樹莓組織培養育苗技術

王 禹

(黑龍江省農科院園藝分院，哈爾濱150060)

樹莓(RubusidaeusL.)為懸鉤子屬多年生落葉小灌木，俗稱托盤、覆盆子，分單季品種和雙季品種，適應性強，栽培范圍廣。其果實營養價值高、口感好，除富含豐富的維生素、氨基酸和類黃酮外，還含有糅化酸、花色苷、SOD 酶等有益成份，是當今風靡世界的第三代水果中的佼佼者。

隨著樹莓種植面積的擴大，優質種苗的需求也隨之增長。但樹莓傳統的根蘗分株、埋土壓條和扦插繁殖育苗方式，受氣候條件、環境因素影響及母株數量和品種特性限制，致使生育周期長，繁殖系數低，苗木質量參差不齊，難以滿足市場對優質苗木的需求。因此，應探索有效的樹莓優良種苗繁育途徑。從材料選擇、組培苗育苗、組培苗馴化及管理等方面闡述樹莓組織培養技術繁育種苗，以期提高種苗繁殖數量和質量。

1 材料選擇

選擇無病蟲害、生長健壯、芽體飽滿莖粗不超過0.5 cm的嫩枝或半木質化的枝條。田間采集時間為6月中旬～ 9月初。

2 組培準備工作

2.1 培養基的制備及工具準備

所有培養基均采用MS + 植物激素 + 7 g/L瓊脂 + 30 g/L白糖，pH 5.4～6.0，0.103 MPa，121 ℃，濕熱滅菌20 min。無菌水、濾紙及工具，0.103 MPa，121 ℃，濕熱滅菌30 min。

2.2 材料處理

將采集的枝條剪成帶一個芽1 cm長的莖段，用洗潔精清洗干凈，流水狀態下沖洗1 h，置于超凈工作臺中無菌水沖洗3次。

嫩枝莖段消毒：酒精40 s，無菌水沖洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒5 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上。

半木質化莖段消毒：酒精1 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒7 min，無菌水沖洗3次，每次1 min以上。

2.3 組培苗培養

2.3.1 生長培養。將消毒好的莖段底部黑色部分切去，接種到MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA生長培養基上。7 d后腋芽陸續萌發，轉接增殖培養基時，芽高最好不超過1 cm。

2.3.2 增殖培養。將萌發的腋芽從莖段上切下，接種到MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA增殖培養基上，每30 d轉接一次，增殖系數因品種而異，可達2.8～4.1。

增殖培養可連續進行4次，然后進行復壯培養，復壯培養基可采用MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA，培養溫度20 ℃，光照時間10 h/d，培養30 d。

2.3.3 生根培養。當組培苗長至1 cm高時，切成單株狀，接種到MS+0.2 mg/L IBA生根培養基上。

2.3.4 培養條件。白天溫度23 ℃±2 ℃，夜間不低于18 ℃；光照時間14 h/d，光照強度為2500～3000 lx，相對空氣濕度40%～60%。

2.4 組培苗馴化

2.4.1 煉苗。當組培苗根系1 cm長時，將組培苗從培養室移至馴化室。繼續生長至根系長2 cm、株高3 cm以下，此時進行馴化。馴化前3 d，把瓶蓋打開，讓組培苗逐步適應外界環境。

2.4.2 移栽。栽基質采用草炭土，拌入30%的百菌清(百菌清∶土1∶100)，噴灑2.5%殺滅菊酯乳油1000倍液，塑料布覆蓋7 d。采用72穴，5 cm深的穴盤，使用前穴盤澆透水，放置2 d。

將組培苗根部培養基洗凈，用鑷子在穴盤上上打孔，根系不要卷曲，栽好后輕輕把空隙填滿，不要用手壓，以免基部折斷，澆透水即可。

2.4.3 馴化管理。緩苗前保持土壤濕潤，遮光率20%；相對空氣濕度不高于40%；環境溫度白天不高于30 ℃，夜晚不低于18 ℃，30 d后成活率可達90%。

移栽后注意預防紅蜘蛛，可選用73%炔螨特乳油、阿維菌素等；真菌、細菌性害可采用甲基托布津、使百克等。緩苗后每15 d 噴 1 次0.2%～0.3%磷酸二氫鉀溶液。