999精品在线视频,手机成人午夜在线视频,久久不卡国产精品无码,中日无码在线观看,成人av手机在线观看,日韩精品亚洲一区中文字幕,亚洲av无码人妻,四虎国产在线观看 ?

榿葉唐棣花色苷分離純化及抗氧化與抑菌活性1)

2021-02-10 10:49:26張卓睿崔金麒趙羚汐賈淇舒楊春曉王琦
關(guān)鍵詞:質(zhì)量

張卓睿 崔金麒 趙羚汐 賈淇舒 楊春曉 王琦

(北華大學(xué),吉林,132013)

姜貴全 彭鈺博

(北華大學(xué)木質(zhì)材料科學(xué)與工程省重點實驗室(北華大學(xué))) (澳大利亞阿德萊德大學(xué))

榿葉唐棣(Amelanchieralnifolia)是薔薇科唐棣屬落葉小喬木或灌木,為北美洲內(nèi)陸的重要經(jīng)濟(jì)林樹,目前在我國遼寧、吉林、黑龍江、山西、陜西、寧夏、內(nèi)蒙、新疆、青海等省區(qū)均有引種栽培[1]。榿葉唐棣果實為小漿果,形似藍(lán)莓,主要營養(yǎng)物質(zhì)也與藍(lán)莓極為相近,花色苷、原花青素、綠原酸等活性成分含量較高[2]。近年來,隨著對榿葉唐棣果實中活性物質(zhì)組成、含量及功能性研究的逐步深入,榿葉唐棣的種植及果實深加工技術(shù)也得到了迅速發(fā)展[1]。花色苷屬于水溶性的天然色素,是一種多酚類化合物,由花色素和糖以糖苷鍵結(jié)合而成,其基本結(jié)構(gòu)單元是C6-C3-C6骨架構(gòu)成的2-苯基苯并吡喃[3],具有抗氧化[4-5]、抗突變[6]、抗腫瘤[7-8]、預(yù)防心血管疾病[9]、抗炎癥[10]和保護(hù)視力[11]等功效,已逐漸成為植物學(xué)、藥學(xué)及營養(yǎng)學(xué)的研究熱點。榿葉唐棣花色苷粗提物中含有大量的糖類、蛋白質(zhì)類、脂類及色素等雜質(zhì)[3],嚴(yán)重影響花色苷的純度,若要深入地研究其生物學(xué)活性并開發(fā)相關(guān)產(chǎn)品,則必須對花色苷粗提物進(jìn)行分離和純化。目前,花色苷的純化方法主要用大孔樹脂層析法、凝膠層析法、C18反相色譜法等[3]。大孔樹脂是一類高分子吸附分離介質(zhì),具有高穩(wěn)定性、高選擇性、操作簡單、成本低廉、適于工業(yè)化生產(chǎn)[12-13]等特點,是當(dāng)前純化天然產(chǎn)物最常采用的一種分離技術(shù),已被廣泛應(yīng)用于花色苷[13]、多糖[14]、多酚[15]等活性成分的分離純化。本文對榿葉唐棣花色苷粗提物在大孔樹脂上的吸附—解吸特性進(jìn)行了研究,優(yōu)選出了最佳的分離純化條件,結(jié)合高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用檢測技術(shù)對純化組分進(jìn)行了鑒定分析,并評價了純化物的抗氧化活性和抑菌性,為榿葉唐棣花色苷的深入研究及開發(fā)利用提供了理論依據(jù),具有一定的實際應(yīng)用價值和意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

榿葉唐棣花色苷提取液:稱取榿葉唐棣果100 g,破碎后加入體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇溶液1 L,在280 W條件下超聲提取30 min,提取液以8 000 r/min離心分離5 min,取上清液,在低于40 ℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,濃縮液按1∶1的體積比加入乙酸乙酯萃取,除去脂溶性物質(zhì),再在35 ℃條件下旋轉(zhuǎn)減壓濃縮除去乙酸乙酯,濃縮液過0.45 μm膜后,得到榿葉唐棣花色苷粗提液,冷凍干燥,密封保存。

