白鶴藤化學成分的研究

李芷彤，梁惠嫻，宋雪慧，尹永芹

(廣東藥科大學，廣東 廣州 510006)

白鶴藤ArgyreiaacutaLour.為旋花科銀背藤屬植物，在我國主要分布于廣東、廣西、海南、云南等地，是民間常用中草藥，其全藤入藥，具有祛風除濕、止咳化痰、止血生肌、舒筋活絡、解毒消癰等作用[1]。民間主要用于內外傷出血、淤血腫痛、腎炎、祛腐升肌以及老年喘息型氣管炎和褥瘡的治療[1]。現代藥理研究表明，白鶴藤醇提物有顯著的止血、抗炎抗氧化等藥理作用[2]。目前，文獻報道白鶴藤化學成分主要包括生物堿、色素、甾體、皂苷、黃酮、酚酸、樹脂糖苷[1-5]。為了在臨床上發揮白鶴藤最大的藥效作用，需闡明該藥物的藥效物質基礎，為其臨床應用及質量控制提供科學依據，有必要對其化學成分進行研究。所以本課題組對白鶴藤的化學成分進行了進一步的研究，從白鶴藤乙醇提取物中分離得到12個化合物，其中化合物1～2、4,6～9、10、12均為首次從該植物中分離得到。

1 材料

高效液相色譜儀(日本島津公司)；半制備液相(北京創新通恒科技有限公司)；Bruker AV Ⅲ 500 MHz核磁共振儀(德國Bruker公司)；硅膠柱色譜(200～300目；青島裕民源硅膠試劑廠)；Sephadex LH-20 凝膠柱色譜(美國GE公司)；MCI GEL(75～150 μm；CHP 20P；日本三菱有限公司)；ODS(50～70 μm；天津鍵合相色譜有限公司)；GF254薄層層析硅膠(化學純；青島海洋化工有限公司)。甲醇(色譜純，歐普森化工技術有限公司)；氘代吡啶(上海阿拉丁有限公司)；甲醇等有機溶劑(分析純，天津致遠化學試劑有限公司)。

白鶴藤藥材于2017年12月從廣東藥科大學廣州大學城校區的藥圃里采摘，由廣東藥科大學馬鴻雁副教授鑒定為旋花科銀背藤屬植物白鶴藤ArgyreiaacutaLour.。

2 提取與分離

將干燥的白鶴藤藥材地上部分 35 kg，去雜剪碎，以 85%乙醇溶劑對藥材進行加熱回流提取，反復進行3次提取，每次需要2 h，減壓回收有機溶劑，得總浸膏3.5 kg。其中2 kg浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，減壓回收有機溶劑后，得到石油醚萃取部位150 g、氯仿萃取部位21 g、乙酸乙酯萃取部位97 g、正丁醇萃取部位 140 g。取乙酸乙酯部位浸膏97 g，進行硅膠柱層析分離，氯仿-甲醇(100∶1～0∶1)梯度洗脫，TLC檢識，共9個流分(Fr.1～9)。Fr3經硅膠柱層析分離，氯仿-甲醇(30∶1～0∶1)梯度洗脫，得到3個亞餾分(Fr.3a～3c)，Fr.3b經Sephadex LH-20，純甲醇洗脫，得化合物1(10 mg)。Fr.4經Sephadex LH-20純甲醇洗脫，得到3個亞餾分(Fr.4a～4c)，Fr.4a經硅膠柱層析分離，氯仿-甲醇(6∶1)洗脫，得化合物2(18 mg)；Fr.4b經半制備HPLC(94%甲醇)得化合物3(11 mg)、4(20 mg)。Fr.5經ODS反相柱，依次用10%、30%、50%、70%、90%甲醇梯度洗脫，得到3個亞餾分(Fr.5a～5c)，Fr.5c經Sephadex LH-20純甲醇洗脫，得化合物5(10 mg)。

