開心散現代藥理作用及作用機制研究?

孫永康，孫田燁，李明遠，王新志

(1. 河南中醫藥大學， 鄭州 450046； 2. 河南中醫藥大學第一附屬醫院，鄭州 450000； 3. 岐黃學者工作室， 鄭州 450000)

開心散由人參、遠志、茯苓、石菖蒲4味藥組成，最早記載于唐·孫思邈所著《千金方》[1]：“開心散，主好忘方”。后又由于藥物劑量不同，衍生出定志小丸、茯神丸等5個類方[2-3]。本方臨床常被用來治療阿爾茨海默病、血管性癡呆、認知障礙等以記憶功能障礙為主要表現的疾病。隨著臨床研究的深入，該方對抑郁、失眠、糖脂代謝紊亂等疾病的治療作用也被學者所發現。筆者在系統整理相關文獻的基礎上，將開心散的現代藥理作用及其作用機制概述如下。

1 阿爾茨海默病

阿爾茨海默病(AD)是臨床最常見的癡呆類型，隨著年齡的升高AD患病率逐步升高，老年患病率約為4.9%，女性多于男性[4]。開心散對AD治療作用的機制主要有以下幾方面。

1.1 抗細胞損傷及細胞凋亡

AD患者腦內β-淀粉樣蛋白(Aβ)增加，可造成突觸及神經元損傷，引發神經細胞凋亡，而開心散含藥血清可使Aβ25-35干預后的SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞)細胞活力增強，細胞凋亡減少，作用機制可能與提高活性氧表達、影響線粒體膜通透性有關[5]。師冉等[6]以快速老化模型大鼠為基礎，發現開心散可明顯提高模型大鼠記憶能力，其機制不僅與通過上調線粒體DNA(mtDNA)表達抑制細胞凋亡有關，并且可影響細胞凋亡過程調節因子Bcl-2 家族蛋白的表達。

1.2 促進細胞生長

PC12細胞的生長常被當做神經細胞活性的參考指標，研究發現[7-8]開心散含藥腦脊液有助于離體培養的PC12細胞成活及突觸生長，從而推測開心散體內代謝成分有類神經生長因子的作用，可促進神經細胞生長。

1.3 介導炎癥反應

炎癥因子可能通過介導炎癥反應產生慢性神經毒性參與AD的發病[9]。腫瘤壞死因子(TNF)及白細胞介素(IL)-8是參與免疫應答及細胞損傷、修復的重要因子。有學者[10]發現，AD患者腦脊液中TNF及IL-8異常升高，可能產生神經毒性，開心散可明顯降低AD模型小鼠TNF及IL-8水平，抑制免疫炎癥反應及神經毒素的釋放。韓麗君等[11]通過實驗研究發現，開心散含藥血清可通過作用于核轉錄因子(NF)-κBp65靶點蛋白，減少AD患者IL-6、TNF-α表達，抑制晚期糖基化終末產物(AGE)蛋白與晚期糖基化終末產物受體(RAGE)結合，抑制炎癥反應，達到治療AD的目的。

1.4 影響突觸信息傳遞

腦內淀粉樣蛋白(Aβ)沉積是AD產生的病理表現。黃樹明等[12]研究發現，開心散可改善Aβ干預后大鼠記憶能力，逆轉被抑制的神經突觸細胞傳遞海馬長時程增強(LTP)。狄亞琪等[13]進一步研究發現，這種逆轉機制可能與開心散調節大腦皮層突觸后致密蛋白-95(PSD-95)表達有關。

1.5 影響單胺類神經遞質

師冉等[14]發現，開心散通過影響AD模型小鼠單胺類神經遞質系統治療AD，可提高快速老化癡呆模型小鼠降低的腦組織5-羥色胺 (5-HT)、5-羥吲哚乙酸 (5-HIAA)、去甲腎上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)含量，降低模型大鼠升高的血漿 5-HT、5-HIAA、NE、DA含量。

1.6 其他

高冰冰等[15]發現，開心散對AD的治療作用可能與調節乙酰膽堿系統及抗氧化有關，其可明顯降低AD模型小鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)活性及丙二醛(MDA)含量，升高超氧化物歧化酶(SOD)活力。