HP-2MGL型大孔樹脂購于日本三菱公司;XAD7HP型大孔樹脂購于美國羅門哈斯公司;AB-8型、X-5型、D101型大孔樹脂購于安徽三星樹脂科技有限公司;XDA-8型、LSA-10型大孔樹脂購于西安樸天吸附材料有限公司;HB-16型、HB1600型、XAD-1600型大孔樹脂購于上海旻永實業(yè)有限公司;甲酸、甲醇、乙醇購于中國醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司,均為色譜純;DPPH自由基購于美國Sigma公司;維生素C購于天津尖峰生物制品有限公司;其他化學(xué)試劑購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,均為分析純;大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌由北華大學(xué)林學(xué)院微生物實驗室提供。

試驗流程:

圖1 實驗設(shè)計流程圖

1.2 榿葉唐棣花色苷的分離純化

大孔樹脂的預(yù)處理:先將樹脂用無水乙醇浸泡24 h,然后用超純水沖洗至無醇味,再分別用1 mol/L的HCl和NaOH分別浸泡3 h,超純水沖洗至pH中性,最后置于砂芯漏斗中,真空抽干備用[16]。

大孔樹脂的靜態(tài)吸附—解吸試驗。

(1)大孔樹脂的篩選:分別稱取預(yù)處理后的AB-8、X-5、D-101、LSA-10、XAD-7HP、XDA-8、XDA-1600、HB-16、HB-1600、HP2MGL共10種型號大孔樹脂0.5 g于250 mL具塞錐形瓶中,各加入質(zhì)量濃度為0.125 g/L花色苷溶液20 mL,于25 ℃、100 r/min的恒溫振蕩器中振蕩24 h,抽濾,采用pH示差法[17]測定濾液中花色苷的質(zhì)量濃度,同時向吸附平衡的樹脂中各加入60%乙醇20 mL,于25 ℃、100 r/min的恒溫振蕩器中振蕩24 h,抽濾,pH示差法測定濾液中花色苷的質(zhì)量濃度。按公式(1)、(2)計算不同型號樹脂的吸附率和解吸率,考察不同樹脂對榿葉唐棣花色苷的吸附和解吸情況。

(1)

(2)

式中:A為吸附率(%);Co為花色苷溶液初始質(zhì)量濃度(g/L);Ce為樹脂吸附平衡時,抽濾液中花色苷質(zhì)量濃度(g/L);D為解吸率(%);Cd為解吸液中花色苷質(zhì)量濃度(g/L);Vd為解吸液體積(mL);Vi為花色苷溶液體積(mL)。

(2)吸附時間對吸附率的影響:精確稱取篩選出的2種大孔樹脂各0.5 g,置于具塞錐形瓶中,各加入20 mL質(zhì)量濃度為0.125 g/L花色苷溶液,于25 ℃、100 r/min的振蕩器中振蕩,每隔1 h吸取2 mL,測定花色苷的質(zhì)量濃度并計算吸附率,考察吸附時間對樹脂吸附效果的影響。

(3)上樣質(zhì)量濃度對吸附率的影響:精確稱取5份XDA-8型大孔樹脂各0.5 g,置于具塞錐形瓶中,各加入20 mL質(zhì)量濃度分別為0.050、0.100、0.150、0.200、0.250 g/L的花色苷提取液,于25 ℃、100 r/min的振蕩器中振蕩4 h,抽濾,測定濾液中花色苷的質(zhì)量濃度,計算吸附率,以確定最佳上樣質(zhì)量濃度。

(4)上樣液pH值對吸附率的影響:精確稱取5份XDA-8型大孔樹脂各0.5 g,置于具塞錐形瓶中,分別加入pH=1~5、質(zhì)量濃度為0.100 g/L花色苷溶液各20 mL,于25 ℃、100 r/min的恒溫振蕩器中振蕩4 h,抽濾,測定濾液中花色苷的質(zhì)量濃度,計算吸附率,以確定最佳上樣pH值。

