液相色譜-同位素稀釋質譜法測定血清生長激素

余利星，翟 睿，楚占營，3，金有訓，武利慶，米 薇，龔曉云，謝 潔，江 游，戴新華，方 向，俞曉平

(1.中國計量大學生命科學學院，浙江省生物計量及檢驗檢疫技術重點實驗室，浙江 杭州 310018；2.中國計量科學研究院，質譜儀器工程技術研究中心，前沿計量科學中心，北京 100029；3.華東理工大學化學與分子工程學院，上海 200237)

臨床體外診斷生物標志物中，蛋白質類標志物約占10%～15%[1]。目前，針對蛋白質的檢測方法有時間分辨熒光免疫分析法[2-3]、酶聯免疫吸附法[4]、LC-MS/MS法[5-6]、免疫散射比濁法[7]和毛細管電泳結合紫外、質譜技術[8]等，其中基于抗原-抗體反應的免疫分析法是臨床蛋白質定量分析應用最廣泛的方法[9-11]。然而，由于存在抗體特異性差異、蛋白質結合位點差異、基質干擾、假陽性結果等問題，很難得到準確可靠的蛋白質定量分析數據，造成不同國家、不同實驗室蛋白質定量分析結果不可比對，臨床診斷準確性無法保證[12-13]。因此，建立高準確度的蛋白質定量分析方法是必要的。

同位素稀釋質譜法(isotope dilution mass spectrometry，IDMS)具有準確性高、重現性好等特點，已成為蛋白質質譜定量分析的首選方法[14-16]。該方法將已知質量的同位素標記肽段或蛋白質作為內標加入待測樣本中，通過質譜儀測定同位素豐度比例，從而計算目標蛋白質含量。然而，以同位素標記肽段為內標的方法，由于標記肽段添加時間較晚，且理化性質與目標蛋白質相差較大，由蛋白質降解、酶切不完全以及蛋白樣品損失帶來的定量誤差無法避免[17]。因此，以同位素標記蛋白質作為內標的方法是更可靠的。……