另外1.5 kg浸膏用適量熱水攪拌溶解，充分溶解后緩慢加入已活化好的 D101型大孔樹脂柱中，使其分吸附5～6 h，依次用純化水、30%乙醇、60%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度洗脫，各部位的樣品洗脫液減壓濃縮得各部位浸膏，取60%乙醇洗脫部位浸膏305 g，經硅膠柱層析分離，二氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脫，TLC 檢識，共5個流分(Fr.1～5)。Fr.3經ODS柱，依次用10%、30%、50%、70%、90%甲醇梯度洗脫，得3個亞餾分(Fr.3a～3c)，Fr.3b經硅膠柱二氯甲烷-甲醇(50∶1～1∶1)梯度洗脫，一部分餾分經SephadexLH-20純甲醇洗脫，合并有斑點部分，得化合物8(20 mg)、9(18 mg)，另一部分通過半制備HPLC(47%甲醇)得化合物6(16 mg)、7(15 mg)。Fr.4經硅膠柱層析分離，二氯甲烷-甲醇(50∶1～1∶1)梯度洗脫，得到3個亞餾分(Fr.4a～4c)。Fr.4c經硅膠柱層析分離，二氯甲烷-甲醇系統(30∶1～1∶1)梯度洗脫，合并相同餾分，SephadexLH-20純甲醇洗脫，再經半制備HPLC(38%甲醇)得化合物10(15 mg)、11(12 mg)、12(16 mg)。

3 結構鑒定

化合物1：白色針狀晶體(甲醇)。在1H-NMR 譜中的質子信號呈現由于互相偶合高級裂分而造成的多重峰，故推測其化學結構為環狀化合物，具備芳香環狀的質子信號特征。δH9.02(1H，d，J=1.4 Hz)，8.69(1H，dd，J=4.4，0.8 Hz)，8.21(1H，m)，7.50(1H，dd，J=7.8，4.8 Hz)這些波譜數據為芳香區質子信號，其偶合常數小，且質子信號位于低場區，與吡啶類化合物的氫譜相似，故推測其母核為吡啶類化合物；在13C-NMR 譜中的δC168.5 為1個羰基碳信號，提示化合物中含有羰基。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：9.02(1H，d，J=1.4 Hz，H-2)，8.69(1H，dd，J=4.4，0.8 Hz，H-6)，8.21(1H，m，H-4)，7.50(1H，dd，J=7.8，4.8 Hz，H-5)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：168.5(-COOH)，153.9(C-6)，150.7(C-2)，137.2(C-4)，131.7(C-3)，125.4(C-5)。以上數據與文獻[6]基本一致，故鑒定為煙酸。

化合物2：淡黃色油狀物，溶于乙酸乙酯。經10%硫酸乙醇溶液顯色劑顯色后，斑點為紫紅色。在1H-NMR 譜中，δH：7.74(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz)，7.55(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz)顯示化合物含有2組對稱的芳香區質子信號，提示此化合物為對稱結構，與13C-NMR 譜中δC133.9、132.5、130.4 的苯環碳信號相對應。根據譜圖可以判斷該化合物為苯環鄰位取代結構。在1H-NMR 譜中，δH4.10(4H，d，J=6.7 Hz)顯示為2組連氧碳上的亞甲基質子信號；δH2.07(2H，m)顯示為2組次甲基的質子信號，分別與 C-1′位和 C-1″位相連接；δH1.00(12H，d，J=6.7 Hz)顯示為4組甲基質子信號，分別與 C-2′位和 C-2″位相連接；在13C-NMR 譜中，δC169.2為羰基碳信號；δC73.3為連氧碳信號；δC29.3為次甲基碳信號；δC20.7為甲基碳信號。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.74(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-2，5)，7.55(2H，dd，J=5.7，3.3 Hz，H-3，4)，4.10(4H，d，J=6.7 Hz，H-1′，1″)，2.07(2H，m，H-2′，2″)，1.00(12H，d，J=6.7 Hz，H-3′，3″，4′，4″)；13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δ：169.2(C-7，7′)，133.9(C-1，6)，132.5(C-2，5)，130.4(C-3，4)，73.3(C-1′，1″)，29.3(C-2′，2″)，20.7(C-3′，3″，4′，4″)。以上數據與文獻[7]基本一致，故鑒定為diisobutyl phthalate。