2 血管性癡呆

血管性癡呆(VD)是各種腦血管病導致的癡呆。有研究[16]證明，VD約占所有癡呆的30.6%，≥55歲人群VD患病率為0.8%，≥60歲人群VD患病率為0.9%，而年齡每增大5歲VD患病率約增高1倍。代淵等[17]通過向SD大鼠頸動脈注射含血栓生理鹽水建立多發梗死性癡呆大鼠模型，使用開心散干預后發現，大鼠學習記憶功能及運動行為異常得到改善，其腦組織中ATP/AMP、γ-氨基丁酸(GABA)及血清中NOS活性氮自由基催化酶iNOS含量發生變化，認為開心散對VD的改善作用與腦內能量代謝有關。李志強等[18]則通過結扎雙側頸動脈的方法建立VD大鼠模型，并將其分為3組，除模型組為空白對照外，其余2組分別給予他克林及開心散干預，結果發現開心散干預組與模型組比較，空間探索及學習記憶能力均得到顯著提升，而2種干預方法下AChEmRNA水平未見明顯差異，考慮開心散通過干預AChEmRNA的表達發揮作用。劉彥廷等[19-20]則直接以VD患者為研究對象，將200例患者隨機分為對照組與治療組，對照組給予安理申口服，治療組給予開心散口服，治療1個月后發現2組患者智能狀況均較之前有所改善，尤以開心散治療效果更為明顯，且治療后2組患者血漿細胞間黏附分子-1(ICAM-1)值、血清凋亡抑制因子(Livin)值均較治療前有所改善，考慮開心散對VD的治療作用與上述物質有關。

3 認知障礙

輕度認知障礙作為正常與癡呆之間的中間狀態，在65歲以上人群中患病率約為10%～20%，且隨年齡的增長患病風險逐步增加[21]。許玉珉[22]使用東莨菪堿建立認知障礙小鼠模型，并用不同劑量開心散進行干預，結果發現開心散可提高模型小鼠空間學習記憶和對新異環境的探索能力，表明其對認知障礙有改善作用；而與空白對照組比較，開心散干預組可提高大鼠腦內B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)、突觸后致密物95(PSD95)、SYN、腦源性神經生長因子(BDNF)、乙酰膽堿(Ach)、乙酰膽堿轉移酶(ChAT)、SOD、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)水平，降低Bax、AchE、活性氧自由基(ROS)、MDA水平，考慮開心散對認知障礙的改善作用與減輕神經元損傷、抗細胞凋亡、改善突觸功能障礙、調節膽堿能神經遞質及提高氧化應激能力有關。

馬靜遙[23]對SD大鼠使用尾吊、隔離、孤養、晝夜節律改變等復合應激建立航天復合模型，該模型經獎勵性條件反射及Morris水迷宮行為學檢測存在認知功能損傷，而以認知損傷最穩定的28 d模型為研究對象，給予開心散干預，發現開心散可增加大鼠鼻觸次數，減少水迷宮定航實驗中的逃避潛化期等，對認知障礙有改善作用。進一步研究發現其作用與以下3種機制有關：其一為降低血清皮質醇和促腎上腺皮質激素(ACTH)含量，調控HPA軸；其二為通過調節MKP1調控MAPKs信號傳導通路中p38MAPK蛋白的表達；其三為調節CREB(環磷腺苷反應元件結合蛋白)及BDNF的表達。

4 亨廷頓病

亨廷頓病是一種常染色體顯性遺傳性進行性神經退行性疾病，多于中年發病，其臨床表現包括舞蹈病、肌張力障礙、動作與行為異常、認知能力下降等[24]。肖凌云[25]利用秀麗線蟲模型證明開心散可減少多聚谷氨酰胺(poiyQ)的聚集，緩解poiyQ神經毒性，改善神經功能，其作用機制可能與開心散可調控蛋白平衡降解體系及蛋白質平衡信號通路中氧化相關信號通路有關。前者包含通過熱休克蛋白(hsp)的調控誘導蛋白折疊及清除，促進線蟲自噬小體形成對自噬溶酶體系統(ALP)蛋白降解系統進行調控等。

5 抑郁

隨著開心散臨床應用的增多，其常被用來治療抑郁。有研究表明，開心散治療輕中度抑郁安全、有效，療效與氟西汀相當，并有起效早、副作用小等優點[26]，其作用機制主要分為以下幾方面。

5.1 單胺類神經遞質系統

黨海霞[27]發現，開心散可顯著提高慢性不可預測性應激大鼠腦內顯著下降的NE、DA、高香草酸(HVA)等單胺類神經遞質水平。羥色胺為另一種單胺類神經遞質，董憲喆等[28]發現，開心散可能通過提高孤養結合慢性不可預見性中等強度應激大鼠腦內色氨酸輕化酶 (TPH)、5-羚色氨酸脫竣酶 (AADC)含量，進而促進5-羥色胺(5-HT)的生成，升高大鼠腦內5-HT含量，達到治療抑郁的目的。Su-hong Lu[29]則進一步對開心散干預后的慢性應激抑郁Wistar 大鼠體內5-HT、5-HT2 A受體、5 - HT2 B 受體進行觀察發現，開心散不僅可以增加5-HT含量，還能興奮5-HT2 A受體，抑制5-HT2 B受體。

