食管鱗癌患者外周血T淋巴細胞亞群及紅細胞免疫狀態(tài)的變化研究

祝春燕 許起榮

【摘要】 目的：探討食管鱗癌患者外周血T淋巴細胞亞群以及紅細胞免疫狀態(tài)的變化，以期為臨床診療和決策提供參考。方法：以本院2015年4月-2019年12月收治的100例食管鱗癌患者作為觀察組，并選取同期在本院體檢科體檢的100例健康人作為對照組。檢測并比較觀察組和對照組、觀察組術(shù)前和術(shù)后14 d、觀察組術(shù)前不同病理分期患者的T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）和紅細胞免疫相關(guān)指標[紅細胞膜C3b受體花環(huán)形成率（RBC-C3bRR）、紅細胞膜吸附免疫復合物花環(huán)形成率（RBC-ICR）、體循環(huán)免疫復合物花環(huán)形成率（CIC）]水平。結(jié)果：觀察組患者術(shù)前CD3+、CD4+均低于對照組，而CD8+水平高于對照組（P<0.05）;與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明顯升高，CD8+水平明顯降低（P<0.05）。觀察組患者術(shù)前RBC-C3bRR低于對照組，而RBC-ICR和CIC水平均高于對照組（P<0.05）;與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d的RBC-C3bRR水平明顯升高，RBC-ICR和CIC水平均明顯降低（P<0.05）。食管鱗癌Ⅲ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鱗癌Ⅱ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期（P<0.05）。食管鱗癌Ⅲ期患者RBC-C3bRR低于Ⅱ期和Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鱗癌患者Ⅱ期RBC-C3bRR低于Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅰ期（P<0.05）。結(jié)論：食管鱗癌患者免疫功能下降，且下降趨勢與病情嚴重程度相關(guān)，紅細胞免疫功能和T淋巴細胞亞群檢測可作為臨床輔助診斷的一項重要免疫學參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 食管鱗癌 T淋巴細胞亞群 紅細胞免疫

[Abstract] Objective： To investigate the changes of T lymphocyte subsets and erythrocyte immune status in peripheral blood of patients with esophageal squamous cell carcinoma， so as to provide reference for clinical diagnosis， treatment and decision-making. Method： A total of 100 patients with esophageal squamous cell carcinoma admitted to our hospital from April 2015 to December 2019 were taken as the observation group， and 100 healthy people who underwent physical examination in the physical examination department of our hospital during the same period were selected as the control group. T lymphocyte subsets （CD3+， CD4+， CD8+） and erythrocyte immune related indexes （RBC-C3bRR， RBC-ICR， CIC） were detected and compared between the observation group and the control group， the observation group before and 14 d after operation， and the observation group with different pathological stages before operation. Result： The levels of CD3+， CD4+ in the observation group were lower than those in the control group， while the levels of CD8+ in the observation group was higher than that in the control group （P<0.05）; compared with before operation， the levels of CD3+ and CD4+ in peripheral blood of the observation group were significantly increased， while the level of CD8+ was significantly decreased 14 d after operation （P<0.05）. The preoperative RBC-C3bRR of the observation group was lower than that of the control group， while the levels of RBC-ICR and CIC of the observation group were higher than those of the control group （P<0.05）; compared with before operation， the level of RBC-C3bRR in the observation group was significantly higher， and the levels of RBC-ICR and CIC were significantly lower 14 d after operation （P<0.05）. The levels of CD3+ and CD4+ in stage Ⅲ were lower than those in stage Ⅱ and Ⅰ， and the level of CD8+ was higher than those in stage Ⅱ and Ⅰ （P<0.05）; the levels of CD3+ and CD4+ in stage Ⅱ were lower than those in stage Ⅰ， and the level of CD8+ was higher than that in stage Ⅰ （P<0.05）. RBC-C3bRR in stage Ⅲ was lower than those in stage Ⅱ and Ⅰ， while RBC-ICR and CIC were higher than those in stage Ⅱ and Ⅰ （P<0.05）; RBC-C3bRR in stage Ⅱ was lower than that in stage Ⅰ， while RBC-ICR and CIC were higher than those in stage Ⅰ （P<0.05）. Conclusion： Immune function decreased in patients with esophageal squamous cell carcinoma， and the decrease trend was related to the severity of the disease， the detection of erythrocyte immune function and T lymphocyte subsets can be used as an important immunological reference for clinical auxiliary diagnosis in patients with esophageal squamous cell carcinoma.