化合物3：無色油狀物，溶于多種有機溶劑，與水不溶。在254 nm 波長下有紫外吸收，硫酸香草醛顯紫紅色，碘顯色。在1H-NMR 譜中顯示有2組對稱的芳香區質子信號δH7.71(2H，m)和7.67(2H，m)，在13C-NMR 譜低場區中的δC133.7、133.6、130.7為苯環上的碳信號，且譜圖提示該化合物結構為高度對稱的鄰位取代結構。δH4.13(4H，m)顯示為 2組連氧碳上的亞甲基質子信號；δH1.64(2H，m)顯示為 2組次甲基質子信號，與1個連氧的亞甲基相連接；δH1.27～1.37(16H，m)顯示為一系列亞甲基質子信號；δH0.83～0.88(12H，m)提示此化合物含有4個-CH3。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.71(2H，m，H-12，12′)，7.67(2H，m，H-13，13′)，4.13(4H，m，H-3，3′)，1.64(2H，m，H-4，4′)，1.27～1.37(16H，m，H-5，6，7，9，5′，6′，7′，9′)，0.83～0.88(12H，m，H-8，10，8′，10′)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：169.0(C-1，1′)，133.7(C-11，11′)，133.6(C-12，12′)，130.7(C-13，13′)，69.4(C-3，3′)，40.1(C-4，4′)，31.8(C-5，5′)，30.4(C-6，6′)，25.3(C-7，7′)，24.4(C-9，9′)，15.9(C-8，8′)，12.8(C-10，10′)；以上數據與文獻[8]基本一致，故鑒定為bis(2-ethylhexy1)phthalate。

化合物4：白色固定物。在1H-NMR 譜中，δH7.70(2H，d，J=3.0 Hz)和 7.66(2H，d，J=3.0 Hz)顯示為2組對稱的芳香區質子信號，由于化合物的對稱性，以及苯環上僅存在兩組相鄰氫，因此裂分呈現為2組雙峰，為苯環的對位取代結構。在13C-NMR譜中，δC133.7、133.5、130.7為苯環的碳信號。δH4.22(4H，t，J=6.6 Hz)顯示為2組連氧碳上的亞甲基的質子信號；δH1.38～1.65(8H，m)顯示為一系列亞甲基的質子信號；δH0.89(6H，t，J=7.4 Hz)顯示為2組甲基的質子信號，分別與C-11位和 C-11′位相連接。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.70(2H，d，J=3.0 Hz，H-2，5)，7.66(2H，d，J=3.0 Hz，H-3，6)，4.22(4H，t，J=6.6 Hz，H-9，9′)，1.59～1.65(4H，m，H-10，10′)，1.33～1.38(4H，m，H-11，11′)，0.89(6H，t，J=7.4 Hz，H-12，12′)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：169.0(C-7，7′)，133.7(C-1，4)，133.5(C-3，6)，130.7(C-2，5)，67.0(C-9，9′)，32.0(C-10，10′)，20.7(C-11，11′)，15.6(C-12，12′)；以上數據與文獻[9]基本一致，故鑒定為 dibutylterephthalat。

