王 洲,王 權,王建國,林阿朋,劉美劍,齊富剛
(江蘇農牧科技職業學院,江蘇泰州 225300)
鱈魚是一種冷水魚,由于肉質鮮美深受消費者的喜愛,因此,了解其生命階段的營養需求對發展和改進養殖技術至關重要。迄今為止,大多數關于鱈魚的營養研究都集中在早期飼養階段,如通過早期使用干微顆粒飼料進行人工飼養,減少了勞動強度(Jensen等,2011)。然而,早期階段飼料過于昂貴,成本效益不高,因此,了解飼料利用率對衡量生產成本至關重要(葉文紅,2019)。該階段飼喂以海洋類高蛋白為主的飼料可以改善鱈魚幼魚的生長,但在后續階段對生長性能無顯著改善作用。因此,隨著鱈魚飼養制度的優化,有必要評估日糧配方中的新成分,以促進生長發育,減少魚粉使用。魚類營養學家對大豆蛋白質來源飼料非常有興趣,因為它們含有高水平的蛋白質,并能提供相對平衡的氨基酸,同時大豆蛋白也是許多魚類的一種魚粉替代蛋白原料,但未經加工的大豆含有大量的抗營養因子,會對某些物種的營養、解剖和生理產生負面影響(吳玉波,2014)。因此,大豆加工精制物和生物加工混合物在作為魚粉替代品加入到魚飼料中時顯示了良好的生長性能(段晶等,2019)。此外,有研究發現,加工大豆蛋白成分可刺激固有免疫系統,改變遠端腸道微生物群的組成來影響養殖魚類生長(李杰,2017)。但目前有關不同的大豆蛋白對鱈魚的研究信息有限,因此,本研究旨在評估日糧添加不同處理方式的大豆替代魚粉對鱈魚生長性能、體成分及免疫學指標的影響。
1.1 日糧配方及動物分組試驗將體重一致的576條鱈魚隨機分配到4組,每組144條,分別飼養在4個水族箱中(36條/個)。對照組飼喂基礎日糧(25%魚粉),處理組分別用20%的豆粕、大豆濃縮蛋白和發酵豆粕替代魚粉。

表1 不同處理方式大豆替代魚粉日糧組成 及營養水平
1.2 飼養管理在為期13周的試驗中,水族箱的水溫維持在(23±1.5)℃,溶解氧維持在(7.0±0.8)mg/L。每天記錄飼料投喂量,試驗結束后稱量體重。參考方衛東等(2016)的方法計算生長性能指標和體成分。每個重復選擇5條魚進行屠宰,分離肝臟、脾臟、內臟脂肪和內臟,稱重,計算器官重量與活體重的百分比,用于表示器官指數。
1.3 樣品采集及分析采集血液用于血液生化指標分析,同時將分離的腎臟用于提取mRNA,樣品用于測定白細胞介素-8(IL-8)和TLR-22受體基因表達(Bakkemo等,2011)。
1.4 統計分析使用SPSS軟件對試驗分組進行單因素方差分析,采用Duncan’s法進行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 不同處理方式的大豆替代魚粉對鱈魚生長性能及器官指數的影響由表2可知,日糧用20%不同加工方式的大豆替代魚粉對鱈魚相對生長率、外型指數、存活率和脾臟指數的影響無顯著差異(P>0.05)。豆粕組鱈魚的末重顯著高于對照組和發酵豆粕組(P<0.05),同時,豆粕組和發酵豆粕組采食量顯著高于對照組(P<0.05),而對照組和豆粕組特定生長率和蛋白質效率顯著高于發酵豆粕組(P<0.05)。豆粕組鱈魚臟指數顯著高于其他組(P<0.05),而豆粕組和大豆濃縮蛋白組內臟指數及內臟脂肪指數均顯著高于對照組和發酵豆粕組(P<0.05)。

表2 不同處理方式的大豆替代魚粉對鱈魚生長性能及器官指數的影響
2.2 不同處理方式的大豆替代魚粉對鱈魚體成分的影響由表3可知,日糧用20%豆粕、大豆濃縮蛋白和發酵豆粕替代魚粉對鱈魚機體總能、蛋白質、水分和粗灰分含量無顯著影響(P>0.05)。豆粕組鱈魚的體脂肪含量較大豆濃縮蛋白組和發酵豆粕組顯著提高44.53%和41.85%(P<0.05),但與對照組無顯著差異(P>0.05)。

表3 不同處理方式大豆替代魚粉對鱈魚體 成分的影響
2.3 不同處理方式大豆替代魚粉對鱈魚血液學及免疫指標的影響由表4可知,日糧添加不同處理的大豆替代魚粉對鱈魚血紅蛋白濃度、紅細胞、白細胞、血小板數量及血球容積的影響無顯著差異(P>0.05)。發酵豆粕組血液溶菌酶活性最高(P<0.05),豆粕和大豆濃縮蛋白組其次,對照組最低(P<0.05)。對照組、豆粕組和大豆濃縮蛋白組腎臟IL-8基因mRNA相對表達水平顯著高于發酵豆粕組(P<0.05),而豆粕組和大豆濃縮蛋白組腎臟TLR-22基因mRNA相對表達水平顯著高于對照組和發酵豆粕組(P<0.05)。

表4 不同處理方式大豆替代魚粉對鱈魚血液生化指標及免疫指標的影響
本試驗結果發現,以20%豆粕替代魚粉時鱈魚的飼料效率表現最佳,這與Hansen等(2007)報道的結果一致,其結果也顯示出鱈魚對植物蛋白的耐受性,具有良好的蛋白質消化率。Colburn等(2012)發現,用不同比例的豆粕或大豆濃縮蛋白替代50%的魚粉適合于幼大西洋鱈魚的生產。在本研究中,用20%發酵豆粕替代魚粉,鱈魚的飼料效率和特定生長率均不佳。豆粕組鱈魚肝臟和內臟脂肪指數顯著高于對照組,提示內臟組織器官的發育得到改善。
由于與消化相關的酶在魚的整個生命階段都可能發生變化,因此,使用經過測試的大豆成分對日糧配方進行改進是可能的。考慮到鱈魚由于這些因素的營養吸收相對復雜,有必要進一步評估這些大豆成分在鱈魚體內的消化率,以更好地解釋生長結果。因此,可以優化添加水平以提高生長性能(Aksnes等,2006)。盡管本研究未評估鱈魚對各種原料消化率的影響,但豆粕組鱈魚體脂肪含量顯著高于其他兩組大豆蛋白源。
血液生化指標顯示,血球容積、血紅蛋白、紅細胞、白細胞和血小板數量無顯著差異,這與Hansen等(2007)報道的結果一致。豆粕組和大豆濃縮蛋白組溶菌酶活性無顯著差異,其中對照組最低,這可能與鱈魚本身血清溶菌酶活性很低有關。本研究還檢測了腎組織內IL-8和TLR-22基因mRNA表達水平。IL-8是一種對白細胞具有趨化活性的促炎細胞因子,已被發現與大西洋鱈魚的應激反應有關(Caipang等,2008),而TLR-22是一種先天性免疫受體,與dsRNA和細菌病原體識別有關(Paria等,2018)。基于豆粕組鱈魚腎臟中這兩種基因mRNA相對表達量提高,提示免疫和應激反應有所改善。
用20%豆粕或大豆濃縮蛋白替代魚粉可以改善鱈魚生長性能,對體成分和血液學指標無負面影響,同時可提高TLR-22基因mRNA相對表達水平。總的來說,用豆粕或大豆濃縮蛋白替代魚粉可以降低飼料成本。