[Key words] Esophageal squamous cell carcinoma T lymphocyte subsets Erythrocyte immunity

First-author’s address： The First Affiliated Hospital of Nanchang University， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.26.012

食管癌的發(fā)生與環(huán)境、飲食以及遺傳等因素密切相關(guān)，盡管隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進步，臨床上對食管癌的治療在手術(shù)、化療、放療以及靶向藥物使用方面等均有較大的突破，但食管癌的預后仍然相對較差[1]。有研究表明，食管癌已經(jīng)成為惡性腫瘤中致死率最高的疾病之一，且在世界各地，食管癌的發(fā)病率呈不斷上升趨勢[2-3]。既往有研究證實，細胞免疫與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，以T淋巴細胞亞群為主要代表的細胞免疫功能的異常不僅僅是腫瘤發(fā)生的基礎(chǔ)，而且對患者的預后也存在重要的影響意義[4]。隨著現(xiàn)代免疫學說的不斷深入研究，紅細胞免疫被多位學者提出并證實了其在腫瘤免疫中的重要地位。為了進一步探討食管鱗癌患者的發(fā)病機制，為臨床治療和研究提供參考依據(jù)，筆者對來本院就診的食管鱗癌患者的T淋巴細胞水平和紅細胞免疫狀態(tài)進行了檢測和對比。現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年4月-2019年12月本院收治的100例食管鱗癌患者作為觀察組，并選取同期在本院體檢科體檢的100例健康人作為對照組。觀察組納入標準：首次經(jīng)病理學檢測確診為食管鱗癌患者;無認知障礙。觀察組排除標準：合并其他惡性腫瘤或免疫性疾病;合并感染;正在接受激素類藥物或其他影響免疫功能藥物。對照組納入標準：體檢無異常狀況;無認知障礙。對照組排除標準：近兩個月服用過激素類藥物或其他免疫調(diào)節(jié)劑。所有研究對象均自愿參與本研究且簽署知情同意書，且該研究經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會審核通過。

1.2 方法

1.2.1 手術(shù)方法 所有觀察組患者均行常規(guī)開胸開腹手術(shù)方案。患者取左側(cè)臥位后行全身麻醉，于第6肋間作為手術(shù)切口，打開胸腔后游離食管，切除腫瘤并對相關(guān)淋巴結(jié)清掃，清掃結(jié)束后將患者轉(zhuǎn)為平臥位，以劍突至臍間為第二切口，行腹部手術(shù)。最后以患者的胸骨上做一弧形切口，行頸部吻合術(shù)并清掃相關(guān)淋巴結(jié)。

1.2.2 T淋巴細胞亞群測定 于晨起抽取對照組的空腹靜脈血5 mL和觀察組術(shù)前、術(shù)后14 d的空腹靜脈血5 mL，離心得上清后用流式細胞儀檢測CD3+、CD4+和CD8+。

1.2.3 紅細胞免疫功能測定 參照郭峰[5]設(shè)計的紅細胞免疫功能測定方法以及PEG沉淀法，分別測定對照組和觀察組術(shù)前、術(shù)后14 d的紅細胞膜C3b受體花環(huán)形成率（RBC-C3bRR）、紅細胞膜吸附免疫復合物花環(huán)形成率（RBC-ICR）、體循環(huán)免疫復合物花環(huán)形成率（CIC）水平。

1.3 觀察指標 比較對照組和觀察組術(shù)前的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平;比較觀察組術(shù)前和術(shù)后14 d的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平;比較觀察組術(shù)前不同分期患者的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 觀察組，男61例，女39例;年齡39～66歲，平均（47.95±3.97）歲;食管鱗癌病理分期（UICC2009版）：Ⅰ期44例[男28例，女16例，年齡39～66歲，平均（48.32±2.73）歲]，Ⅱ期27例[男16例，女11例，年齡40～66歲，平均（47.82±3.15）歲]，Ⅲ期29例[男17例，女12例，年齡39～66歲，平均（47.57±3.36）歲]。對照組，男58例，女42例，年齡40～66歲，平均（48.03±3.57）歲。對照組與觀察組、觀察組患者不同分期的年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 對照組和觀察組患者術(shù)前、術(shù)后14 d外周血T淋巴細胞亞群比較 觀察組患者術(shù)前CD3+、CD4+均低于對照組，而CD8+水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明顯升高，CD8+水平明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2.3 對照組和觀察組患者術(shù)前、術(shù)后14 d紅細胞免疫功能測定比較 觀察組患者術(shù)前RBC-C3bRR低于對照組，而RBC-ICR和CIC水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d的RBC-C3bRR水平明顯升高，RBC-ICR和CIC水平均明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

