黑水虻幼蟲干對肉雞生產性能、血清生化指標及雞肉養分含量的影響

趙 燕，侯鳳香，鄭遠博，林立焓，張慧慧，李圣才，金俊杰

（溫州市農業科學研究院動物科學研究所，浙江溫州 325000）

黑水虻是一種雙翅目水虻科昆蟲，幼蟲營腐生，能夠快速將畜禽糞便、餐廚垃圾等有機廢棄物分解轉化為自身的生物量。黑水虻含有較高的蛋白質、脂肪以及氨基酸、脂肪酸等，可作為蛋白質飼料應用于動物生產，因此引起了國內外高度關注。陳曉瑛等[1]研究表明，黑水虻幼蟲粉替代30% 魚粉不影響黃顙魚幼魚的生長性能和肌肉呈味氨基酸組成。張放等[2]研究發現，飼糧中添加25‰黑水虻蟲粉不影響生長豬的生產性能，可以替代生長豬基礎飼糧中的部分豆粕。Cutrigenelli等[3]用黑水虻幼蟲粉完全替代豆粕飼喂蛋雞，發現蛋雞采食量減少，營養物質消化率降低，但小腸酶活性與盲腸揮發性脂肪酸含量增加。以上研究基本都是將黑水虻幼蟲粉作為豆粕或魚粉替代物，研究其對動物各指標的影響[1-3]。近年來，黑水虻幼蟲補飼放養雞深受養殖戶歡迎。受雞生理行為影響，放養雞特別喜歡啄食黑水虻幼蟲，尤其是活蟲[4]。但目前活蟲在遠距離運輸上存在一定困難，蟲干能否替代活蟲補飼放養雞，尚未開展研究。本試驗旨在研究黑水虻幼蟲干對放養肉雞生產性能、健康狀況、腸道發育及雞肉養分含量的影響，以期為黑水虻幼蟲在放養雞生產上的應用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 黑水虻幼蟲由浙江昆微農業科技有限公司養殖基地用廚余垃圾飼養，幼蟲經分離干燥制成蟲干，其養分含量由廠家抽樣測定，見表1。

表1 黑水虻幼蟲干營養成分（風干基礎）

1.2 試驗設計與飼養管理 試驗雞為廣東香雞公雞，飼養于蒼南縣月樂農業開發有限公司。選取體重（196.22±0.42）g、健康狀況良好的15 d 雛雞1 440 只，隨機分成4 組，即對照組、2%蟲干組、4%蟲干組、6%蟲干組，每組5 個重復，每個重復72 只。4 組試驗雞分別置于4 個獨立的雞棚內，每個雞棚用鐵絲網隔成5 個獨立的區域，每個區域配套環境與面積相同的果桑林放養場地。每組試驗雞均在07:00 放養前、19:00 歸舍時補飼。預試14 d 后，開始在基礎飼糧中添加黑水虻幼蟲干，添加量分別為0（對照組）、2%、4%、6%。試驗雞自由采食、自由飲水，采用自然光照，免疫程序正常進行。正試期42 d。基礎飼糧調制與養分含量計算參照《雞的飼養標準-地方品種肉用雞的飼養標準》（ZB B 43005-86）和《蛋雞和肉雞配合飼料》（GB/T 5916-2008），其組成和營養成分見表2。

表2 基礎飼糧組成及營養成分（風干基礎）

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生長性能 試驗第1 天和第56 天（包括預試期，考慮到預試期試驗條件相同，并且雞群數量大，全部抓應激較大，所以正試期開始雞沒有稱重），每天09:00空腹稱重。每周記錄重復組試驗雞飼料消耗量。試驗結束后，分別計算每組試驗雞平均日增重（g/d）、平均日采食量（g/d）、耗料增重比（日采食量/日體增重）和蟲干消耗量（kg）。

