新生兒遺傳代謝性疾病篩查中串聯(lián)質(zhì)譜儀的應(yīng)用探究

賈楠楠

（泰安市婦幼保健院，山東 泰安 271000）

隨著我國社會經(jīng)濟的快速發(fā)展，人們對健康問題的重視程度也在不斷加深，同時科技水平的提升促進了醫(yī)學領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展，所以如何將新生人口的素質(zhì)進一步提升成為當下預(yù)防醫(yī)學領(lǐng)域中的熱點所在。相關(guān)研究結(jié)果表明，新生兒遺傳代謝性疾病是導致身體素質(zhì)較差的主要因素，對其原因進行分析，是因為遺傳代謝性疾病會導致新生兒的激素水平與生化水平發(fā)生改變，所以需要對新生兒進行相應(yīng)的篩查工作來明確診斷，從而盡早地給予針對性的治療措施，對新生兒的健康成長有著重要的現(xiàn)實意義。本文的研究對象為常規(guī)篩查的新生兒，共200例，均為我院2020年1月～2021年1月期間進行，以此來研究分析串聯(lián)質(zhì)譜儀的作用與效果，現(xiàn)報道結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料

將我院接受常規(guī)篩查的200例新生兒作為研究對象，時間為2020年1月～2021年1月期間，男女比例為130:70，年齡為1.5～6個月，平均年齡為（3.2±0.57）個月，研究已經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會的批準通過，并且新生兒家屬知曉此次研究并簽署同意書。研究新生兒均疑似遺傳代謝性疾病，包括抽搐、生長遲緩、肝脾腫大、肌張力不足、智力發(fā)育不良、精神行為反常、反復性嘔吐、生化指標異常等。

1.2 試劑與儀器

（1）試劑：肉堿（游離肉堿，乙酰肉堿、丙酰肉堿、丙二酰肉堿、丁酰肉堿、3-羥甲基丁酰肉堿、異戊酰肉堿、異戊烯肉堿、異戊二酰肉堿、3-羥基異戊酰肉堿、己酰肉堿、己二酰肉堿、辛酰肉堿、辛烯酰肉堿、葵酰肉堿、葵烯酰肉堿、葵二烯酰肉堿、十二碳酰肉堿、十二碳烯酰肉堿、十四碳酰肉堿、十四碳烯酰肉堿、十四碳二烯酰肉堿、3-羥基十四碳酰肉堿、十六碳酰肉堿、十六碳烯酰肉堿、3-羥基十六碳酰肉堿、3-羥基十六碳烯酰肉堿、十八碳酰肉堿、十八碳烯酰肉堿、十八碳二烯酰肉堿、3-羥基十八碳酰肉堿、3-羥基十八碳烯酰肉堿）、非衍生化多種氨基酸（丙氨酸、瓜氨酸、精氨酸、甘氨酸、亮氨酸/異亮氨酸、蛋氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、纈氨酸）、琥珀酰丙酮（琥珀酰丙酮）串聯(lián)質(zhì)譜測定試劑盒均為美國PerkinElmer公司生產(chǎn)，萃取質(zhì)控血片以及新生兒濾紙干血片后直接上機測定。

（2）儀器：質(zhì)譜儀、高效液相儀、自動進樣系統(tǒng)均由美國Waters公司提供。

1.3 實施方法

使用一次性采血針刺新生兒足跟進行采集，深度不超過3mm，將采集后的血液滴在Scheicherand Schuell 903濾紙樣本卡，然后在陰涼處將樣本陰干。濾紙干血片中的酰基肉堿、游離肉堿、氨基酸、琥珀酰丙酮萃取由25種穩(wěn)定同位素標記的氨基酸、酰基肉堿、琥珀酰丙酮內(nèi)標的溶劑進行，然后通過MS/MS系統(tǒng)展開相關(guān)分析。被測物質(zhì)分子被質(zhì)譜電離成各種質(zhì)荷比（m/z）不同的帶電離子，根據(jù)m/z大小，將這些電粒子在時間或者空間上產(chǎn)生分離，最終形成質(zhì)譜圖譜。對每個分析物以及與之相對應(yīng)的同位素內(nèi)標離子峰強度進行測定，根據(jù)已知的濃度內(nèi)標便能夠?qū)⑺鶞y樣本的各分析物濃度進行自動計算。具體實驗步驟如下：通過3.2mm直徑的打孔器在濾紙血片上取樣，并將其在96孔U型板中放置，同時，將100μL內(nèi)標工作液在每個孔內(nèi)加入，利用黏性封膜將其封套密封后，放置恒溫震蕩孵育器中，將其震蕩5min，溫度為45℃，605～750r/min。孵育結(jié)束后，將育萃取液75μL轉(zhuǎn)移到V型底檢測板內(nèi)，使用鋁膜將其封蓋，然后上機進行檢測。

