PCR檢驗法和細菌培養法對陰道細菌檢驗效果的對比研究

（遼寧省健康產業集團鐵煤總醫院檢驗科，遼寧 調兵山 112700）

陰道炎是一種常見的婦科疾病，因為此病的出現與進展十分緩慢，大部分陰道炎患者早期沒有顯著表現，如果患者出現顯著癥狀表現，通常已經引發腹部與盆腔疾病出現[1]。相關研究顯示：如果患者陰道炎長時間不愈，會引發不孕。所以，早期診斷陰道炎成為現階段研究的重點[2-3]。細菌培養法是臨床對陰道炎診斷的常用方法，伴隨研究的不斷加深，發現細菌培養法的時間較長，陽性率不高，患者通常需要進行多次細菌培養才可以確診。PCR檢驗法是一種新型的檢測方法，其對陰道炎的診斷價值顯著[4-5]。為了探究陰道細菌檢驗中應用PCR檢驗法與細菌培養法的檢驗效果對比，選取本院2017年5月至2018年8月進行陰道細菌檢驗的97例患者，全部患者分別接受PCR檢驗法與細菌培養法檢驗，并對不同檢驗方法對陰道細菌檢驗準確率進行對比，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 于2017年5月至2018年8月隨機選取本院進行陰道細菌檢驗的97例患者，全部患者都為育齡期女性，入院時都存在一定的白帶分泌增多與陰道瘙癢等癥狀，都滿足陰道炎的診斷標準，所有患者都自愿參與此次研究；并將處在妊娠期患者、月經期患者、48 h內有過性生活患者以及近期應用過陰道局部用藥患者等充分排除。97例患者最小年齡31歲，最大年齡46歲，平均年齡（39.25±8.37）歲；最短病程4個月，最長病程20個月，平均病程（12.26±8.54）個月；通過臨床及檢驗確診顯示：棒狀桿菌、加特納菌、腸球菌分別有30例、32例、35例，所占比例分別為30.93%、32.99%、36.08%。

1.2 方法 ①采集陰道分泌物的方法：于陰道后穹隆處，用無菌棉簽蘸取陰道分泌物，并把陰道分泌物放在無菌鹽水內貯存，留置進行陰道細菌檢驗。②PCR檢驗法：選擇1000 μL陰道分泌物和生理鹽水混合液進行離心處理，離心時間15 min，每分鐘離心12 000轉，將上層清液充分棄掉，把剩余組織裂解液在60 ℃水中放置10 min，取出后再進行15 min的離心處理，每分鐘12 000轉，并把獲得的上清液應用在DNA模板的制作中。檢驗人員需選擇陰性作為參考，其中不加模板DNA，于DNA模板擴增過程中，需在其中添加引物或緩沖對等，把標本有效置入PCR儀并進行循環處理。③細菌培養法：選取陰道分泌物和生理鹽水混合液在培養基內放置，并于二氧化碳孵箱內持續培養3 d。培養基內長成菌落后，選擇灰色、光滑并且露滴狀細菌進行細菌生化鑒定。

1.3 觀察指標 觀察與記錄不同檢驗方法對陰道細菌檢驗陽性率與陰道細菌分布檢驗準確性。

1.4 統計學分析 選擇統計軟件SPSS21.0對數據進行分析，計數資料（如陰道細菌檢驗陽性率等）以百分率（%）表示，行χ2檢驗，P＜0.05表示組間比較差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢驗方法對陰道細菌檢驗陽性率的對比 PCR檢驗組患者陰道細菌檢驗陽性率87.63%，與細菌培養組患者的75.26%相比較存在統計學方面的意義（P＜0.05）；PCR檢驗組患者陰道細菌檢驗陰性率12.37%，與細菌培養組患者的24.74%相比較存在統計學方面的意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同檢驗方法對陰道細菌檢驗陽性率的對比[n（%）]