化合物5：黃色針晶，AlCl3反應陽性，Mg-HCl 反應陽性，推測該化合物可能是黃酮類化合物；Molish 反應陰性，推測該化合物可能是苷元類化合物。UVλmax=267、365 nm(CH3OH)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)譜顯示δC176.4(C-4)，147.8(C-2)，129.9(C-3)說明該化合物為黃酮類，δC97.8(C-6)，92.3(C-8)可推測該化合物A 環為5，7位取代；δC56.3 為一個甲氧基的特征峰。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)譜中，δH12.5(1H，s，5-OH)，8.10(2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，可顯示 B 環上特征的 A2B2耦合系統。6.67(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.31(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，3.85(3H，s，7-OCH3)。結合13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)譜提示該化合物有16個碳原子、9個季碳、6個次甲基、1個甲基，在中低場區集中，進一步說明了黃酮類化合物的特征信息。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.5(1H，s，5-OH)，8.10(2H，d，J=8.6 Hz，H-2′，6′)，6.97(2H，d，J=8.6 Hz，H-3′，5′)，6.67(1H，d，J=1.5 Hz，H-8)，6.31(1H，d，J=1.5 Hz，H-6)，3.85(3H，s，7-OCH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：176.5(C-4)，165.2(C-7)，160.8(C-9)，159.7(C-5)，147.8(C-4′)，147.6(C-2)，146.6(C-3′)，129.9(C-3)，122.1(C-6′)，115.9(C-2′)，120.2(C-1′)，115.9(C-5′)，104.42(C-10)，97.8(C-6)，92.3(C-8)，56.3(-OCH3)。以上數據數據與文獻[10]基本一致，故鑒定為鼠李檸檬素。

化合物6：微黃色粉末，易溶于甲醇，1H-NMR 顯示該化合物含有2個咖啡酰基片段δH7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，7.01(1H，d，J=15.5 Hz，H-2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz,，H-5′)，6.73(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.25(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，一個奎寧酸的結構片段δH5.40(1H，m，H-5)，4.98(1H，m，H-4)，4.04(1H，m，H-3)，2.17(1H，m，H-6)，1.95(1H，m，H-2)，以及一個甲氧基氫信號δH3.63。13C-NMR譜顯示該化合物有26個碳信號，其中有7個為奎寧酸片段，δC53.7(-OCH3)為一個甲氧基，其余18個在δC112～167之間，進一步說明化合物6中有2個咖啡酰基存在。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.45(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，7.01(1H，d，J=15.5 Hz，H-2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.74(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.73(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.25(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.40(1H，m，H-5)，4.98(1H，m，H-4)，4.04(1H，m，H-3)，3.63(3H，s，-OCH3)，2.17(2H，m，H-6)，1.95(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.6(C-1)，37.5(C-2)，66.6(C-3)，69.9(C-4)，69.9(C-5)，36.7(C-6)，53.7(-OCH3)，176.0(C-7)，127.4(C-1′)，127.4(C-1″)，115.8(C-2′)，116.1(C-2″)，147.6(C-3′，3″)，150.4(C-4′)，150.6(C-4″)，117.8(C-5′,5″)，123.5(C-6′)，123.4(C-6″)，147.2(C-7′)，115.8(C-8′)，116.1(C-8″)，167.9(C-9′)，167.7(C-9″)。以上數據與文獻[11]基本一致，故鑒定為4,5-O-二咖啡酰奎寧酸甲酯。

化合物7：淡黃色粉末，對比化合物6～7的1H-NMR 和13C-NMR 數據發現，化合物7比化合物6僅多1個碳信號。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.47(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.05(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.94(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.75(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.28(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.20(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.44(1H，m，H-5)，4.99(1H，m，H-4)，4.09(1H，m，H-3)，2.24(1H，m，H-6)，2.06(1H，m，H-2)，1.21(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.7(C-1)，37.5(C-2)，66.6(C-3)，70.0(C-4)，70.0(C-5)，36.7(C-6)，175.6(C-7)，127.5(C-1′)，127.4(C-1″)，115.9(C-2′)，116.1(C-2″)，147.6(C-3′，3″)，150.5(C-4′)，150.4(C-4″)，117.8(C-5′，5″)，123.5(C-6′)，123.6(C-6″)，147.2(C-7′)，147.4(C-7″)，116.5(C-8′)，116.7(C-8″)，168.0(C-9′)，167.8(C-9″)，62.4(-OCH2-)，15.9(-CH3)。以上數據與文獻[12]基本一致，故鑒定為 4,5-O-二咖啡酰奎寧酸乙酯。