1.3.2 血清生化指標 試驗結束后，在對照組、6%蟲干組的每個重復隨機取2 只雞，翅靜脈采血5 mL，靜置30 min，3 000 r/min 離心15min，取上層血清，置于離心管中，-20℃保存備用。采用VetTest-8008 生化儀進行谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、血糖（Glu）、膽固醇（Chol）、甘油三酯（TG）測定，試劑盒購自上海華澍生物有限公司。

1.3.3 臟器指數 試驗結束后，每個重復隨機取2 只雞（共計40 只）進行屠宰，打開腹腔，分離出心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟，稱重，計算臟器指數：

臟器指數=臟器質量（g）/宰前活重（kg）

1.3.4 小腸絨毛高度與隱窩深度 分離十二指腸、空腸、回腸，在每段腸道中斷取2 cm 左右腸道樣品，用生理鹽水將腸道內容物沖洗干凈，放到10% 中性福爾馬林固定液中常溫保存，以備制作石蠟切片。切片由北京博度恒益科技有限公司制作。切片正置光學顯微鏡（40×）下進行觀察、拍照，每個切片隨機抽取5 個典型視野（絨毛完整、走向平直）測量小腸絨毛高度、隱窩深度。

1.3.5 雞肉養分含量 取胸肌約50 g 左右置封口袋中，-20℃保存，用于測定雞肉水分、粗蛋白質、粗脂肪、氨基酸、脂肪酸含量。按照《食品安全國家標準 食品中水分的測定》（GB 5009.3-2016），采用直接干燥法測定水分；按照《食品安全國家標準 食品中粗蛋白質的測定》（GB 5009.15-2016），采用凱氏定氮法測定粗蛋白質；按照《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》（GB 5009.6-2016），采用索氏抽提法測定粗脂肪。氨基酸測定參照《食品安全國家標準 食品中氨基酸的測定》（GB 5009.124-2016），進行前處理，上機采用OPA 和FMOC 柱前衍生液相色譜法測定。脂肪酸測定參照《食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》（GB 5009.168-2016），采用歸一化法測定，上機采用氣相色譜-質譜聯用法。

1.4 統計分析 試驗數據采用SPSS17.0 軟件的One-Way ANOVA 程序進行方差分析，并采用LSD 法進行組間差異顯著性檢驗，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。試驗數據以平均值±標準差表示。

2 結果

2.1 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞生產性能的影響由表3 可知，添加黑水虻幼蟲干對肉雞平均日增重、平均日采食量、耗料增重比、蟲干消耗量影響不顯著。

表3 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞生產性能的影響

2.2 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞血液生化指標的影響由表4 可知，與對照組相比，6% 蟲干組肉雞ALT、AST、TP、ALB、GLO、Chol、TG 無顯著變化，但Glu升高31.72%（P＜0.01）。

表4 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞血液生化指標的影響

2.3 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞臟器指數的影響由表5 可知，黑水虻幼蟲干添加量對肉雞各臟器指數無顯著影響。6%蟲干組肉雞心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟指數均高于其他組。

表5 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞臟器指數的影響 g/kg

2.4 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞小腸絨毛高度與隱窩深度的影響 由表6 可知，黑水虻幼蟲干添加量對肉雞十二指腸、空腸的絨毛高度、隱窩深度及回腸隱窩深度無顯著影響。2%、4%、6% 蟲干組回腸絨毛高度分別比對照組高58.20%（P＜0.05）、13.58%（P＞0.05）、46.71%（P＜0.05），2%蟲干組分別比4%、6%蟲干組高39.28%（P＜0.05）、7.83%（P＞0.05）。

表6 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞腸道形態的影響 μm

2.5 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞雞肉養分含量的影響 由表7 可知，黑水虻幼蟲干添加量對雞肉水分、粗脂肪含量無顯著影響。2%、4%、6%蟲干組雞肉粗蛋白質含量較對照組分別增加12.30%（P＜0.05）、10.00%（P＞0.05）、8.42%（P＞0.05）。

