MGCT法對輸血科血型鑒定準確率及不同疾病陽性分型的影響

陳貴存

（河南省濮陽市安陽地區醫院輸血科 安陽455000）

不規則抗體指ABO血型系統之外的抗體，其中最常見的為Rh血型。不規則抗體是導致新生兒溶血病、血型鑒定困難、輸血不良反應的重要原因，對既往有輸血史、妊娠史患者，通過檢驗不規則抗體可有效提高輸血安全、預防新生兒溶血病[1]。血型鑒定與輸血安全密切相關，提高血型鑒定準確率是確保輸血安全的重要保障，與患者生命安全息息相關。既往研究通過鹽水法、蛋白酶法、聚凝胺法進行血型鑒定，配血時需反復洗滌紅細胞，操作復雜、繁瑣，對結果造成一定影響，降低檢驗靈敏度。微柱凝膠抗人球蛋白試驗（Microcolumn Gel Coombs Test,MGCT）法對血液樣本需求量少，污染相關影響較小，在輸血檢驗中具有較高靈敏度，有助于快速匹配血型[2]。本研究將MGCT法應用于ABO、Rh（D）血型鑒定及不規則抗體檢測，以分析其臨床價值。現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2018年10月～2020年3月輸血科患者1 255例，其中男704例，女551例；年齡22～53歲，平均（37.51±7.08）歲；合并妊娠史247例，合并輸血史116例。

1.2 入組標準（1）納入標準：年齡18～60歲；無嚴重血液科疾病；新鮮血液標本。（2）排除標準：合并嚴重臟器功能障礙、免疫抑制相關疾病、感染性疾病。

1.3 檢測方法 均以MGCT法、凝聚胺法鑒定ABO及Rh（D）血型。標本采集：抽取空腹靜脈血2 ml，置入抗凝真空無菌采血管。（1）MGCT法檢測：選擇長春博迅生物技術有限責任公司的凝膠卡標記，將譜紅細胞以低離子溶液配成0.6%～0.7%濃度，共3份，加入50μl至所標記微管；分離血漿，分別在1、2、3孔加入50μl血漿，并對應加入50μl不規則抗體篩查譜細胞；置入孵育器15 min，溫度設置為37℃；以離心機進行離心操作，以900 r/min轉速離心2 min后，再以1 500 r/min轉速離心3 min；判斷結果。對MGCT法檢出陽性者行分型檢測，分別于Ctrl、IgG、C3d孔中加入1%紅細胞懸液50μl，孵育結果與上述方法一致。（2）凝聚胺法：選擇中山市生科試劑儀器有限公司的凝聚胺試劑盒，依次標記相同試管3個為對照管、主測管及次測管；主測管及次測管取獻血者1滴4%左右紅細胞滴入受血者血漿，對照管取獻血者1滴4%左右紅細胞滴入陽性對照組血漿；均給予低離子溶液0.65 ml、凝聚胺溶液2滴，混勻后室溫下孵育；以離心10 s，轉速3 400 r/min，取0.1 ml上層清液檢測凝聚反應，若無凝聚反應則表明試驗失敗。（3）統計不統疾病MGCT法檢出陽性分型情況。

1.4 判定標準（1）MGCT法。陽性：紅細胞聚集塊在凝膠中端或表面，或出現溶血反應，表明獻血者與受血者交叉配血不合。陰性：紅細胞沉降在底部，表示獻血者與受血者交叉配血相合。（2）凝聚胺法。顯微鏡下未見凝集則表示受血者及獻血者交叉配血相合，若出現凝集則表示配血不合。

1.5 觀察指標（1）統計MGCT法與凝聚胺法對ABO及Rh（D）血型鑒定結果。（2）統計MGCT法與凝聚胺法不規則抗體檢出情況。（3）對MGCT法檢出陽性者行分型檢測

1.6 統計學分析 通過SPSS22.0統計學軟件處理數據，計量資料以（±s）表示，行t檢驗，計數資料以%表示，行χ2檢驗，檢驗標準α＝0.05，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 MGCT法與凝聚胺法ABO及Rh（D）血型鑒定結果比較MGCT法ABO血型鑒定準確1 246例，凝聚胺法ABO血型鑒定準確1 214例，兩種方法比較，MGCT法ABO血型鑒定準確率99.28%（1 246/1 255）高于凝聚胺法96.73%（1 214/1 255）（χ2=20.896，P＜0.001）。MGCT法Rh（D）血型鑒定準確1250例，凝聚胺法Rh（D）血型鑒定準確1 226例，兩種方法比較，MGCT法Rh（D）血型鑒定準確率99.60%（1 250/1 255）高于凝聚胺法97.69%（1 226/1 255）（χ2=17.174，P＜0.001）。