5.2 HPA軸

黨海霞[27]發現，慢性不可預測性應激大鼠HPA軸上皮質酮、AcTH、促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)升高，開心散可使上述3種物質水平明顯降低。溫智林等[30]發現，開心散能夠明顯保護慢性不可預見性溫和應激大鼠模型皮質酮所導致的CTX TNA細胞損傷，而這種機制與P13 K信號通路有關，提示開心散通過調控P13 K信號通路相關蛋白的表達發揮抗抑郁的作用。

5.3 神經營養因子

劉明月[31]發現，慢性不可預測性應激大鼠BDNF、CREB表達降低，開心散可通過促進CREB磷酸化激活和BDNF表達，進而保護甚至逆轉神經元及突觸的損傷，改善抑郁狀態。汪婷婷[32]證明，開心散主要成分人參皂苷Rb1、Rg1、Re、茯苓酸、細辛醚，均可調節CREB信號傳導通路。開心散干預抑郁模型大鼠2周后，可提高大鼠前額皮層和海馬中CREB 通路關鍵蛋白 Raf、PKA、Akt、PKC、PI3K水平。段袖珠等[33]研究發現，開心散不僅可以提高神經生長因子(NGF)、BDNF等神經營養因子的含量，尚能同時上調海馬神經營養因子TrkA、TrkB受體的表達，通過增加神經營養因子的含量及受體表達，實現抗抑郁的目的。

周小江[34]發現，開心散可通過促進慢病毒載體沉默SD大鼠未沉默的BDNPmRNA促進海馬BDNF表達，發揮抗抑郁的作用，而小鼠獲得性學習能力與修復mRNA損傷有關，記憶能力與CA1及CA3有關。

余冰穎[35]發現，開心散可上調BDNF及TrkB受體表達，激活TrkB-BDNF信號系統，介導ERK(細胞外信號調節激酶)和PI3K(磷脂酰基醇-3激酶)信號通路，促進TrkB、PI3K、p-ERk、p-CREB等關鍵蛋白的表達，改善CMS模型小鼠抑郁癥狀。

5.4 膽堿能系統

黨海霞[27]發現，慢性不可預測性應激大鼠AchE升高，開心散可使其降低。劉明等[36]將50只大鼠隨機分為正常組、模型組、陽性藥物組(鹽酸氟西汀)、開心散各劑量組，對除正常組外大鼠進行慢性應激刺激建立CMS模型，正常組及模型組給予蒸餾水灌胃，其余給予相應藥物，評價大鼠抗抑郁行為學活性及記憶能力，觀察大鼠全腦中Ach及乙酰膽堿酯酶(AchE)含量。結果發現，開心散可顯著提高大鼠記憶能力，其機制可能與提高大腦Ach水平及降低AchE水平有關。

5.5 褪黑素系統

張和韡[37]以SD大鼠為研究對象，證明HPA軸和海馬單胺類神經遞質與季節交替變化存在聯系，而這種季節節律性又與松果腺-褪黑素密切相關。黃妍麗等[38]以慢性不可預知的輕度應激大鼠為研究對象，觀察開心散對已被曠場實驗等證明的抑郁大鼠褪黑素受體表達及受體與125I-Mel結合親和力的影響，發現開心散可升高大鼠血漿褪黑素水平，褪黑素受體與125I-Mel結合能力提高，而各組褪黑素受體MT2水平未見明顯差異。認為開心散可能通過增加血漿褪黑素及褪黑素受體MT1的表達達到治療抑郁的目的。

6 睡眠剝奪及失眠

徐亞吉等[39]使用失眠刺激器將48只Wistar大鼠建模，然后平均分為6組，分別給予純化水、地西泮及不同劑量開心散藥液灌胃，干預7 d后進行腦電描記及覺醒/睡眠周期分析。結果發現，中、高劑量開心散能夠縮短覺醒時相，并延長慢波睡眠Ⅰ期、慢波睡眠Ⅱ期和快動眼睡眠時相，提示開心散具有促使失眠大鼠睡眠恢復的功效。買文麗等[40]對SPF級ICR小鼠采用輕柔刺激法建立睡眠剝奪模型，給予不同劑量開心散藥液灌胃，研究開心散對睡眠剝奪小鼠學習記憶的改善作用。結果發現，開心散可使睡眠剝奪小鼠大腦皮層AChE、血漿MDA含量降低，血漿SOD、大腦皮層過氧化氫酶(CAT)含量升高，通過限制 ACh 降解、保護細胞免受毒性自由基損壞，達到改善記憶及保護腦細胞的目的。