大孔樹脂的動態(tài)吸附—解吸試驗。

(1)上樣流速的試驗分析:稱取4份等量的預(yù)處理后的大孔樹脂分別濕法裝柱,裝柱體積為36 mL,去離子水平衡4柱體積后,按不同流速分別將pH=2、質(zhì)量濃度為0.100 g/L的花色苷溶液通入樹脂柱,流出液每10 mL收集一管并測定花色苷質(zhì)量濃度,當(dāng)達(dá)到泄漏點時停止進(jìn)樣,考察不同上樣流速對樹脂吸附效果的影響。

吸附量=(上樣質(zhì)量濃度×上樣體積-流出液質(zhì)量濃度×流出液體積)/樹脂質(zhì)量。

(3)

(2)洗脫流速的試驗分析:稱取3份預(yù)處理后的大孔樹脂分別濕法裝柱,裝柱體積為36 mL,去離子水平衡4柱體積后,均按2柱體積/h的流速向?qū)游鲋型ㄈ雙H=2、質(zhì)量濃度0.100 g/L的花色苷溶液300 mL,然后分別以不同的流速用去離子水沖洗4柱體積,30%、50%、70%、90%乙醇溶液各沖洗4柱體積,分步收集乙醇洗脫部分的流出液,按公式(4)、(5)計算花色苷的回收率和純度,將各洗脫梯度的回收率累計加和得到不同洗脫流速下的累計回收率,綜合分析花色苷的純度、回收率和累計回收率3項指標(biāo),確定不同洗脫流速對花色苷純化的影響。

(4)

(5)

式中:m1為洗脫液中花色苷的總質(zhì)量(mg);mo為通入樹脂柱中的花色苷總質(zhì)量(mg);ms為水洗液中花色苷總質(zhì)量(mg);C為花色苷質(zhì)量濃度(g/L);V為花色苷溶液體積(mL);md為花色苷凍干粉的質(zhì)量(mg)。

1.3 榿葉唐棣花色苷的成分鑒定

采用超高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對純化樣品1進(jìn)行分析鑒定。

UPLC條件:設(shè)備為WATERS UPLC ACQUITY。色譜柱為ACQUITY UPLC BEHC18色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);柱溫50 ℃;流動相為0.2%甲酸水溶液(A)—甲醇(B),A為80%,B為20%;進(jìn)樣量為20 μL;流速為0.25 mL/min;檢測波長為520 nm。

質(zhì)譜條件:設(shè)備為MICROMASS Quattro Premier XE。電噴霧離子源,質(zhì)譜采用正離子掃描方式,質(zhì)量掃描范圍質(zhì)核比為50~500,毛細(xì)管電壓3.10 kV,離子源溫度110 ℃,干燥氣溫度380 ℃。

1.4 抗氧化能力的測定

分別檢測了純化樣品1的還原能力(普魯士藍(lán)法[18]),DPPH自由基清除能力(比色法[19])和·OH自由基清除能力(鄰二氮菲-Fe2+法[20])。

1.5 抑菌能力的測定

以大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌為供試菌株,將活化后的菌株配制成體積為105~106CFU/mL的菌懸液[21],采用濾紙片法[22]測定質(zhì)量濃度為1.000、0.500、0.250、0.125 g/L的純化樣品1水溶液對各菌株的抑菌圈大小,采用二倍稀釋法[23]測定純化樣品1對各菌株的最低抑菌濃度(MIC)。

