谷氨酰胺對冬毛期水貂生長性能、血清生化指標及抗氧化性能的影響

李柯汝，紀君波，孫建華，徐燕紅,，司志文，李文立*

（1.青島農業大學動物科技學院，山東青島 266109；2.山東省萊陽市農業農村局，山東萊陽 265200；3.山東菁華農牧發展有限公司，山東諸城 262201）

谷氨酰胺（Glutamine，Gln）在動物體內含量豐富，健康狀態下Gln 為非必需氨基酸，但在應激或病理狀態下，動物內源合成的Gln 不能滿足其自身需要，必須由外源補充，又被稱為條件性必需氨基酸[1]。許多研究表明，Gln 是腸黏膜上皮細胞和淋巴細胞的主要燃料，在促進受損傷腸道的修復以及維持正常的局部免疫功能中發揮著不可替代的作用[2-4]。Gln 還參與體內谷胱甘肽（GSH）的合成，具有清除體內各種氧自由基和過氧化物對細胞的損害、維持機體內環境穩定的作用[5]。

在人和動物機體中，Gln 是一種活性小肽，具有抗氧化、免疫以及參與某些物質吸收等多種功能[6]。Krebs[7]于 1935 年第一次發現哺乳動物腎臟具備合成和分解Gln 的能力，并強調指出雖然多數氨基酸都具備多種功能，但Gln 的功能最顯著。肖英平等[8]研究表明，Gln 能夠提高斷奶仔豬的腸道消化吸收能力，促進營養物質的消化率。李文立等[9]研究表明，Gln 能夠提高肉雞小腸的吸收能力。此外，Gln 也是細胞內氮的清除劑及生物合成許多重要物質（如核酸、核苷酸、氨基糖和蛋白質）的重要前體[10]。本試驗旨在研究Gln 對冬毛期水貂生長性能、血清生化指標及抗氧化性能的影響，為在冬毛期水貂基礎日糧中Gln 的應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 試驗選取140 日齡同性別體重相近的冬毛期短毛黑水貂（美國短毛黑與標準貂雜交后裔）120只，共分為5 組，每組24 個重復，每個重復1 只。其中對照組飼喂基礎日糧，試驗組在基礎日糧中分別添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8% Gln（由金維氨生物科技有限公司提供，有效含量為99%），基礎日糧組成及營養成分見表1。試驗在山東省青島市即墨區的某水貂養殖場進行，試驗時間為2018 年9 月24 日—2018 年12 月9 日，預試驗1 周，試驗期10 周。試驗前對棚舍、籠舍、地面等進行全面消毒，全期自由飲水和采食。

1.2 采血及血清制備 試驗結束后，各組隨機抽取接近于平均體重的公、母貂各6 只。采用剪趾尖法采集血樣3 mL，3 000 r/min 低溫離心10 min，離心后取上層血清，分裝于1.5 mL 離心管中，-80℃冷凍待測。

表1 基礎日糧組成及營養成分（干物質基礎）

1.3 測試指標及方法

1.3.1 生長性能指標 試驗期間每天記錄給料量和剩料量，分別統計公、母貂的平均日采食量；每周清晨進行空腹稱重1 次，分別統計公、母貂的平均日增重；并計算耗料增重比，統計死亡率。試驗結束后，各組隨機抽取接近于平均體重的公、母貂各6 只處死后，測得鼻尖到尾根的長度為體長，取皮后測得鼻尖到尾根的長度為皮長。

1.3.2 血清生化指標 葡萄糖（GLU）含量采用葡萄糖氧化酶法測定；肌酸激酶（CK）活性采用比色法測定；總蛋白（TP）含量采用考馬斯亮蘭法測定；尿素氮（UN）含量采用二乙酰一肟法。測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所，下同。

1.3.3 血清抗氧化指標 抑制羥自由基（·OH）能力采用比色法測定；總抗氧化能力（T-AOC）采用比色法測定；抗超氧陰離子自由基（O2-）能力采用化學比色法測定；超氧化物歧化酶（SOD）活性采用羥胺法測定；谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性采用比色法測定；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸（TBA）法測定；過氧化氫酶（CAT）活性采用鉬酸銨法測定。

1.4 統計分析 采用SPSS 17.0 軟件中單因素方差分析（One-Way ANOVA），LSD 法進行多重比較。試驗數據以平均值±標準差表示。P＜0.05 和P＜0.01 分別為差異顯著和極顯著水平。

2 結果

2.1 Gln 對水貂生長性能的影響 由表2 可知，公貂的平均日采食量、平均日增重、皮長和體長各組間差異均不顯著，但4 個試驗組的耗料增重比低于對照組（P＜0.05）。母貂的平均日采食量、平均日增重、耗料增重比、皮長和體長在各組間差異均不顯著。

2.2 Gln 對水貂血清生化指標的影響 由表3 可知，公貂血清中GLU、TP 含量以及CK 活性各組間差異均不顯著；但對照組UN 含量高于各試驗組（P＜0.05），其余各組間差異不顯著。母貂血清中GLU、TP 和UN 含量以及CK 活性各組間差異均不顯著。因此，水貂基礎日糧中添加不同水平的Gln 并不影響母貂血清生化指標。

