血清TLR4、CD137L和T淋巴細胞亞群聯合檢測在診斷CHB嚴重程度方面的臨床價值

王春娥，任 靜

（南京醫科大學附屬無錫市人民醫院，江蘇 無錫 214000）

慢性乙型病毒性肝炎（CHB）是目前臨床上常見的傳染病之一。該病具有傳染性強、發病率高的特點。CHB 患者若未得到及時有效的治療，可發生肝纖維化或癌變，進而威脅其生命。準確地評估CHB 患者的病情有利于臨床醫生盡早對其進行有針對性的治療。CHB 患者肝損傷的情況與T 淋巴細胞介導的免疫反應密切相關。CD137L 是導致T 淋巴細胞活化的重要因子之一[1]。Toll 樣受體4（TLR4）是參與非特異性免疫反應的重要蛋白質分子之一[2]。本文主要是探討對CHB 患者進行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測在診斷其病情嚴重程度方面的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為2018 年3 月至2020 年7 月期間南京醫科大學附屬無錫市人民醫院收治的242 例CHB 患者和同期在該醫院進行健康體檢的50 例健康人作為研究對象。根據CHB 患者病情的嚴重程度將其分為輕度組（88 例）、中度組（104 例）和重度組（50 例）[3]。將50 例健康人作為健康組。CHB 患者的納入標準為：1）病情符合臨床上關于CHB 的診斷標準[3]。2）同意參與本次研究，并簽署了參與本次研究的知情同意書。CHB 患者的排除標準為：1）患有酒精肝、脂肪肝等其他肝疾病。2）合并有嚴重的心、腦、肺、腎等重要器官功能不全。健康組研究對象的納入標準為：1）身體健康。2）同意參與本次研究，并簽署了參與本次研究的知情同意書。在CHB 患者中，有男138 例，女106 例；其平均年齡為（42.15±6.08）歲。健康組研究對象中有男28 例，女22 例；其平均年齡為（43.18±7.12）歲。四組研究對象的性別、年齡相比，P ＞0.05。

1.2 方法

抽取所有研究對象5 ml 的空腹外周靜脈血。將血樣離心后，取血清進行檢測。使用流式細胞儀（相關試劑盒由CALTAG 公司提供）檢測所有研究對象血清T 淋巴細胞亞群的水平。使用酶聯免疫吸附法（相關試劑盒由上海恒遠生物科技有限公司提供）檢測所有研究對象血清CD137L及TLR4 的水平。

1.3 觀察指標

觀察四組研究對象血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群的水平。分析CHB 患者血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群的水平與其病情嚴重程度的相關性。評估進行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測在診斷CHB患者病情嚴重程度方面的效能。

1.4 統計學分析

將本次研究中的數據均采用SPSS 22.0 統計軟件進行處理，計量資料用均數± 標準差（± s ）表示，計數資料用百分比（%）表示。兩兩比較采用LSD-t 檢驗。血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細胞亞群的水平與CHB 患者病情嚴重程度的相關性采用Spearman 進行分析，輕度賦值為0，中度賦值為1，重度賦值為2。采用ROC 曲線分析進行血清TLR4，CD137L 及T 淋巴細胞亞群檢測對評估CHB 患者病情嚴重程度的效能。以P ＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 四組研究對象血清TLR4 及CD137L 的水平

輕度組患者與健康組研究對象血清TLR4 及CD137L 的水平相比，P ＞0.05。中度組患者及重度組患者血清TLR4及CD137L 的水平均高于健康組研究對象及輕度組患者，P ＜0.05。重度組患者血清TLR4 及CD137L 的水平均高于中度組患者，P ＜0.05。詳見表1。

表1 四組研究對象血清TLR4 及CD137L 的水平（± s ）

表1 四組研究對象血清TLR4 及CD137L 的水平（± s ）

注：a 與健康組相比，P ＜0.05；b 與輕度組相比，P ＜0.05，c 與中度組相比，P ＜0.05。

組別 例數 CD137L（ng/L） TLR4（pg/mL）健康組 50 108.47±44.26 1.07±0.22 輕度組 88 129.16±37.94a 4.72±1.51a中度組 104 217.28±64.32ab 18.67±2.88ab重度組 50 608.94±113.87abc 34.77±5.48abc F 值 659.02 1510.84 P 值 0.000 0.000