2 結(jié)果與分析

2.1 榿葉唐棣花色苷的分離純化

2.1.1 大孔樹脂的靜態(tài)吸附—解吸試驗

大孔樹脂的篩選結(jié)果。相同試驗條件下,10種樹脂對榿葉唐棣花色苷的吸附、解吸效果見表1所示。

表1 不同大孔樹脂對花色苷的吸附率和解吸率

大孔樹脂的極性是影響其吸附性的重要因素,如果樹脂與化合物的極性越接近,二者間所產(chǎn)生的范德華力和氫鍵作用越強(qiáng),大孔樹脂對待純化物的選擇性吸附性能越強(qiáng),分離效果越好,但若化合物與樹脂形成死吸附,又會很難被洗脫下來,因此,分別選擇了極性HB-16、XDA-8,中等極性XDA-1600、HB-1600、HP2MGL,弱極性AB-8、XAD-7HP、LSA-10和非極性X-5、D-101共10種大孔樹脂,同時考察各樹脂對樣品的吸附與解吸情況。由表1可以看出,不同類型的樹脂對花色苷的吸附程度不同,吸附率最高的是XDA-8型樹脂,為(85.2±1.63)%,其次是樹脂HB-16,為(82.1±1.75)%;而從各種樹脂的解吸情況來看,樹脂XDA-7HP和HP2MGL解吸效果最好,解吸率分別為(81.3±2.16)%和(78.3±1.29)%,但兩種樹脂對榿葉唐棣花色苷的吸附能力較差,無法達(dá)到理想的分離效果,而HB-16型樹脂的解吸率僅次于二者,為(77.7±1.57)%,XDA-8再次之,解吸率為(75.8±1.66)%。綜合考慮,篩選出XDA-8型和HB-16型兩種大孔樹脂進(jìn)行吸附時間的試驗分析。

吸附時間對吸附率的影響。時間對兩種大孔樹脂吸附效果的影響見表2所示。從表2可以看出,XDA-8型大孔樹脂對榿葉唐棣花色苷的吸附飽和速率相對較快,在吸附4 h后基本達(dá)到平衡,吸附率為(84.7±1.92)%,之后再延長時間,吸附率基本保持不變,分析其原因,可能是由于XDA-8型大孔樹脂具有高比表面活性,且所含的酯基基團(tuán)與榿葉唐棣花色苷中的酚羥基極易形成氫健,因而表現(xiàn)出較好的吸附性能;而HB-16型大孔樹脂隨著時間的延長,吸附率逐漸增大,吸附8 h后仍有繼續(xù)增加的趨勢,吸附平衡耗時較長,分離純化效率低,不適合于生產(chǎn)實際應(yīng)用。因此,優(yōu)選出XDA-8型大孔樹脂作為分離純化榿葉唐棣花色苷的最佳樹脂。

表2 吸附時間對樹脂吸附效果的影響

上樣質(zhì)量濃度對吸附率的影響。XDA-8型大孔樹脂對榿葉唐棣花色苷的吸附效果還受樣品質(zhì)量濃度的影響。在花色苷質(zhì)量濃度0.05~0.25 g/L內(nèi),隨著質(zhì)量濃度的增加,其在XDA-8型大孔樹脂上的吸附率先增大后減小。當(dāng)榿葉唐棣花色苷質(zhì)量濃度為0.100 g/L時,XDA-8型大孔樹脂吸附率達(dá)到最大值,為(85.9±2.01)%,之后再繼續(xù)增加樣品濃度,樹脂吸附率不升反降,這是由于上樣質(zhì)量濃度過高時,達(dá)到吸附飽和的樹脂無法繼續(xù)吸附樣液中過量的花色苷,致使吸附率迅速下降,而且樣品質(zhì)量濃度越高,所含雜質(zhì)也越多,容易堵塞樹脂孔徑,導(dǎo)致吸附效果不佳。因此,確定適宜的上樣質(zhì)量濃度為0.100 g/L。

上樣pH值對吸附率的影響。pH值的變化會導(dǎo)致花色苷的溶解性和極性發(fā)生改變,而在酸性環(huán)境中,花色苷中的酚羥基電離減少,使其多以分子形式存在,穩(wěn)定性好[24],更有利于XDA-8型大孔樹脂對其吸附。通過試驗分析發(fā)現(xiàn),在pH=1~5內(nèi),隨著pH值的增加,榿葉唐棣花色苷在XDA-8型大孔樹脂上的吸附率先增加后減小。當(dāng)花色苷溶液pH=2.0時,吸附率最高,為(87.3±2.11)%。因此,確定適宜的上樣pH值為2.0。