2 結(jié)果

200例血液標本中，檢測結(jié)果為陽性的有3例標本，占比為1.5%，2例為甲基丙二酸尿癥，1例為異戊酸血癥。

3 討論

臨床上有很多遺傳代謝性疾病種類，就目前而言，已知的遺傳代謝性疾病種類就有1000多種，許多新生兒有著非特異性臨床表現(xiàn)，比如，嘔吐、抽搐、嗜睡、酸中毒、發(fā)育遲緩、肝脾腫大、精神行為反常、肌張力不足等。篩查遺傳代謝性疾病的方法有很多，在以往多采取Guthrie細菌抑制法、放射免疫分析法等，這些方法在臨床上能夠起到一定的應(yīng)用效果，但這些方法通常只能夠進行一種疾病的篩查工作，隨著檢查項目的不斷增加，使得傳統(tǒng)的篩查方法工作量增加，從而會不斷提高篩查成本，并且工作效率較低，因此難以滿足大規(guī)模篩查遺傳代謝性疾病的需求。換而言之，傳統(tǒng)篩查技術(shù)所體現(xiàn)出的成本高、工作量大等問題，已經(jīng)難以滿足人們的實際需求，因此，選擇新型有效的手段對遺傳代謝性疾病進行篩查就顯得尤為重要。

有資料顯示，我國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院對串聯(lián)質(zhì)譜分析方法展開了相關(guān)研究，其研究對象為172例新生兒，在分析新生兒血液樣本中所含有的酰基肉堿譜與氨基酸譜相關(guān)濃度后，其結(jié)果顯示陽性檢測結(jié)果為6.4%，11例新生兒被檢測出來，其中有機酸代謝類疾病患兒6例，氨基酸代謝類疾病3例，脂肪酸代謝類疾病2例。同時，有相關(guān)研究表明，串聯(lián)質(zhì)譜所檢測的遺傳代謝性疾病可以達30多種，并且具有良好的檢測效果。串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)所使用的技術(shù)原理主要是檢測樣品物質(zhì)所具有的質(zhì)荷，從而定量分析以及定性分析樣品物質(zhì)，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是能夠檢測血液樣本中的70多種氨基酸與酰基肉堿，因此，能夠快速診斷與篩查30多種脂肪酸、氨基酸、有機酸類代謝性疾病。串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在如今已經(jīng)得到了世界上多個國家的廣泛應(yīng)用，是能夠在早期發(fā)現(xiàn)遺傳代謝類疾病，我國于2002年開始使用該技術(shù)，對于新生兒遺傳代謝類疾病的篩查與診斷有著顯著進步與提高。串聯(lián)質(zhì)譜儀雖然有著許多優(yōu)勢，但依舊存在不足，因此，難以將傳統(tǒng)檢查方法完全取代，比如，質(zhì)譜儀有著昂貴的價格，維持和操作串聯(lián)質(zhì)譜儀的費用相對較高等。臨床上對串聯(lián)質(zhì)譜儀的機理認知在逐漸加深，同時，該技術(shù)的運用也逐漸趨于成熟，我國相對經(jīng)濟較發(fā)達的地區(qū)也正在逐漸開展串聯(lián)質(zhì)譜儀來篩查新生兒遺傳代謝性疾病，但要想構(gòu)建完善的串聯(lián)質(zhì)譜儀篩查規(guī)范以及相關(guān)檢測疾病的診治常規(guī)，就需要將二級檢測方案應(yīng)用其中，包括降低假陽性、更多標志物、陽性預(yù)測值篩查提升等，串聯(lián)質(zhì)譜儀的不斷穩(wěn)定與成熟是能夠提高診斷準確率，進而獲得更良好的社會效益。綜上所述，串聯(lián)質(zhì)譜儀的使用是能夠?qū)π律鷥哼z傳代謝性疾病起到良好的篩查作用，其應(yīng)用價值良好，能夠有效保障新生兒的健康發(fā)育。