2.2 MGCT法與凝聚胺法不規則抗體檢出情況比較MGCT法不規則抗體檢出率1.20%與凝聚胺法0.64%比較，無明顯差異（P＞0.05）。見表1。

表1 MGCT法與凝聚胺法不規則抗體檢出情況比較[例（%）]

2.3 MGCT陽性分型檢出結果MGCT法檢出陽性者中存在IgG型37例、C3d型5例、IgG+C3d型13例。見表2。

表2 MGCT陽性分型檢出結果（例）

3 討論

若輸注的紅細胞與機體血清免疫抗體不合，則會導致嚴重輸血反應，因此臨床輸血前需對有輸血史、妊娠史患者進行不規則抗體篩查。為預防輸血不良反應發生，美國血庫協會規定進行交叉配血前需檢測紅細胞抗原中的不規則抗體。常規輸血前檢查方法如凝聚胺法操作過程繁瑣，受人為因素影響較大，自動化程度低，檢測準確率、效率受到一定影響。輸血患者多為危重癥，輸血不及時會增加致死風險，而輸注血型不合則出現抗凝現象，因此，快速、有效進行不規則抗體檢測及血液配對極為重要。

免疫溶血反應是輸血嚴重不良反應，其中以不規則抗體所致居多。本研究通過MGCT法、凝聚胺法檢測均發現不規則抗體抗-C、抗-c、抗-D、抗-E，且上述抗體皆屬于免疫球蛋白G（IgG）抗體。IgG抗體是由輸血免疫刺激產生，屬溫抗體，具有紅細胞致敏作用，同時IgG效價強弱會直接影響輸血反應，可誘發遲發性溶血性輸血反應[3]。本研究經檢測，MGCT法不規則抗體檢出率為1.20%，凝聚胺法不規則抗體檢出率為0.64%。陳麗娟等[4]在分析不規則抗體篩查陽性結果時發現，不規則抗體篩查陽性率為1.16%（22/1 896），與本研究MGCT法檢測結果相近，證實本研究結果可靠。而本研究中MGCT法不規則抗體檢出率略高于凝聚胺法，其原因可能在于IgG抗體分子長度僅為24 nm，分子鏈較短，難以有效凝聚。

本研究中MGCT法ABO及Rh（D）血型鑒定準確率均高于凝聚胺法（P＜0.05），提示MGCT法可提高ABO及Rh（D）血型鑒定準確率。凝聚胺法以低價離子介質破壞紅細胞表面負電荷并促使其聚集，加入凝聚液后通過凝集情況判定結果，凝集散開代表非特異性，凝集不散開代表特異性。但凝聚胺法結果受存放時間長短、液體加入量多少等因素影響，導致血型鑒定準確率有所降低。而MGCT法是新型血型配對方法，是由凝膠分子技術與抗原抗體反應相結合而形成的產物，可通過系統進行離心速率調整，通過控制凝膠濃度調節分子篩孔徑大小，凝膠顆粒網能快速分離凝結及非凝結紅細胞，單一微柱孔徑僅允許1個紅細胞通過，若紅細胞凝結無法通過則表示為陽性，若紅細胞通過則表示為陰性[5～6]。MGCT法通過標準化定量操作降低操作人員對結果評判的主觀性，且重復性好，分離游離紅細胞及凝集紅細胞后可清晰顯示檢測結果，檢測結果確切、客觀，可最大程度避免人為因素對結果的干擾。與傳統檢測方式相比，MGCT法靈敏度較高，金燕萍等[7]報道稱MGCT應用于臨床不規則抗體鑒定，靈敏度可達97.96%，對確保輸血安全有重要價值。因此，MGCT法有助于提高不規則抗體檢出準確率。

本研究對不同疾病MGCT法陽性患者進行分型檢測，發現IgG型明顯較多，而通過對不同疾病患者進行分型檢測，有助于明確該疾病嚴重程度，對輔助疾病診斷有積極作用。另外，MGCT法精簡紅細胞洗滌過程，操作更為簡單，對檢測標本量需求較少，尤其適用于大面積燒傷、嬰幼兒等難以采集血液標本患者，適用性廣，且標本保存時間長，便于后續行回顧性研究或原始資料查找。

綜上所述，MGCT法具有操作簡便、靈敏度高等優勢，應用于輸血科ABO及Rh（D）血型鑒定可明顯提高準確率，有效檢出不規則抗體，同時可輔助疾病診斷，評估疾病嚴重程度，具有較高應用價值。