2.1.2 大孔樹脂的動態(tài)吸附—解吸試驗

上樣流速的試驗結(jié)果。樹脂純化過程中,當(dāng)流出液質(zhì)量濃度為上樣液質(zhì)量濃度10%左右時,認(rèn)為樹脂的吸附量已達(dá)到飽和,此時稱為泄露點。從表3可以看出,上樣流速1柱體積/h的泄露點出現(xiàn)最晚,當(dāng)流出液體積為(370±2.1)mL時樹脂吸附達(dá)到飽和,吸附量為(26.24±0.39)mg/g,雖然吸附效果是所有試驗組中最好的,但上柱用了(612±3.5)min,耗時過長,是2柱體積/h的2.7倍,吸附量卻僅比2柱體積/h多20.88%,而吸附時間越長越易出現(xiàn)死吸附現(xiàn)象,影響后面大孔樹脂的洗脫[25];上樣流速2柱體積/h的吸附量僅次于1柱體積/h,為(20.76±0.27)mg/g,上柱時間(225±1.3)min<4 h,是3柱體積/h的1.8倍,但吸附量比3柱體積/h高出51.11%;上樣流速3柱體積/h和4柱體積/h的漏點出現(xiàn)較早,但吸附量皆較低,分別為10.15±0.44、8.39±0.34,可見過快的上樣速度會使花色苷未被充分吸附就流出了層析柱,達(dá)不到較好的吸附分離效果。綜合考慮純化效率和樹脂吸附飽和等方面的因素,選擇適宜的上樣流速為2柱體積/h。

表3 不同上樣流速對樹脂吸附效果的影響

洗脫流速的試驗結(jié)果。由表4可知,在流速4柱體積/h條件下,70%乙醇洗脫梯度所得花色苷純度最高,為40.48%,但該梯度花色苷回收率較低,僅為8.12%,無實際應(yīng)用價值,所以不能作為最佳洗脫條件;而流速3柱體積/h、50%乙醇洗脫梯度所得的花色苷純度是39.55%,回收率為40.13%,花色苷的純度和回收率都較好,且該洗脫流速的花色苷累計回收率為91.16%,是所有流速中最高的。因此,本實驗選用3柱體積/h的流速作為最佳洗脫流速。

表4 不同洗脫流速的影響

2.1.3 榿葉唐棣花色苷純化物的制備

將預(yù)處理后的XDA-8型大孔樹脂濕法裝柱,去離子水平衡4柱體積后,將pH=2、質(zhì)量濃度為0.100 g/L的花色苷溶液按2柱體積/h的流速通入大孔樹脂柱,待流出液達(dá)到泄露點時停止進(jìn)樣,以3柱體積/h的流速用去離子水沖洗4柱體積,30%、50%、70%、90%乙醇溶液各沖洗4柱體積,分步收集各梯度的洗脫液,將50%乙醇洗脫部分在低于40 ℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇,濃縮液冷凍干燥24 h,制得純化樣品1。

2.2 超高效液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用結(jié)果

純化樣品1在520 nm處的液相色譜圖如圖2所示。在520 nm檢測波長下,純化樣品1主要含有3種組分,出峰時間集中在8~16 min內(nèi),其中保留時間在8.92和15.82 min為純化樣品1的兩種主要組分,保留時間在11.12 min的組分含量相對較少。3種組分的質(zhì)譜圖見圖3所示。

圖2 純化樣品在520 nm處的色譜圖

由圖3可知,保留時間8.92 min組分的質(zhì)譜圖中,檢測到了矢車菊色素的特征離子質(zhì)核比287[26],且其母離子質(zhì)核比449.4與子離子質(zhì)核比287相差162,是失去1分子葡萄糖苷的相對分子量,由此初步推斷此化合物為矢車菊素-3-O-葡萄糖苷[27];保留時間11.12 min組分的母離子質(zhì)核比465.4,在能量碰撞下失去1分子葡萄糖苷得到子離子質(zhì)核比303.2[M-162]+,而質(zhì)核比303.2為飛燕草素的特征離子,依此初步推斷此化合物為飛燕草素-3-葡萄糖苷[28];保留時間15.82 min組分的子離子質(zhì)核比331.3是錦葵素的特征離子,與母離子質(zhì)核比493.4相差162,說明母離子在能量碰撞下脫去了1分子葡萄糖苷,因此初步推測此化合物為錦葵素-3-葡萄糖苷[26]。

