中藥提取物對(duì)凌云烏雞免疫器官組織形態(tài)學(xué)的影響

曹春雷，韋蘭和，陳世鋒，王 強(qiáng)，廖美德，梁家樂，葛洪偉*

（1.廣西科勝生物科技有限公司，廣西 崇左 532200；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，江蘇 揚(yáng)州 225000；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣州 510642）

凌云烏雞具有耐粗飼、覓食能力和抗病力強(qiáng)，羽毛漂亮、肉質(zhì)細(xì)嫩、味美香濃、食用藥用價(jià)值高等特點(diǎn)，是百姓餐桌上的佳肴和滋補(bǔ)佳品。2018年8月，凌云烏雞農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志登記認(rèn)證順利通過了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部專家評(píng)審，被認(rèn)定為國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品。凌云縣原是國(guó)家級(jí)貧困縣，由于當(dāng)?shù)刂T多條件的限制，凌云烏雞在很長(zhǎng)一段時(shí)間沒有得到科學(xué)合理的開發(fā)利用，長(zhǎng)期由當(dāng)?shù)噩幾濉炎宓仍∶褚月浜蟮娘曫B(yǎng)方式自繁自養(yǎng)，在沒有科學(xué)的品種培育和健康養(yǎng)殖方法的指導(dǎo)下，該品種一度處于瀕臨滅絕的局面。為了保護(hù)和開發(fā)利用好這個(gè)品種，廣西科學(xué)技術(shù)廳下達(dá)廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目“凌云烏雞本品種選育與健康養(yǎng)殖示范”，由廣西大學(xué)作為項(xiàng)目第一承擔(dān)單位負(fù)責(zé)實(shí)施。

近年來，隨著我國(guó)公眾對(duì)綠色無公害食品的追求，我國(guó)的養(yǎng)殖戶為了減少藥物殘留，提高畜產(chǎn)品品質(zhì)，開始嘗試使用中草藥來代替西藥治療[1-3]。中草藥是天然生長(zhǎng)既具藥物作用又具營(yíng)養(yǎng)作用的植物，且基本沒有任何藥物殘留。在畜牧養(yǎng)殖中因其副作用較小而被廣泛應(yīng)用[4-10]。本試驗(yàn)以此為依據(jù)設(shè)計(jì)飼養(yǎng)試驗(yàn)，為凌云烏雞的更加健康和高效養(yǎng)殖方式提供參考。

1 材料與方法

1.1 中藥提取物制備

本試驗(yàn)選取的中藥材為松針、仙人掌、辣蓼、白頭翁、訶子、板藍(lán)根、淡竹葉七味中藥，其重量配比24∶20∶12∶15∶12∶10∶10，中藥提取物的制備方法參考覃子榕[11]的方法進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)雞由廣西凌云縣瑞東農(nóng)牧有限公司提供，為1 200 只1 日齡凌云烏雞剛出殼的母雞苗。雞苗隨機(jī)分為2 組，每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)200 只，所有試驗(yàn)組雞苗斷左一趾與對(duì)照組進(jìn)行區(qū)分。不設(shè)預(yù)試驗(yàn)，從1日齡起，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧+500 mg·kg-1中藥提取物，飼糧營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間

試驗(yàn)時(shí)間為 2021 年 8 月 13 日至 2021 年 9 月 23日，共42 d，飼養(yǎng)試驗(yàn)地點(diǎn)為廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院試驗(yàn)雞場(chǎng)。試驗(yàn)中測(cè)定免疫器官重及免疫器官中T、B 淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)，均在廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院生化實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞的飼養(yǎng)管理方法按照廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院制定的方法進(jìn)行實(shí)施，為了盡可能減少飼養(yǎng)環(huán)境引起的誤差，要求所有參與飼養(yǎng)試驗(yàn)的凌云烏雞均飼養(yǎng)在同一棟雞舍內(nèi)，按照試驗(yàn)組和對(duì)照組的區(qū)分，人工投喂相應(yīng)的飼料；由專人負(fù)責(zé)記錄試驗(yàn)雞群的相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)雞在42 日齡完成育雛階段飼養(yǎng)后，每個(gè)重復(fù)組抽樣20 只雞進(jìn)行解剖，取免疫器官稱重。由于雛雞的胸腺組織比較小，不易發(fā)現(xiàn)，且不易剝離，測(cè)定的誤差會(huì)較大，因此本試驗(yàn)只摘除試驗(yàn)雞的法氏囊和脾臟，用高精度分析天平進(jìn)行稱重并統(tǒng)計(jì)重量數(shù)據(jù)；同時(shí)進(jìn)行法氏囊、脾臟和胸腺這三類免疫器官中T、B淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)檢查。

1.6 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗(yàn)結(jié)束用SPSS 10.0 軟件，采用one way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并進(jìn)行Duncan’s 多重比較。結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥提取物對(duì)免疫器官重量的影響

測(cè)定脾臟和法氏囊重，結(jié)果見表2。

由表2中數(shù)據(jù)可以看出，試驗(yàn)組的脾臟和法氏囊重分別為（0.549±0.075）g 和（0.448±0.046）g，明顯高于對(duì)照組的（0.435±0.045）g 和（0.318±0.031）g，這2個(gè)免疫器官的重量分別比對(duì)照組高出0.114 g和0.130 g，差異顯著（P＜0.05）。

表2 免疫器官重量 g

2.2 中藥提取物對(duì)免疫器官中的T、B淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)的影響

測(cè)定各免疫器官的T、B 淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)，結(jié)果見表3。

由表3 中數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)組脾臟中T 細(xì)胞和B細(xì)胞的相對(duì)數(shù)分別比對(duì)照組高10.0 和8.7；試驗(yàn)組法氏囊中T細(xì)胞和B細(xì)胞的相對(duì)數(shù)分別比對(duì)照組高7.9 和8.2；試驗(yàn)組胸腺中T 細(xì)胞和B 細(xì)胞的相對(duì)數(shù)分別比對(duì)照組高7.1 和6.0。以上結(jié)果均差異顯著（P＜0.05）。

表3 免疫器官T、B淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)

3 討 論

在中藥提高動(dòng)物免疫力方面，許多人已經(jīng)做了相關(guān)研究，如蔣華連等[12]和白建等[13]分別以廣西麻雞和海蘭褐蛋雞為試驗(yàn)動(dòng)物，研究了中藥對(duì)雞免疫功能的影響，結(jié)果都表明中藥能提高動(dòng)物的免疫力。

本試驗(yàn)中中藥組方的提取物在2017 年也在廣西來賓忻城縣潤(rùn)華牧業(yè)有限責(zé)任公司對(duì)廣西麻雞進(jìn)行過飼養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果表明該中草藥提取物具有顯著促進(jìn)廣西麻雞免疫器官發(fā)育、明顯增加免疫器官中T、B 淋巴細(xì)胞相對(duì)數(shù)的作用[14]。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，中藥提取物顯著促進(jìn)肉用型凌云烏雞的免疫器官的發(fā)育，增加免疫器官重量，顯著提高免疫器官中T細(xì)胞和B細(xì)胞的相對(duì)數(shù)。

4 結(jié) 論

在本次試驗(yàn)中，中藥提取物顯著提高了凌云烏雞的法氏囊和脾臟這2個(gè)免疫器官的重量，促進(jìn)雛雞免疫器官的發(fā)育，并且能夠提高凌云烏雞免疫器官中T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的相對(duì)數(shù)，因而能夠提高凌云烏雞的免疫功能。