主動免疫治療對不明原因早期復發性自然流產患者妊娠結局的影響

孫震

復發性流產(RSA)是婦產科廣受關注的生殖疾病，目前國內通常將3 次及以上且發生在妊娠28 周內發生的流產稱為RSA［1］。該疾病會隨著流產次數的增多而升高，成為威脅女性生殖健康的主要因素［2］。目前臨床上有＞45%的患者病因無法確定，稱為URSA。近年來有研究表明，有＞50%的URSA 可能是由于免疫因素導致［3］。本研究通過對比分別接受LIT 和黃體酮常規保胎患者治療前后淋巴細胞免疫表型、IFN-γ 與IL-4水平變化，并記錄兩組患者的妊娠結局，旨在探討LIT對URSA 患者的臨床療效，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2018 年10 月～2019 年10 月收治的120 例URSA 患者為研究對象。納入標準：①夫婦兩人無遺傳因素問題；②患者自然流產次數≥3 次；④婦科檢查，子宮附件檢查等無器質性病變；⑤生殖器官無解剖畸形。排除標準：①夫婦任意一方患有乙肝、梅毒等傳染性疾病；②不愿參與者。將患者隨機分為LIT 組和P 組，各60 例。LIT 組年齡23～41 歲，平均年齡(31.24±7.58)歲。P 組年齡24～40 歲，平均年齡(32.07±6.99)歲。兩組患者一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 LIT 組：抽取患者配偶或第三方健康男性靜脈血25 ml，取等量Hanks 溶液混合，在分流層面上進行離心，取Hanks 溶液進行洗滌，取得淋巴細胞濃度為2×1010～3×1010/L，治療用量約為0.3 ml/次，行前臂3 點皮內注射，皮丘直徑0.2～0.4 cm 左右，孕前每2 周重復治療1 次，3～4 次為1 個療程。若患者3 個月內未孕，加強治療1 次；若患者妊娠，加強1 次后每3個月1次，直至超聲顯示胎盤發育穩定即可結束治療。P 組：黃體酮注射液(西南藥業股份有限公司，國藥準字H50020104，規格：1 ml∶20 mg)，自妊娠開始，每周注射2～3 次，10～20 mg/次。連續治療1 周。

1.3 觀察指標 分別在治療前后進行相關檢查。①淋巴細胞免疫表型：抽取靜脈血3 ml，檢測TC、NKC 的細胞表型，主要觀察的細胞表型為TC 亞群：CD3+T、CD4+T；NKC 亞群：CD3-CD56+NK、CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK、CD56+CD69+NK。②IFN-γ、IL-4水平：采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測分析。記錄兩組治療前后指標變化，觀察妊娠結局。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0 統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差()表示，采用t檢驗；計數資料以率(%)表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療前后TC、NKC 表型變化比較 治療前，兩組CD3+T、CD4+T水平比較，差異無統計學意義(P＞0.05)；治療后，LIT組CD3+T水平高于P組、CD4+T水平低于P組，差異有統計學意義(P＜0.05)。治療前，兩組CD3-CD56+NK、CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK、CD56+CD69+NK 水平比較，差異無統計學意義(P＞0.05)；治療后，LIT 組患者CD3-CD56+NK、CD56+CD69+NK水平均低于P組，CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK 水平均高于P 組，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1，表2。

表1 兩組治療前后TC 表型變化比較(，%)

表1 兩組治療前后TC 表型變化比較(，%)

注：與P 組治療后比較，aP＜0.05

表2 兩組治療前后NKC 表型變化比較(，%)

表2 兩組治療前后NKC 表型變化比較(，%)

注：與P 組治療后比較，aP＜0.05

2.2 兩組治療前后IFN-γ、IL-4 水平比較 治療前，兩組IFN-γ、IL-4 水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)；治療后，LIT 組IFN-γ 水平低于P 組，IL-4水平高于P 組，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組治療前后IFN-γ、IL-4 水平比較(，ng/L)

表3 兩組治療前后IFN-γ、IL-4 水平比較(，ng/L)

注：與P 組比較，aP＜0.05

2.3 兩組妊娠結局情況比較 LIT組未成功妊娠2例，P 組未成功妊娠3 例。LIT 組的再發流產率低于P 組，成功分娩率高于P 組，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表4。

表4 兩組妊娠結局情況比較［n(%)］

3 討論

妊娠屬于一種胎兒與母體共生形態，在正常妊娠情況下，母體免疫功能正常調節使機體對胎兒抗原產生耐受，母體免疫系統并不會因胎兒抗原而產生免疫反應［4］。但對于URSA 患者來說，機體免疫調節能力失常，免疫功能紊亂，母體與胎兒之間的免疫平衡喪失，母體的免疫系統會對胚胎發起免疫攻擊，極易導致流產［5］。為提高URSA 患者妊娠分娩的成功率，對LIT 法治療URSA 的療效與相關指標變化對比研究，對患者妊娠結局及臨床治療有重要意義。

王挺等［6］的研究發現，CD4+T 細胞減少可降低母體對胎兒的免疫排斥作用。上述結論與本研究結論存在共性。探究其原因，可能是因為URSA 患者T 細胞亞群表達失衡，導致機體強排斥胎兒。LIT 可調節患者免疫功能，穩定患者的免疫功能。NKC 具有細胞毒性，當患者體內NKC 細胞表達活躍時，機體內處于強排斥免疫狀態，極易對胎兒抗原產生反應，對胎兒生存發育構成威脅。鐘光芹等［7］的研究發現，妊娠成功與否在一定程度上決定于IFN-γ、IL-4 水平。分泌IFN-γ 等細胞因子所產生的免疫反應會損害滋養層細胞及胎兒。IFN-γ 含量增加產生的炎性反應使胎兒狀態不穩定，最終導致流產。IL-4 等細胞因子所參與的反應可提高機體排斥反應的耐受力。謝多等［8］通過研究發現，LIT 療法對提高URSA 患者成功分娩率有著重要意義。LIT 的機理就是通過注射淋巴細胞調整患者免疫功能，大多數URSA 患者免疫系統失衡，母體與胚胎存在免疫沖突，該療法緩解患者免疫失衡狀態，減輕母體對胚胎的排斥，使胎兒存活率顯著上升。

綜上所述，LIT 對URSA 患者療效明顯，能有效降低母胎間免疫排斥，提高胚胎存活率，降低流產率，值得臨床推廣。