化合物8：微黃色粉末，易溶于甲醇，結合1H-NMR 和13C-NMR綜合分析可推測該化合物分子式C26H26O12。1H-NMR顯示該化合物含有2個咖啡酰基片段δH7.07(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.35(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.23(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，1個奎寧酸的結構片段δH5.43(1H，m，H-5)，5.33(1H，m，H-4)，4.01(1H，m，H-3)，2.33(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，以及1個甲氧基氫信號δH3.70。13C-NMR 譜顯示該化合物有26個碳信號，其中有7個為奎寧酸片段，δC51.69(-OCH3)為1個甲氧基，其余18個在δC112～167之間，δC174.25、167.37、166.59，提示有3個羰基碳信號，根據δC148.34、145.7、126.21、115.19、115.12 及 114.05，提示有1個苯環。根據成對出現的碳信號，提示另有1個苯環。進一步說明化合物8中有2個咖啡酰基存在。將化合物的核磁數據與奎寧酸的相關文獻來比對，發現譜圖中2個質子信號分別向低場位移，也說明該化合物結構中有雙酰基取代。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.60(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′，H-7″)，7.07(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5″)，6.35(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.23(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.43(1H，m，H-5)，5.33(1H，m，H-4)，4.01(1H，m，H-3)，2.33(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，3.7(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：73.3(C-1)，34.3(C-2)，73.3(C-3)，70.6(C-4)，70.8(C-5)，35.4(C-6)，174.3(C-7)，126.5(C-1′)，126.2(C-1″)，115.2(C-2′，2″)，148.3(C-3′，3″)，146.1(C-4′，4″)，114.1(C-5′，5″)，121.7(C-6′)，121.7(C-6″)，145.8(C-7′)，145.5(C-7″)，115.1(C-8′,8″)，166.6(C-9′)，167.4(C-9″)，51.7(-OCH2-)。以上數據與文獻[13]基本一致，故鑒定為3,5-O-二咖啡酰奎寧酸甲酯。

化合物9：淡黃色粉末，易溶于甲醇，結合1H-NMR 和13C-NMR 綜合分析可推測該化合物分子式 C27H28O12。分析該化合物1H-NMR 和13C-NMR 數據發現，該化合物9與8比較僅多1個碳信號,即多出1個甲基碳信號δC12.9(-CH3)以及甲基質子信號δH1.24(3H，t，J=10 Hz，-CH3)。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.62(2H，d，J=16.0 Hz，H-7，H-7″)，7.08(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.98(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.80(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.34(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.22(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.43(1H，m，H-5)，5.15(1H，m，H-4)，4.15(1H，m，H-3)，2.34(1H，m，H-6)，2.18(1H，m，H-2)，1.24(1H，t，J=10.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：73.2(C-1)，34.3(C-2)，70.9(C-3)，67.7(C-4)，68.6(C-5)，34.3(C-6)，173.8(C-7)，126.5(C-1′)，126.2(C-1″)，114.1(C-2′,2″)，146.1(C-3′)，145.8(C-3″)，148.3(C-4′)，145.4(C-4″)，113.8(C-5′,5″)，121.9(C-6′)，121.8(C-6″)，145.4(C-7′)，147.4(C-7″)，115.2(C-8′)，115.1(C-8″)，167.4(C-9′)，166.7(C-9″)，61.3(-OCH2-)，12.9(-CH3)。以上數據與文獻[13]基本一致，故鑒定為 3,5-O-二咖啡酰奎寧酸乙酯。