2.3 榿葉唐棣花色苷的抗氧化活性

2.3.1 還原能力

由表5可知,在測定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)(5~15 mg/L),純化后的榿葉唐棣花色苷還原能力遠(yuǎn)高于同質(zhì)量濃度下的維生素C,且還原能力與質(zhì)量濃度呈明顯的量效關(guān)系,即隨著質(zhì)量濃度的增大,還原能力也隨著增強(qiáng)。分析原因可能是因為榿葉唐棣花色苷純化樣品中矢車菊素-3-葡萄糖苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,而矢車菊素B環(huán)含有2個羥基,故具有較強(qiáng)的抗氧化活性[29]。

表5 純化樣品的還原能力

2.3.2 DPPH·的清除能力

由表6可以看出,在測定質(zhì)量濃度5~100 mg/L范圍內(nèi),花色苷清除DPPH·的能力要遠(yuǎn)高于同質(zhì)量濃度的維生素C。當(dāng)花色苷質(zhì)量濃度小于25 mg/L時,隨著花色苷濃度的增加,DPPH·清除率隨之急劇增大;當(dāng)花色苷質(zhì)量濃度大于25 mg/L時,DPPH·清除率仍隨花色苷質(zhì)量濃度的增加而增大,但增加趨勢趨于緩,當(dāng)質(zhì)量濃度為100 mg/L時,DPPH·清除率可達(dá)到(97.4±2.04)%。

2.3.3 ·OH的清除能力

在氧自由基中,·OH最為活潑,能夠迅速破壞生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA等物質(zhì),因此危害極大。由表7可以看出,榿葉唐棣花色苷具有較強(qiáng)的清除·OH能力,·OH清除率要高于同質(zhì)量濃度的Vc,在測定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)(5~50 mg/L),隨花色苷質(zhì)量濃度增加,其清除·OH能力逐漸增大,在花色苷質(zhì)量濃度為50 mg/L時,·OH清除率可達(dá)到(95.6±1.74)%。

2.4 榿葉唐棣花色苷的抑菌活性

2.4.1 榿葉唐棣花色苷的抑菌圈

純化后的榿葉唐棣花色苷的抑菌活性見表8所示。

表8 榿葉唐棣花色苷對3種供試菌的抑菌圈大小

從表8可以看出,純化后的榿葉唐棣花色苷對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌均有一定的抑制作用,由抑菌圈直徑大小可分析出其對金黃色葡萄球菌的抑制能力最強(qiáng),大腸桿菌次之,對枯草芽孢桿菌的抑制能力相對較弱。在測定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)(0.125~1.000 g/L),抑菌效果隨著花色苷質(zhì)量濃度的增加而增大,當(dāng)花色苷質(zhì)量濃度為1 g/L時,對3種供試菌株的抑菌圈直徑均達(dá)到最大值,其中對大腸桿菌的抑菌圈直徑為(15.2±0.15)mm,對枯草芽孢桿菌的抑菌圈直徑為(14.9±0.12)mm,對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為(16.7±0.19)mm。

2.4.2 榿葉唐棣花色苷的最低抑菌質(zhì)量濃度(MIC)

從表9可以看出,純化后的榿葉唐棣花色苷對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度為0.125 g/L,對大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.250 g/L,對枯草芽孢桿菌的最低抑菌濃度為0.500 g/L。雖然針對不同的菌種,榿葉唐棣花色苷純化物的抑制效果略有不同,但均可起到抑制作用,大腸桿菌屬于革蘭氏陰性菌,枯草芽孢桿菌與金黃色葡萄球菌屬于革蘭氏陽性菌,說明榿葉唐棣花色苷對細(xì)菌具有一定的抑制作用。

