冷循環射頻消融術治療原發性肝癌患者療效及外周血Treg細胞的變化觀察

李亞敏，王瑞婷，王瑛瑛

肝癌是腫瘤科常見的一種惡性腫瘤，具有較高的發病率和病死率，危害極大。臨床上，以原發性肝癌(primary liver cancer，PLC)為主[1，2]。PLC的具體發病原因尚不清晰，但在長期的研究中發現PLC的發病可能與肝硬化和病毒性肝炎有關。目前，該病的發病率呈現緩慢上升的趨勢[3，4]，每年因PLC死亡的患者高達38萬人[5]。肝動脈化療栓塞術(TACE)是現階段治療PLC的重要方法，可通過化學藥物控制腫瘤進展、緩解臨床癥狀，然而該治療方法的操作具有一定的難度，對腫瘤鄰近重要器官可能有一定的不利影響或對腫瘤的殺滅效果并不滿意[6，7]。冷循環頻射消融術是治療惡性腫瘤的方法之一。近年來，隨著儀器設備和操作技術的改進，該技術已在臨床上獲得了較好的治療效果。本研究采取冷循環射頻消融術治療PLC患者，也獲得了較好的治療效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2018年4月～2019年4月我院收治的PLC患者94例，男49例，女45例；年齡28～65歲，平均年齡為(56.3±6.3)歲。PLC診斷參照中華人民共和國衛生部頒布的《原發性肝癌診療規范(2011年)》的標準[8]。排除標準：近半年內因其它疾病有過重大外科手術，對本研究治療方法不耐受者、非PLC、預計生存時間不足3個月、患有血液系統疾病、自身免疫性疾病或嚴重的心腦血管疾病。采用隨機數字表法將患者分為射頻消融治療47例和TACE治療47例，兩組性別、年齡和病情比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究開展之初上報我院醫學倫理委員會并通過審核，患者及其家屬簽署知情同意書。

1.2 治療方法 在TACE治療時，患者取仰臥位，全身麻醉，采用Seldinger法穿刺股動脈、插管，置入5F動脈鞘，將5F RH導管送至腸系膜上動脈和腹腔動脈，使用Philips PD20型平板血管造影系統行數字減影血管造影檢查，確定腫瘤位置、大小、供血動脈，注入按1∶1比例配置的碘化油(上海萬代制藥有限公司，生產批號：20151102)與表柔比星[輝瑞制藥(無錫)有限公司，生產批號：20150906]混懸乳液或加用明膠海綿(金陵藥業股份有限公司南京金陵制藥廠，生產批號：20150722)栓塞。隨后，再次行數字減影血管造影檢查，觀察腫瘤的血供情況。當腫瘤血供被阻斷后，拔出導管，對穿刺點行止血、包扎；在行射頻消融治療時，在彩超引導下接受冷循環射頻消融治療，使用TM-RFTI1型冷循環射頻消融系統(江蘇天馬高科技有限責任公司)，包含射頻源、蠕動泵、冷循環電極、中性電極板。使用Philips超聲診斷儀或日本生產的ALOKAα10型彩色多普勒超聲儀引導。術前常規禁食8 h，在手術前15 min，給予哌替啶(宜昌人福藥業有限責任公司，生產批號：20150724)50 mg和非那根(天方藥業有限公司，生產批號：20111009)25 mg肌肉注射。應用2%利多卡因(山東圣魯制藥有限公司，生產批號：20110802)行局部麻醉。對于腫瘤直徑<3 cm的病灶，采取1針穿刺，反之則采取多針穿刺，采用多點消融的空間布針方案。在腫瘤消融過程中，遵循由深至淺的原則，治療面積包括病灶及其周邊1～2 cm組織；對于位于左肝的病灶，選擇經左肋弓內側進針，對于位于右肝的病灶，選擇右腋前或腋中線進針，在進針完畢后使用彩超檢查射頻電極的位置。確定位置準確后，開啟冷循環泵，以阻抗模式行射頻消融治療。在治療過程中，每個點治療時間為12 min。隨后，再依據病灶消融情況，選擇調整電極位置，行多次追加治療。在治療結束拔針時以手動模式在35 w條件下緩慢退針，行針道消融。術中靜脈滴注曲馬多(辰欣藥業股份有限公司，生產批號：20100930)300 mg維持止痛。對伴有慢性呼吸道疾病的患者，在術前加用可待因(宜昌人福藥業有限責任公司，生產批號：20121024)0.3 mg，以避免術中咳嗽。

