表2可知，添加濃度為0.050 mg/L時(shí)，使用提取方法1，10種有機(jī)磷農(nóng)藥回收率為86.3%～102.1%，RSD為1.41%～6.03%；使用方法2，農(nóng)藥組分回收率為85.7%～98.7%，RSD為2.49%～6.23%。添加濃度為0.100 mg/L時(shí)，使用提取方法1，10種有機(jī)磷農(nóng)藥回收率為82.7%～96.2%，RSD為1.83～8.39%；使用方法2，各農(nóng)藥組分回收率為81.5%～100.5%，RSD為1.91%～7.02%。通過(guò)2種提取方法，回收率為81.5%～102.1%、RSD為1.41%～8.39%，符合檢測(cè)要求。提取方法1，有機(jī)溶劑消耗量大，進(jìn)行過(guò)濾再靜置，操作費(fèi)時(shí)；提取方法2，振蕩提取然后離心，樣品處理效率高，成本相對(duì)高。

2.4 樣品測(cè)定

在農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)隨機(jī)抽取蔬菜樣品20份，采用本方法進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)設(shè)置2個(gè)樣品添加，樣品添加的回收率為83.5%～106.7%，抽檢的20份蔬菜樣品中10種有機(jī)磷農(nóng)藥均未檢出。

表2 2種提取方法下10種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

3 結(jié)論

采用乙腈提取，建立了氣相色譜法PFPD檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定蔬菜中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。在優(yōu)化的色譜條件下，10種有機(jī)磷農(nóng)藥都得到了良好分離，在0.010～0.500 mg/L濃度范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，檢出限為0.002 0～0.007 8 mg/kg；加標(biāo)濃度為0.050 mg/L、0.100 mg/L時(shí)，采用2種提取方法，回收率為81.5%～102.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.41%～8.39%，符合農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法的要求。該方法適用于蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥多殘留檢測(cè)。