2.2 四組研究對象血清T 淋巴細胞亞群的水平

輕度組患者、中度組患者及重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于健康組研究對象，其血清CD8＋的水平均高于健康組研究對象，P ＜0.05。中度組患者及重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于輕度組患者，其血清CD8＋的水平均高于輕度組患者，P ＜0.05。重度組患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋均低于中度組患者，其血清CD8＋的水平均高于中度組患者，P ＜0.05。詳見表2。

表2 四組研究對象血清T 淋巴細胞亞群的水平（± s ）

表2 四組研究對象血清T 淋巴細胞亞群的水平（± s ）

注：d 與健康組相比，P ＜0.05；e 與輕度組相比，P ＜0.05，f 與中度組相比，P ＜0.05。

組別 例數 CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋/CD8＋健康組 50 66.51±7.04 42.68±6.61 27.44±3.71 1.61±0.54輕度組 88 54.21±6.30d 38.84±5.21d 36.52±4.75d 1.25±0.14d中度組 104 41.64±5.25de 31.09±4.15de 39.66±6.18de 0.97±0.12de重度組 50 28.17±6.58def 25.51±4.44def 43.27±9.54def 0.53±0.04def F 值 392.08 135.91 63.31 180.18 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 CHB 患者血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細胞亞群的水平與其病情嚴重程度的相關性

CHB 患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋與其病情嚴重的程度呈負相關性，其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平與其病情嚴重的程度呈正相關性，P ＜0.05。詳見表3。

表3 CHB 患者血清TLR4、CD137L 及T 淋巴細胞亞群的水平與其病情嚴重程度的相關性

2.4 進行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測對診斷CHB 患者病情嚴重程度的效能

與單獨進行血清TLR4、CD137L 或T 淋巴細胞亞群檢測相比，為CHB 患者使用血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測的方法診斷其病情嚴重程度的敏感度、準確度及特異度更高，P ＜0.05。詳見表4。

表4 進行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測對診斷CHB 患者病情嚴重程度的效能

3 討論

肝是人體最大的消化器官，具有分泌、代謝及免疫調節功能。部分人在感染少量的乙型肝炎病毒（HBV）后可通過自身免疫反應清除病毒。還有一部分人在感染HBV 后會罹患急性或慢性肝炎。其中CHB 患者的病情可發展成為肝硬化、肝癌，進而嚴重威脅其健康。流行病學調查結果顯示，我國罹患CHB 的患者已超過2 千萬人次。準確地評估CHB 患者的病情有助于臨床醫生為其制定科學有效的治療方案，緩解其病情。

HBV 能誘導T 淋巴細胞活化，產生免疫應答反應，引起肝炎、肝損傷[4]。按照表面分化抗原的不同，T 淋巴細胞可分為多個亞群。CHB 患者感染HBV 后，抗原呈遞細胞會將處理過的HBV 抗原呈遞給CD4＋和CD8＋。CHB 患者血清T 淋巴細胞亞群的水平可以反映出其體內細胞免疫的狀態。共刺激分子CD137 及其配體CD137L 是能夠激活T 淋巴細胞的第二信號分子。CHB 患者血液中CD137L 的水平與其肝損傷的程度有關[5]。TLR4 是參與天然免疫的一類跨膜非催化性蛋白分子，可通過識別微生物的結構分子來激活免疫應答反應。TLR4 具有輔助清除HBV 病毒的作用。隨著病情的進展，CHB 患者的病毒載量增加，其肝組織對HBV 感染所做出的免疫反應增強，其體內活化的T 淋巴細胞及各種與炎癥、纖維化相關的介質增多，因此其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平增高，血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋降低[6]。

本次研究的結果證實，CHB 患者血清CD3＋、CD4＋的水平及CD4＋/CD8＋與其病情嚴重的程度呈負相關性，其血清TLR4、CD137L 及CD8＋的水平與其病情嚴重的程度呈正相關性。與單獨進行血清TLR4、CD137L 或T 淋巴細胞亞群檢測相比，為CHB 患者使用血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測的方法診斷其病情嚴重程度的敏感度、準確度及特異度更高。對CHB 患者進行血清TLR4、CD137L 和T 淋巴細胞亞群聯合檢測在診斷其病情嚴重程度方面具有較高的臨床價值。