1.3 臨床療效 參照RECIST 1.1標準[9]分為完全緩解、部分緩解、穩定和疾病進展。疾病控制率=(完全緩解+部分緩解+穩定)/總例數×100%。

1.4 實驗室檢查 使用DPP型全自動生物化學分析儀檢測血生化指標；使用FACSCalibur流式細胞儀檢測外周血調節性T細胞(regulatory T cells，Treg，美國Bectond-Dickinson公司)。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較 在治療后3個月復查，射頻消融治療組疾病控制率顯著高于TACE治療組(P<0.05，表1)。

2.2 兩組肝功能和外周血Treg細胞百分比比較 在治療3個月，射頻消融治療組血清ALT和ALP水平及外周血Treg細胞百分比顯著低于TACE治療組，差異有統計學意義(P<0.05，表2)。

2.3 兩組術后并發癥發生率比較 射頻消融術后并發癥發生率顯著低于TACE治療組，差異有統計學意義(P<0.05，表3)。

表1 兩組臨床療效[n，(%)]比較

表2 兩組肝功能及外周血Treg細胞比較

表3 兩組術后并發癥發生率[n，(%)]比較

3 討論

PLC源自肝臟的上皮或間葉組織，在發病之初臨床癥狀并不明顯。隨著疾病進展，部分患者會表現出肝區疼痛、下肢水腫等臨床癥狀，對患者的日常生活帶來嚴重影響[10，11]。肝動脈化療栓塞術是現階段治療PCL的方法之一。雖然在治療過程中能夠在一定程度上控制疾病的進展，但在部分患者中對癌細胞的殺滅效果并不滿意，不利于患者預后的改善。冷循環射頻消融術是介入治療的一種，在惡性腫瘤患者中已取得了良好的治療效果，受到了較多臨床醫師的關注[12，13]。

肝動脈化療栓塞術是治療PLC的方案之一。該方法通過化療藥對癌細胞進行殺滅，進而達到改善患者臨床癥狀的目的，已有較多的學者對其治療效果進行了報道[14，15]。本研究在進行射頻消融治療時，在彩超的幫助下確定腫瘤的位置、大小等信息，并實施冷循環射頻消融術，使用冷凍灌注液冷卻電極對腫瘤細胞進行殺滅，在殺滅過程中依據腫瘤位置的深淺由深至淺對癌細胞進行殺滅。同時，在拔針的過程中還對針道進行消融，避免了癌細胞經針道轉移的可能。本研究結果表明，射頻消融治療后疾病控制率為89.4%，顯著高于TACE治療的72.3%，提示冷循環射頻消融術用于PLC患者能夠提高臨床治療效果。這一研究結論與國外學者的研究結果能相互印證[16]。

治療后，射頻消融治療組血清ALT、ALP和血Treg細胞百分比顯著低于治療前，也比TACE治療組低，表明冷循環射頻消融術治療PLC患者能夠改善患者肝功能指標，降低Treg細胞比率[17，18]。本研究射頻消融治療患者經冷循環射頻消融術治療后癌細胞的增殖和侵襲能力可能得到了抑制，患者肝功能得到恢復。外周血Treg細胞是現階段臨床研究的熱門課題，一般認為Treg細胞水平的高低能夠反映患者的預后，往往Treg細胞低水平代表了惡性腫瘤患者良好的預后。射頻消融治療患者血清ALT、ALP和Treg細胞降低更加顯著，可能是該治療對肝臟的損傷比較小。

另外，在術后的并發癥觀察中，射頻消融術后并發癥發生率顯著低于TACE治療，可見冷循環射頻消融術治療PLC患者安全有效，并在降低術后并發癥方面表現出了獨特的優勢。冷循環射頻消融術后并發癥發生率低可能是在彩超幫助下手術定位準確，可避免對其它組織產生損傷，更有利于患者術后恢復，從而降低了并發癥的發生[19，20]。

綜上所述，冷循環射頻消融術治療PLC患者能夠提高臨床治療效果，降低血清ALT、ALP和外周血Treg細胞百分比，術后并發癥發生率較低。本研究仍存在一些不足，可能會對后期研究研究的開展產生一定的影響，比如納入樣本量較少、納入患者的腫瘤臨床分期、病灶大小和組織學分級等不明，未能對患者的遠期預后進行隨訪。因此，在后續的研究中，我們將擴大樣本量，延長隨訪時間，開展多中心的研究，以期為采用冷循環射頻消融術治療PLC患者提供更加詳細和可信的資料。