表7 不同黑水虻幼蟲干添加量對雞肉養分含量的影響（鮮肉） %

由表8 可知，隨著黑水虻幼蟲干添加量的增加，雞肉氨基酸總量呈升高趨勢，2%、4%、6% 蟲干組較照組分別提高3.26%（P＞0.05）、3.77%（P＞0.05）、6.10%（P＜0.05）。2%、6% 蟲干組甘氨酸較對照組分別增加17.92%（P＜0.05）、22.64%（P＜0.05）。2%、4%蟲干組亮氨酸較對照組分別增加4.43%（P＞0.05）、12.81%（P＜0.01）。與對照組相比，2%、4%、6% 蟲干組苯丙氨酸分別增加11.46%（P＞0.05）、28.13%（P＜0.01）、11.46%（P＞0.05），酪氨酸分別增加29.21%（P＜0.01）、37.08%（P＜0.01）、22.47%（P＜0.01），半胱氨酸分別增加53.33%（P＜0.01）、40.00%（P＜0.05）、66.67%（P＜0.01），組氨酸分別增加56.86%（P＜0.01）、50.98%（P＜0.01）、52.94%（P＜0.01）。丙氨酸、絲氨酸、脯氨酸、谷氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、蘇氨酸在對照組與蟲干組間無顯著差異。蟲干組精氨酸降低，其中4%蟲干組低于對照組（P＜0.05）。

由表9 可知，雞肉長鏈脂肪酸含量呈現一定變化。與對照組相比，2%、4%、6% 蟲干組C14:0 分別提高71.51%（P＜0.05）、55.38%（P＞0.05）、17.20%（P＞0.05），C16:0 分別提高3.03%（P＞0.05）、2.36%（P＞0.05）、4.82%（P＜0.05），C17:0 分別提高57.89%（P＞0.05）、65.79%（P＞0.05）、86.84%（P＜0.05），C17:1 分別增加0.25（P＞0.05）、0（P＞0.05）、0.30（P＜0.05）。

表8 不同黑水虻幼蟲干添加量對雞肉氨基酸含量的影響 g/100g 鮮肉

表9 不同黑水虻幼蟲干添加量對雞肉長鏈脂肪酸含量的影響（干物質基礎） %

3 討 論

3.1 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞生產性能的影響本試驗中黑水虻幼蟲干對肉雞平均日增重、平均日采食量、耗料增重比影響不顯著，與Moula 等[4]用8% 黑水虻鮮蟲替代基礎飼糧后肉雞平均日增重、耗料增重比無顯著變化的結果一致。而Marono 等[5]研究發現黑水虻幼蟲粉替代豆粕，蛋雞采食量極顯著降低；Nekrasov等[6]則發現飼糧中添加黑水虻幼蟲有助于提高生長豬的平均日增重，與本研究結果相悖，可能與動物品種、黑水虻收獲期、加工方式有關。與幼蟲期收獲的黑水虻相比，預蛹期收獲的黑水虻含有較高的甲殼素[7]，較高的甲殼素含量會使飼料蛋白質消化率降低[3]，導致動物采食量降低，從而降低日增重。同時，黑水虻的脫脂程度也會影響飼糧消化率，低脫脂黑水虻幼蟲粉飼糧組肉雞粗脂肪消化率與代謝能顯著升高[8]。本試驗用黑水虻在預蛹量達10%時收獲，未脫脂。