2.2 不同檢測方法對陰道細菌分布檢驗準確性的對比 PCR檢驗組患者對加特納菌、棒狀桿菌檢驗準確率分別為34.02%、28.87%，與細菌培養組患者的20.62%、16.49%相比較存在統計學方面的意義（P＜0.05）；PCR檢驗組患者對腸球菌檢驗準確率26.80%，與細菌培養組患者的27.84%相比較不存在統計學方面的意義（P＞0.05）。見表2。

表2 不同檢測方法對陰道細菌分布檢驗準確性的對比[n（%）]

3 討論

多數研究顯示：白帶檢驗結果反映機體健康狀態，所以女性如果有白帶分泌物增多表現，需馬上到醫院就診，并對疾病充分重視，為婦科病的診斷與治療提供有利條件[6-7]。最近幾年，伴隨女性工作壓力、生活壓力的增大，再加上生活節奏的轉變與飲食結構的變化，女性陰道病的發病率越來越高，最常見的為陰道炎[8-9]。陰道炎是一種常見的女性疾病，和女性陰道中寄生菌群失衡有直接聯系。通常情況下，女性陰道中的寄生菌群平衡，細菌分泌不同物質會使陰道中的環境維持穩定狀態。如果陰道菌群失衡，維持菌群平衡的重要細菌會大量死亡，導致病菌快速增生，于繁殖期多數營養物質被消耗，導致陰道上皮細胞應有的代謝功能喪失，導致陰道內酸堿水平異常。陰道上皮細胞失去了屏障保護功能，會導致炎癥出現，癥狀表現為外陰瘙癢等，對患者生活質量造成不利影響[10-11]。所以，探究一種能夠及早判定患者有無感染的出現，確定致病菌種的檢查方法十分重要。臨床上細菌檢驗結果可為疾病診斷提供有利參考，對臨床治療也有重要作用，陰道檢驗精確度對陰道疾病的診斷有積極影響，所以，要求陰道檢驗準確性較高。陰道分泌物檢查是對陰道炎診斷的輔助方法，可反映出陰道內菌群與炎性感染程度。細菌培養法與PCR檢驗法是對陰道細菌檢查的常見方法。細菌培養法對陰道菌群檢測的應用效果較好，但此種方法存在較大的不足，如 準確率低以及檢驗時間長等。PCR檢驗法是一種新型的檢驗方法，其屬于熒光定量檢測方法，其融合了DNA雜交特異性與RCP敏感性，具有多種優勢，如精度準及準確率高等[12]。通過分析發現，PCR檢驗法操作簡便，但對設備有較高的要求，可在檢驗中達到無菌操作標準，防止細菌感染的出現，進而避免檢驗結果出現異常。并且PCR檢驗法的檢驗時間比較短，可快速獲得檢驗結果，防止患者反復進行檢驗，使其在陰道細菌檢驗中的花費時間和精力明顯減少。多數報道表明：PCR檢驗法的操作簡單、所用時間較短，且特異性與靈敏度都比較好，在陰道細菌檢驗中較為適用。與PCR檢驗法相比，細菌培養法的理論知識比較簡單，但所用時間較長，極易在檢驗時產生細菌污染的情況，對檢驗結果的準確性造成影響[13]。

本研究結果顯示：PCR檢驗組患者陰道細菌檢驗陽性率87.63%，高于細菌培養組的75.26%；PCR檢驗組患者對加特納菌、棒狀桿菌檢驗準確率分別為34.02%、28.87%，高于細菌培養組的20.62%、16.49%；PCR檢驗組患者對腸球菌檢驗準確率26.80%，與細菌培養組的27.84%相比較不存在統計學方面的意義。楊青青等[14]學者探究了細菌培養法與PCR檢驗法對陰道細菌檢驗的臨床價值對比，其選取81例陰道炎患者分別進行細菌培養法與PCR檢驗法檢驗，結果顯示：PCR檢驗法的檢驗陽性率77.78%高于細菌培養法的39.51%，此研究結果與本研究一致。

總之，PCR檢驗法具有操作簡單、檢驗準確率高以及所用時間短等優勢，其對陰道細菌檢驗的準確率優于細菌培養法。