7 衰老

隨著老齡化社會的到來，衰老已經日漸成為科學研究的熱點，而衰老的發病機制較為公認的是自由基學說及端粒學說，前者指代謝產物自由基造成細胞損傷，后者指染色體端粒非編碼堿基序列DNA丟失，激活細胞衰老反應[41]。周高超等[42]為探討開心散抗衰老作用機制，對D-半乳糖誘導的亞急性衰老小鼠模型使用不同劑量開心散灌胃，發現開心散能夠明顯提高衰老小鼠腦及肝臟中SOD活性，降低高級糖基化終末產物(AGEs)、MDA含量，通過降低AGEs及清除自由基，改善衰老小鼠學習記憶能力。

8 疲勞

疲勞是臨床中常見癥狀，研究表明正常人群中約有18.3%存在持續6個月或更長時間的疲勞，其發病與心理發病率相關，并受年齡、性別、身體狀況、食物類型、疾病等多種因素影響[43-44]。曹寅等[45-46]研究發現，開心散實現抗疲勞作用的機制主要有以下幾方面：開心散可提高缺氧和力竭小鼠腦組織中SOD活性，降低MDA含量，減少糖原的分解，降低肌肉乳酸濃度，以增強抗氧化應激能力，調節能量儲備，促進代謝物質的清除；開心散可降低跑臺運動大鼠血清色氨酸(Trp)、中樞Trp、中樞5-HT、中樞5-HIAA及色氨酸羥化酶-2(TPH-2)限速酶水平，抑制受體5-HT1ADE表達，實現對5-HT系統的調節；開心散能降低跑臺運動大鼠促腎上腺皮質素(ACTH)、促腎上腺皮質素釋放激素(CRH)、皮質醇(CORT)、中樞-內啡肽(β-EP)水平，抑制慢性疲勞大鼠HPA軸亢進，下調促腎上腺皮質素釋放激素受體1(CRHR1)表達，調節與CRHR1偶聯的PKA信號通路。

9 糖脂代謝紊亂

糖脂代謝紊亂包括血脂異常、血糖異常、酒精性脂肪肝、高血壓等，嚴重危害人民生活健康。以糖尿病為例，截止2016年全球年齡標準化糖尿病患病率為9.0%，總患病人數已達4.22億，并且從1980年至今不斷呈現增長趨勢[47]。王登等[48]通過高脂飼料喂養及慢性應激建立Wistar大鼠糖脂代謝紊亂模型，給予開心散醇提物灌胃，探討開心散對糖脂代謝的影響及作用機制。結果開心散對大鼠血清糖耐量120 min血糖、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)等均有一定的調節作用，可使大鼠肝糖原和肌糖原水平顯著升高，并能降低尿液CORT及提高血漿CORT水平，從而降低HPA軸活性，達到改善糖脂代謝紊亂的效果。HPA軸、糖脂代謝之間的聯系已被多項研究所證實[49-50]。

10 心臟系統疾病

另外值得注意的是，有研究[51]發現開心散對痰濁瘀阻型心絞痛同樣有治療作用，且與口服阿司匹林及消心痛片的對照組比較，開心散治療組患者心絞痛發作頻率及血液流變學指標變化均優于對照組，但其作用機制尚不明確。張天藝[52]則關注于開心散對冠心病合并抑郁或抑郁合并冠心病的雙心疾病的干預作用，其利用慢性不可預知性應激及腹腔注射異丙腎上腺素的方法構建抑郁合并心肌缺血復合大鼠模型，觀察開心散對大鼠行為學、心臟功能和相關實驗室指標的影響。結果發現，開心散在治療抑郁的同時對心臟有保護作用，其作用機制可能與影響大鼠血清和心肌組織中SOD、GSH-Px、CAT、MDA含量發揮抗氧化作用，影響C反應蛋白(CRP)、IL-6、TNF-α含量發揮抗炎作用及影響心臟Bax蛋白、Bcl-2蛋白抑制心肌細胞凋亡有關。

11 結語

開心散作為傳統方劑，以治療健忘立方，隨著現代臨床及藥理研究，用以治療各種癡呆及抑郁等多種疾病。本研究主要通過總結開心散藥理研究，旨在為廣大工作者提供參考，以現有研究為基礎，能夠了解開心散對于各種疾病的作用機制，為進一步研究提供參考，從而提升開心散的臨床價值。本研究尚未將開心散幾種類方藥理作用的區別與聯系進行系統總結，仍有一定的局限性，并且在總結中發現，開心散相關臨床研究的質量有待進一步提高。