化合物10：淡黃色粉末，易溶于甲醇，分子式 C17H20O9。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.52(1H，d，J=16.0 Hz，H-7′)，7.04(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′)，6.95(1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6′)，6.78(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′)，6.21(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，5.02(1H，m，H-3)，4.13(1H，m，H-5)，3.73(1H，m，H-4)，1.98～2.23(2H，m，H-6)，1.98～2.23(2H，m，H-2)，3.69(3H，s，-OCH3)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，36.4(C-2)，70.7(C-3)，71.1(C-4)，68.9(C-5)，36.6(C-6)，174.0(C-7)，51.6(C-8)，121.6(C-1′)，115.1(C-2′)，148.3(C-3′)，145.8(C-4′)，113.6(C-5′)，121.6(C-6′)，145.5(C-7′)，113.7(C-8′)，166.9(C-9)。以上數據與文獻[14]基本一致，故鑒定為5-O-二咖啡酰奎寧酸甲酯

化合物11：淡黃色粉末，易溶于甲醇。ESI-MSm/z：529.116 1[M-H]-，分子量 530，分子式 C26H26O12。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.62(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′,H-7″)，7.52(1H，d，J=15.5 Hz，H-2′，H-2″)，6.96(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′)，6.92(1H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6″)，6.76(1H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.3(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.18(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.55(1H，m，H-5)，5.12(1H，m，H-4)，4.35(1H，m，H-3)，3.72(3H，s，-OCH3)，2.3(2H，m，H-6)，2.15(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，34.3(C-2)，73.3(C-3)，70.6(C-4)，70.8(C-5)，37.0(C-6)，174.2(C-7)，126.5(C-1′)，126.3(C-1″)，115.2(C-2′，2″)，148.4(C-3′)，148.3(C-3″)，146.3(C-4′)，146.3(C-4″)，114.0(C-5′，5″)，121.7(C-6′)，121.7(C-6″)，145.8(C-7′)，145.5(C-7″)，115.1(C-8′)，115.1(C-8″)，166.5(C-9′)，167.1(C-9″)，51.8(-OCH2-)。以上數據與文獻[11]基本一致，故鑒定為3,4-O-二咖啡酰奎寧酸甲酯。

化合物12：淡黃色粉末，易溶于甲醇。ESI-MSm/z：515.1[M-H]-，分子量516，分子式C25H24O12。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.45(2H，d，J=16.0 Hz，H-7′,7″)，7.03(2H，d，J=15.5 Hz，H-2′，2″)，6.76(2H，dd，J=2.1，8.0 Hz，H-6′，6″)，6.98(2H，d，J=8.0 Hz，H-5′，5″)，6.24(1H，d，J=16.0 Hz，H-8′)，6.16(1H，d，J=16.0 Hz，H-8″)，5.34(1H，m，H-3)，5.11(1H，m，H-4)，3.84(1H，m，H-5)，2.15(1H，m，H-6)，1.96(2H，m，H-2)；13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：74.4(C-1)，36.6(C-2)，72.9(C-3)，65.1(C-4)，72.5(C-5)，177.7(C-7)，127.6(C-1′)，127.6(C-1″)，116.1(C-2′，2″)，147.2(C-3′)，146.8(C-3″)，150.3(C-4′，4″)，116.7(C-5′，5″)，123.2(C-6′)，123.4(C-6″)，147.6(C-7′，7″)，116.8(C-8′)，117.9(C-8″)，168.1(C-9′)，167.5(C-9″)。以上數據與文獻[14]基本一致，故鑒定為 3,5-O-二咖啡酰奎寧酸。

3 結論

咖啡酰奎寧酸類化合物，是一類由奎寧酸與數目不等的咖啡酸通過酯鍵連接而成的酚酸類天然成分，廣泛存在于植物界，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等藥理活性[15-17]。本研究從白鶴藤乙醇提取物中共分離出12個化合物，以期進一步豐富白鶴藤中的成分，為后序的化學成分解析及藥理活性研究奠定基礎。