3.2 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞血液生化指標的影響 血液生化指標是衡量動物是否健康的重要指標，可以反映動物的生理機能和代謝狀況。血清AST、ALT活性通常與肝臟損傷有關，其活性升高標志著肝臟在一定程度受損。TP 濃度包括ALB 與GLO，與機體免疫功能、肝腎功能有密切關系。本試驗中不同組間肉雞血清AST、ALT、TP、ALB 與GLO 無顯著變化，結合對臟器指數的影響，說明黑水虻幼蟲干不會對肝、腎健康及機體免疫功能造成影響。本試驗結果與Belghit 等[9]、Wallace 等[10]研究結果一致，即黑水虻幼蟲粉替代魚粉對大西洋鮭魚、珍珠雞血清ALT、AST、ALB、TP、Chol、TG 無影響。但是，當黑水虻幼蟲粉替代魚粉量達到66% 時大西洋鮭魚Glu 顯著升高[9]。本研究中當蟲干添加量達到6%時，血清Glu 含量極顯著升高，可能與黑水虻含有較豐富的中鏈脂肪酸有關，中鏈脂肪酸主要是C16-C12，被認為是生理活性化合物，被優先用作能源，減少脂肪組織的沉積[11]；本試驗Glu 升高與Chol、TG 降低相符，但其代謝途徑及其作用機理還有待于深入研究。

3.3 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞臟器指數的影響關于黑水虻對雞臟器指數影響的研究較少。Moula 等[4]研究表明，黑水虻活蟲對本地雞胃、心、肝、脾重量沒有影響。Biasato 等[12]研究發現，黑水虻幼蟲粉飼糧對仔豬胃、腸、肝、腎、脾、肺各組織病理學評分無顯著影響。這與本試驗結果一致。結合血清生化指標結果，初步判斷，黑水虻幼蟲干不會對肉雞各臟器組織的生長發育造成影響。

3.4 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞小腸絨毛高度與隱窩深度的影響 小腸是動物消化吸收營養物質的重要器官，消化吸收的主要部位是腸道絨毛和隱窩。一般來說，絨毛高度越高，腸道與食糜接觸的上皮細胞的表面積越大，消化酶分泌增多，營養物質的吸收率變強；而隱窩深度越淺，說明腸上皮細胞的成熟率越高，細胞分泌的消化液增加，吸收營養物質的能力變強。Cutrignelli 等[3]研究發現，黑水虻幼蟲粉能夠促進蛋雞十二指腸絨毛高度增加，卻抑制了空腸、回腸絨毛的生長。Spranghers等[13]研究表明，黑水虻飼糧對斷奶仔豬空腸絨毛高度與隱窩深度無影響。研究結果的不同可能與飼糧構成、理化性質、動物品種、日齡等有關。本試驗中，隨蟲干添加量的增加，肉雞十二指腸、空腸絨毛高度有減低趨勢，但回腸絨毛高度顯著增加。

3.5 不同黑水虻幼蟲干添加量對肉雞雞肉養分含量的影響 一般來說，動物肌肉養分構成直接受飼糧影響。陳曉瑛等[1]研究發現，黑水虻幼蟲粉替代魚粉有利于增加黃顙魚幼魚肌肉粗蛋白質、氨基酸含量。Belghit 等[9]通過用黑水虻幼蟲粉替代魚粉飼喂大西洋鮭魚，發現魚體中C12:0、n-3/n-7 隨替代量增加而顯著增加。Li等[11]研究表明，黑水虻油能夠提高鯉魚肌肉C12:0、C14:0、C22:6n-3 含量。但也有研究表明，采食黑水虻飼糧后，動物肌肉粗蛋白質、氨基酸、粗脂肪[14]或脂肪酸含量[4]沒有顯著變化。本研究表明，黑水虻蟲干能夠顯著提高雞肉粗蛋白質、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、組氨酸與C14:0、C16:0、C17:0、C17:1 含量。飼養基質不同，黑水虻蟲體養分含量不同，可能導致了研究結果的不一致。變質果蔬或牛糞飼養的黑水虻幼蟲粗纖維含量較高，而以廚余垃圾為食的黑水虻幼蟲脂肪含量較高[7]。本試驗中黑水虻由廚余垃圾飼養而成，其粗蛋白質、粗脂肪含量相對較高。

4 結 論

本研究結果表明，肉雞飼糧中補飼黑水虻幼蟲干不影響肉雞生產性能，可以提高雞肉蛋白質、氨基酸、脂肪酸含量，在6%添加量范圍內，不會對肉雞肝、腎功能造成健康影響。