表2 Gln 對公、母貂生長性能的影響

2.3 Gln 對水貂血清抗氧化指標的影響 由表4 可知，公貂血清抑制·OH 能力以及MDA 含量各組間差異不顯著。試驗組公貂血清抗O2-能力、CAT 活性以及T-AOC 能力各均高于對照組（P＜0.05），其余各組間無顯著差異。0.4%Gln 組和0.6%Gln 組公貂血清SOD 活性均高于其余各組（P＜0.05），0.2%Gln 和0.8%Gln 組高于對照組（P＜0.05）。0.4%、0.6%和0.8%Gln 組公貂血清GSHPx 活性高于0.2%Gln 組和對照組（P＜0.05），0.2%Gln組高于對照組（P＜0.05），其余各組間無顯著差異。

由5 表可知，0.6%Gln 組母貂血清抑制·OH 能力高于0.2%Gln 組和對照組（P＜0.01），0.6%Gln 組高于0.8%Gln 組（P＜0.05），其余各組間無顯著差異。母貂血清抗O2-能力以及GSH-Px 活性各組間差異不顯著。對照組母貂血清中MDA 含量高于各試驗組（P＜0.05），各試驗組間無顯著差異。各試驗組母貂血清T-AOC 能力均高于對照組（P＜0.01），其中0.6%Gln 組又高于0.2%Gln 組和0.8%Gln 組（P＜0.05）。各試驗組母貂血清SOD 活性高于對照組（P＜0.05），各試驗組間差異不顯著。各試驗組母貂血清CAT 活性均高于對照組（P＜0.01），0.2%Gln 組高于0.8%Gln 組（P＜0.01）、0.6%Gln 組（P＜0.05），其余各組間無顯著差異。

表3 Gln 對公、母貂血清生化指標的影響

表4 Gln 對公貂血清抗氧化指標的影響

表5 Gln 對母貂血清抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 Gln 對冬毛期水貂生長性能的影響 Gln 添加水平在動物日糧中的研究有很多。紀君波等[11]研究發現，在育成期水貂基礎日糧中添加0.4% Gln 有利于提高水貂的平均日采食量、平均日增重，并顯著降低耗料增重比；王錄軍等[12]研究表明，日糧中添加Gln 對肉兔采食量、日增重和飼料報酬均無顯著影響。本試驗結果也表明，在水貂基礎日糧中添加不同水平Gln 對水貂平均日采食量、平均日增重、皮長和體長均無顯著影響，但能顯著降低公貂耗料增重比。與育成期相比，冬毛期水貂骨骼生長期已過，由以骨骼發育、器官發育和體增長為主轉變為以毛皮生長發育為主，主要是毛皮的生長和脂肪的沉積，致使體增重緩慢[13-14]。

3.2 Gln 對冬毛期水貂血清生化指標的影響 本試驗結果表明，不同水平Gln 組水貂血清中的血糖含量無明顯變化，所以在冬毛期水貂基礎日糧中添加不同水平Gln不能對血清中的血糖含量產生明顯影響。TP 在血清固體成分中占比最大，且在水貂體內具有多種功能，一方面作為載體運輸物質，維持血管中的正常酸堿度和膠體滲透壓；另一方面參與機體免疫防護[1,15-16]。UN 可以反映出機體代謝蛋白質系統的健康程度[2,17-18]。很多研究表明日糧中添加Gln 能夠明顯提高機體血液中TP 含量，降低UN 含量，但對GLU 含量并沒有明顯影響[3]。本試驗結果表明，雖然在水貂基礎日糧中添加不同水平Gln 對公、母貂血清中GLU 含量和CK 活性沒有明顯影響，但有助于提高TP 含量，并明顯降低公貂UN 含量，表明Gln 不僅能夠維持機體內代謝環境相對穩定，還有助于提高蛋白質利用率。

3.3 Gln 對冬毛期水貂血清抗氧化性能的影響 T-AOC是衡量機體抗氧化能力的綜合性指標，反映機體自由基代謝狀態以及對外來刺激的代償能力[19]。MDA 又是機體氧化應激程度的主要標志物[15]。而機體內抗氧化物酶主要由GSH-Px、CAT 和SOD 組成。研究表明，Gln能夠影響機體內GSH-Px、CAT 和SOD 活性，促進GSH 合成，從而提高和維持機體內還原型GSH 水平[18]。而機體內全部自由基都是通過增加抗氧化酶活性來減少氧自由基產生的危害。黃冠慶等[17]研究表明，日糧中添加0.5%和0.8% Gln 能夠明顯提高30 日齡左右的黃羽肉雞血液中GSH-Px 活性，并降低MDA 含量，但其對SOD 活性沒有明顯影響。路靜等[20]研究表明，在日糧中添加Gln 能夠明顯提高肉雞血清GSH-Px、CAT 和SOD 活性，并且當日糧中Gln 添加水平為1.6%時，其活性最高。本試驗結果表明，在水貂基礎日糧中添加適量Gln 能夠顯著提高公貂血清SOD、CAT 及GSH-Px活性、T-AOC 能力、抗O2-能力；顯著提高母貂血清SOD、CAT 活性，并顯著降低MDA 含量，極顯著提高母貂抑制·OH 和T-AOC 能力，且在0.4%添加水平效果最佳。

4 結 論

本研究結果表明，冬毛期水貂基礎日糧中添加Gln能降低耗料增重比、MDA 含量以及提高機體的抗氧化性能，且添加水平為0.4%效果最佳。