2.4 食管鱗癌患者術(shù)前不同分期T淋巴細胞亞群比較 食管鱗癌Ⅲ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;食管鱗癌Ⅱ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

食管癌的發(fā)病機制尚不十分清楚，但學者們傾向于認為該疾病的發(fā)生發(fā)展與機體的免疫狀態(tài)有關(guān)，由各種原因?qū)е碌幕颊呙庖吖δ芟陆祷蛎庖咴员幌魅跏窃摷膊“l(fā)生、惡化的主要原因之一[6-8]。T淋巴細胞是參與機體細胞免疫的重要細胞群，通過各亞群間相互協(xié)調(diào)、相互制約維持機體正常的免疫功能，當T淋巴細胞亞群的數(shù)量、功能發(fā)生異常改變時，機體的免疫功能紊亂，進而引發(fā)一系列病理變化，導致疾病的發(fā)生，比如惡性腫瘤[9-10]。CD3+和CD4+細胞是T淋巴細胞中的重要輔助細胞，它們通過分泌細胞因子來激活CD8+細胞，進而誘導后者產(chǎn)生抗體，殺死靶細胞[11-13]。在本研究中，觀察組患者術(shù)前CD3+、CD4+均低于對照組，而CD8+水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。說明食管癌患者的免疫功能低于正常人群，在不同病理分期的食管癌患者中，Ⅲ期的CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05），Ⅱ期的CD3+和CD4+水平低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期（P<0.05）。可見，隨著食管鱗癌的不斷加重，患者的CD3+和CD4+水平均呈遞減趨勢，而CD8+水平呈遞增趨勢，也就是隨著患者病情的加重，其細胞免疫功能進一步受到抑制，機體的抗腫瘤免疫功能也進一步下降。除此之外，筆者同時對食管癌患者術(shù)前、術(shù)后T淋巴細胞相關(guān)亞群進行檢測發(fā)現(xiàn)，與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明顯升高，CD8+水平明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

以往研究認為只有白細胞才參與機體的抗腫瘤免疫功能，80年代以來，有學者提出了紅細胞免疫說法[14]。近年來，有關(guān)紅細胞免疫的研究越來越多，其免疫功能也逐漸得到進一步證實。紅細胞免疫機制是通過其免疫黏附功能調(diào)控淋巴細胞的活性，同時紅細胞也可以促進中性粒細胞的吞噬功能[15-17]。在機體中，紅細胞是數(shù)量最多的細胞，故其也是不容忽視的免疫細胞。本研究中，筆者對紅細胞免疫相關(guān)指標研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者術(shù)前RBC-C3bRR低于對照組，而RBC-ICR和CIC水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;與術(shù)前相比，觀察組患者術(shù)后14 d的RBC-C3bRR水平明顯升高，RBC-ICR和CIC水平均明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。食管鱗癌Ⅲ期患者RBC-C3bRR低于Ⅱ期和Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鱗癌Ⅱ期患者RBC-C3bRR低于Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅰ期（P<0.05）。說明隨著食管鱗癌的不斷發(fā)展，腫瘤細胞釋放的抗原物質(zhì)在進入機體后發(fā)生免疫應答，進而產(chǎn)生抗體形成循環(huán)免疫復合物。過多的循環(huán)免疫復合物與紅細胞表面的C3b受體結(jié)合，進而導致紅細胞的免疫功能受到抑制，喪失清除腫瘤細胞的能力[18-20]。

綜上所述，食管鱗癌患者免疫功能下降，且下降趨勢與病情嚴重程度相關(guān)，紅細胞免疫功能和T淋巴細胞亞群檢測可作為臨床輔助診斷的一項重要免疫學參考依據(jù)。

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（收稿日期：2021-07-19） （本文編輯：張爽）