表9 榿葉唐棣花色苷對3種供試菌的最低抑菌質(zhì)量濃度

3 結(jié)論

利用XDA-8型大孔樹脂分離純化了榿葉唐棣花色苷,確定最佳的純化工藝條件為:將pH=2、質(zhì)量濃度為0.100 g/L的花色苷溶液按2柱體積/h的流速通入XDA-8型大孔樹脂柱,待樹脂吸附飽和后,先通入去離子水沖洗4柱體積,然后按3柱體積/h的流速分別用30%、50%、70%、90%乙醇溶液各沖洗4柱體積,分步收集各梯度的洗脫液。其中50%乙醇洗脫部分的花色苷純度可達(dá)到39.55%,經(jīng)分析檢測,鑒定出其主要成分為矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、飛燕草素-3-葡萄糖苷和錦葵素-3-葡萄糖苷。通過抗氧化試驗,確定榿葉唐棣花色苷純化物具有較好的抗氧化性,其還原能力、清除DPPH自由基和OH自由基能力均優(yōu)于同質(zhì)量濃度的維生素C。而經(jīng)過抑菌性實驗,發(fā)現(xiàn)榿葉唐棣花色苷對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌皆可起到一定的抑菌效果。本研究結(jié)果能為榿葉唐棣花色苷的產(chǎn)品開發(fā)提供理論依據(jù),具有一定的研究價值及意義。今后可以利用更精細(xì)的分離手段對榿葉唐棣花色苷組分進(jìn)行精制,結(jié)合UPLC-MS和NMR等檢測手段進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析,開展更深入的研究。

猜你喜歡
質(zhì)量
聚焦質(zhì)量守恒定律
“質(zhì)量”知識鞏固
“質(zhì)量”知識鞏固
質(zhì)量守恒定律考什么
做夢導(dǎo)致睡眠質(zhì)量差嗎
焊接質(zhì)量的控制
關(guān)于質(zhì)量的快速Q(mào)&A
初中『質(zhì)量』點擊
質(zhì)量投訴超六成
汽車觀察(2016年3期)2016-02-28 13:16:26
你睡得香嗎?
民生周刊(2014年7期)2014-03-28 01:30:54
主站蜘蛛池模板: 97国产在线观看| 欧美日韩一区二区三区四区在线观看| 成年A级毛片| 欧美成人国产| 精品国产网站| 无码中文AⅤ在线观看| 一本色道久久88综合日韩精品| 就去吻亚洲精品国产欧美| 久久毛片网| 91精品国产一区| 欧美综合成人| 亚洲精品不卡午夜精品| 成年人久久黄色网站| 日本道综合一本久久久88| 毛片三级在线观看| 成人永久免费A∨一级在线播放| 91久久国产综合精品女同我| 伊人91视频| 91破解版在线亚洲| 国产毛片高清一级国语| 亚洲人成色在线观看| 青青久视频| 国产99视频在线| 亚洲欧美人成电影在线观看| 日本妇乱子伦视频| 欧美在线视频不卡第一页| 91娇喘视频| 国产日韩精品一区在线不卡| 国产农村妇女精品一二区| 中文字幕亚洲乱码熟女1区2区| 91亚瑟视频| 国产成熟女人性满足视频| 高清无码一本到东京热| 久久综合九九亚洲一区| 亚洲天堂网视频| 小13箩利洗澡无码视频免费网站| 欧美五月婷婷| 人妻夜夜爽天天爽| 秋霞一区二区三区| 亚洲人精品亚洲人成在线| 亚洲av综合网| 欧美翘臀一区二区三区| 国产丰满成熟女性性满足视频| 日本91在线| 国产高清无码第一十页在线观看| 青青草原国产| 国产后式a一视频| 韩日午夜在线资源一区二区| 亚洲成人一区在线| 99re视频在线| 久久免费成人| 国产精品妖精视频| 欧美精品在线视频观看| 色综合成人| 亚洲无码一区在线观看| 野花国产精品入口| 亚洲美女久久| 国产乱子伦精品视频| 无码精品一区二区久久久| 九九香蕉视频| 中国毛片网| 欧美午夜在线视频| 国产第一页屁屁影院| 色窝窝免费一区二区三区| 国产精品无码翘臀在线看纯欲| 国产国拍精品视频免费看| 成年人国产网站| 国产爽爽视频| 亚洲AⅤ无码国产精品| 亚洲va在线观看| 国产JIZzJIzz视频全部免费| 老色鬼久久亚洲AV综合| 国产视频你懂得| 中文字幕在线一区二区在线| 欧美成人怡春院在线激情| 欧美性精品| 香蕉99国内自产自拍视频| 亚洲视频影院| 精品综合久久久久久97超人| 一区二区理伦视频| 污视频日本| 久草性视频|