結核性腹膜炎腹水LDH、ADA和T-SPOT檢測及其診斷價值

梁小朋，胡錦興，林兆源，蔡智群，吳碧彤，馮永忠，韓建芳

廣州市胸科醫院結核內科、呼吸疾病國家重點實驗室，廣東 廣州 510095

結核性腹膜炎是一種由結核桿菌引起的腹膜慢性、彌漫性炎癥，患者的感染可能是由腹腔內的結核桿菌直接蔓延而來，也可能是由于血行散播而來，前者較為常見，如腸結核、輸卵管結核等均可能是本病的直接原發病灶[1-2]。目前，結核性腹膜炎多以中青年較為常見，并且女性患者略多于男性[3]。結核性腹膜炎患者常伴有腹痛、腹水以及盆腔包塊等，因此結核性腹膜炎的早期診斷對提高患者生存質量有著重要意義[4]。本研究旨在探討乳酸脫氫酶(LDH)、腺苷脫氫酶(ADA)以及T細胞斑點試驗(T-SPOT)聯合檢測在結核性腹膜炎患者早期診斷中的臨床價值，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析廣州市胸科醫院2013年6月至2018年6月間收治的66 例結核性腹膜炎患者的實驗室檢測結果和臨床治療情況，所有患者均行腹水LDH、ADA 以及T-SPOT 檢測。納入標準：(1)均經獲取腹膜組織并經病理學診斷確診為結核性腹膜炎；(2)入院時伴有乏力、納差、腹痛、腹脹等癥狀；(3)X 射線顯示全腹密度增高，腸黏連、鈣化淋巴結或腸梗阻等；(4)排除合并其他免疫系統疾病以及血液系統疾病。66 例患者中男性32 例，女性34 例；年齡18～71 歲，平均(48.3±6.9)歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 觀察指標與檢測方法 (1)觀察所有患者LDH、ADA 水平變化及T 細胞斑點試驗(T-SPOT)結果，采用受試者工作特征曲線(ROC)對各指標單獨檢測和聯合檢測的預測結局進行評價；(2)比較各檢測指標單獨及聯合檢測的診斷結果。腹水T-SPOT陽性評定采用英國結核感染T細胞檢測試劑盒(免疫斑點法)進行檢測，首先FicollPaque法采用水平溫控離心機分離單個核細胞，通過洗滌與計數、孵育過夜、洗板與顯色，最后斑點計數及結果判讀；腹水ADA 評定采用德國乳酸脫氫酶檢測試劑盒，應用cobas 8000 e 801全自動化學分析儀，以腹水為標本進行ADA 定量檢測；腹水LDH 測定采用邁克生物股份有限公司腺苷脫氨酶測定試劑盒(過氧化物酶法)，應用cobas 8000 e 801全自動化學分析儀，以腹水為標本進行LDH 定量檢測。

1.3 評價標準 (1)腹水T-SPOT 結果判定[5]：根據抗原A或/和抗原B孔的反應判斷結果：陰性對照孔點數為0～5。陽性樣本=抗原A或抗原B斑點數-陰性對照孔斑點數大于或等于6。當陰性對照孔斑點數大于等于6，陽性樣本=抗原A或抗原B斑點數大于或等于2倍的陰性對照孔斑點數。如果上述標準不符合且陽性質控對照孔正常時檢測結果為陰性。(2)腹水ADA 評定[6]：以腹水ADA＞40 U/L 為陽性。(3)腹水LDH評定[7]：以腹水LDH＞200 U/L為陽性。

1.4 統計學方法 應用SPSS18.0 統計軟件進行數據分析，計數資料比較采用χ2檢驗，采用ROC 曲線評價各指標對結核性腹膜炎的診斷價值，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 腹水LDH、ADA及T-SPOT診斷結核性腹膜炎的ROC曲線 采用ROC曲線對各指標單獨檢測和聯合檢測預測結局進行評價，結果顯示，LDH+ADA+T-SPOT的預測曲線下面積最大，達0.944，見圖1。

圖1 腹水LDH、腹水ADA及T-SPOT診斷結核性腹膜炎的ROC曲線

2.2 各檢測指標單獨及聯合檢測對結核性腹膜炎的診斷效能比較 LDH+ADA+T-SPOT聯合檢測診斷結核性腹膜炎的靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值及陰性預測值明顯高于三項指標單一檢測，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 各檢測指標單獨及聯合檢測的診斷效能比較(%)

3 討論

結核性腹膜炎是由結核菌引起的一種慢性彌漫性腹膜感染，可由腸結核、腸系膜淋巴結結核、輸卵管結核直接蔓延或其他原發結核感染灶內的結核菌隨淋巴、血行播散而來[8]。目前，結核性腹膜炎發病率約占全身結核病的5%，且患者可發病于任何年齡，發病隱匿，缺乏特異性臨床表現是導致診斷困難的重要原因[9]。目前，臨床仍采用細胞學檢測和病理檢測相結合對結核性腹膜炎進行診斷。但由于操作復雜、診斷時間長、費用高，臨床中常達不到預期效果[10-12]。

結核病作為T 淋巴細胞介導的疾病，T 淋巴細胞介導產生的ADA 不斷進入腹腔，因此，在患者腹水中ADA含量較高。本研究結果顯示，單獨腹水ROC曲線臨界值明顯低于設定的臨界值，這與國內研究顯示結核性腹膜炎患者腹水中ADA 值明顯高于惡性水腫患者腹水中ADA值結果一致[13-14]。本研究以40 U/L為臨界值，因此結核性腹膜炎診斷的敏感性為88.48%，特異性為86.38%，造成了臨床診斷中具有一定的局限性。LDH作為一種鑒定腹水滲出液或漏出液的酶，若患者腹水LDH值大于200 U/L，腹水值與血液LDH比值高于0.6，則為滲出液[15]。

T-SPOT即結合感染干擾素釋放試驗，是在結合分歧桿菌感染后形成了具有獨特“記憶”的T淋巴細胞，將具有“記憶”的T淋巴細胞分離培養后獲得新的T淋巴細胞，然后采用相應的特異性抗原進行刺激，使該T淋巴細胞的“記憶”被激活，分泌干擾素。檢測干擾素含量判斷是否有具有“記憶”的T淋巴細胞形成，從而推斷出是否具有結核感染[16]。由于T-SPOT 檢測不能區分活動性、陳舊性結核以及結核潛伏感染，因此對患者單獨行T-SPOT 檢測臨床意義不大，而聯合檢測有助于提高單一T-SPOT檢測的敏感性和特異性。本研究顯示，腹水LDH、ADA 聯合T-SPOT 檢測靈敏度、特異度及準確度均明顯高于單一腹水ADA、LDH 及T-SPOT檢測。

綜上所述，腹水ADA、LDH 及T-SPOT 聯合檢測對結核性腹膜炎的診斷價值較高，值得在臨床診斷中推廣應用。